Fluorescence Microscopy

综述

• 荧光显微镜简介

  学习荧光的基本概念。荧光是普遍存在的发光现象，其中光敏分子在由物理、机械或化学机制形成的电子激发态下发光。

• 荧光显微镜

  与双折射等基于宏观样本特征的其他光学显微镜不同，荧光显微镜能够仅基于荧光发射特性对单个分子的分布进行成像。

• 光源

  为了产生足够的激发光强度以提供能够检出的二次荧光发射，需要高功率的的光源，如 LED、汞灯和氙灯等。

• 优化和故障排除

  本文综述了荧光显微镜术的主要特点，如检测弱荧光信号或高亮荧光标本，以及显微镜配置的常见问题。

• 成像探测器

  本指南主要讨论荧光检测的基础知识，帮助您根据特定应用选择合适的荧光显微镜检测器。

• 荧光团简介

  宽场荧光和激光扫描共聚焦显微镜以荧光发射为主要成像模式，主要原因是该技术具有较高的灵敏度。

• 光激活荧光蛋白

  光激活蛋白通常在成像波长的激发下不发射或仅发射少量初始荧光，但在经不同波长下的照射激活后，荧光强度增加。

• 荧光显微镜的错误用法

  了解更多荧光照明成像参数设置的不同组合，如何给显微镜学家造成哪些特殊问题。

• 荧光滤片组合实用指南

  主流制造商提供多种荧光滤色块及滤光片组，能够满足当前常用荧光团成像的应用。

• 荧光和共聚焦显微镜的术语表

  此内容可使您深入了解荧光和激光扫描共聚焦显微镜的指南和参考工具。

高端荧光显微成像技术

• 共聚焦显微镜简介

  共聚焦显微镜具有控制景深，消除或减少对焦平面外背景信号的能力，从而可以在厚样本上采集连续光学切片。

• 多光子显微镜

  多光子荧光显微镜将激光扫描显微镜技术与长波长多光子荧光激发技术相结合，是一种可采集活体深层高分辨和3D图像的强大工具。

• 荧光共振能量转移（FRET）

  在光学显微技术中，荧光共振能量转移（FRET）技术可在纳米范围内确定两个分子之间的接近程度。

• 全内反射荧光显微镜

  全内反射荧光显微镜（TIRFM）常用于研究分子与表面的相互作用，因而在细胞和分子生物学的众多学科中极为重要。

• 光学显微镜激光系统

  光学显微镜中使用的激光器是高强度单色光源，可用光捕获、寿命成像研究和光漂白恢复等多种技术。

• 荧光与DIC组合显微镜

  荧光显微镜可与微分干涉（DIC）照明等对比增强技术相结合，通过DIC定位到样本中的特定感兴趣区域，最大限度地减小了光漂白的效应。

• 荧光和相差组合显微镜

  为了最大限度地减少光漂白，可将荧光显微镜和相差照明组合。这样即可使用相差技术定位到样本中的特定感兴趣区域，然后无需重新定位样本即将显微镜切换到荧光模式。

• 荧光显微镜数字图像库

  图像中展示的标本是使用特定荧光染料和自发荧光的多学科实例。图像用数码相机或传统显微摄影技术及Fujichrome Provia 35毫米透明胶片拍摄。

荧光显微镜的结构

• 奥林巴斯正置显微镜

  了解奥林巴斯正置落射荧光显微镜。该显微镜配有一个垂直光源，其中包含一个滤色块转盘和一个荧光激发光源。

• 奥林巴斯倒置显微镜

  带倒置式镜架的显微镜（奥林巴斯IX70倒置显微镜）为组织培养应用而设计，能够通过反射光路生成荧光照明。

互动式Java教程

• 荧光显微镜的光路

  了解正置显微镜中的光路。教程中展示的显微镜图是奥林巴斯正置显微镜的剖面图。

• 倒置显微镜的光路

  了解用于组织培养的倒置显微镜的光路，包括透射（卤钨灯）和落射荧光（汞灯）照明方式。

精选参考文献

• 精选参考文献

  随着共聚焦、多光子、反卷积和全内反射等新技术的发展，特别是荧光发色团技术的进步，荧光显微成像技术领域正在经历一次复兴。 下列参考文献用于构建Molecular Expressions Microscopy Primer的Fluorescence荧光部分。

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