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利用支持近红外的共聚焦显微镜看得更清楚

该系统的增强型技术带来了扩展的多色成像应用,可在一张图像中看到更多内容。

近红外(NIR)成像通过扩展FV4000系统的激发(λ_Ex)和探测(λ_Em)光谱曲线,可提供更强大的多色成像功能。这样就可以使用额外染料来尽量减少发射信号的重叠。

  • 利用更新后的TruSpectral技术和高灵敏度SilVIR探测器,可扩展到多达六个通道的多色成像
  • 高效率体相位全息透射(VPH)光栅可探测删除 行业领先的400 nm到900 nm波长范围*,最小步长为1 nm
  • 使用多达六个通道的宽带或红移探测器来扩大您的荧光色素选择范围,从而尽量减少光毒性和减少自发荧光
  • 模块化激光耦合器可将从405 nm至785 nm的多达10条激光谱线并联。
     

    *截至2023年3月。

  • 用6种荧光色素标记的人宫颈癌传代细胞。
    细胞核(DAPI;蓝色)、细胞膜(AF488;绿色)、核孔(AF561;黄色)、
    微管(Qdot605;洋红色)、线粒体(MitoTracker DeepRed;青色)、肌动蛋白(AF750 鬼笔环肽;灰色)。

适用于高效近红外荧光成像的高质量光学器件

FV4000系统的光学元件在400 nm至1300 nm范围内具有高透过率,包括镀银而非镀铝的常规扫描振镜和共振扫描振镜。

我们屡获殊荣的X Line物镜可校正400至1000 nm范围的色差。它们还具有更高的数值孔径、出色的平场性,以及从紫外到近红外的高透射率,从而提高了多色成像能力。

为了提高共定位的可靠性,我们的专用A Line (PLAPON60XOSC2)油浸物镜(ne~1.40)可明显减少色差,以便进行严格的共定位分析。

X系列

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使用1K共振扫描振镜在16分钟内共采集了77个四通道XYZ位置(11 × 7),以创建拼接图像,而过去使用常规扫描振镜需花费2小时。H line小鼠大脑的冠状切片,青色;DAPI(细胞核),绿色;YFP(神经元),黄色;Cy3星形胶质细胞,洋红色;AlexaFluor 750(微管)。样品承蒙以下人员和机构提供:日本理研CBS细胞功能动力学部Takako Kogure和Atsushi Miyawaki。

高速捕获高质量共聚焦图像

独特的先进技术组合能以比传统激光扫描显微镜系统更快的速度生成高质量图像。

  • 高速捕获高分辨率图像:FN20下每像素0.033 µs的1K × 1K共振扫描振镜和SilVIR探测器使您能够快速采集噪点很少的图像
  • 质量出色的宏观图像:快速采集具有卓越质量的拼接宏观图像,从而最大限度地利用您的时间和提升研究潜力

简单、精确的超分辨率成像

使用FV4000显微镜轻松捕获超分辨率图像。

  • 使用我们的A Line HR物镜和超分辨率模块(FV-OSR)轻松观测亚细胞结构
  • FV-OSR可自动优化共聚焦孔径,以探测高频成分并增强其对比度,从而实现120 nm分辨率
  • 得益于SilVIR探测器和实时处理功能,超分辨率图像生成速度达到上一代系统的8倍

共焦模式1AU(左)与超分辨率模式(右)的对比

厚样品中的高分辨率3D图像

用DAPI(青色,细胞核)和AlexaFluor790(洋红色,Ki-67)标记的人宫颈癌传代细胞球。使用405 nm激光只能对表面区域的细胞核进行观察,但使用近红外785 nm可以对细胞球的整个体积进行成像。

在对较厚样品进行成像时,FV4000显微镜可使您捕获高分辨率的3D图像。

  • 得益于SilVIR探测器的宽动态范围和灵敏度,可以利用近红外更长的波长穿透到组织更深层
  • 光散射化合物(如黑色素和血红素)在700至1500 nm波长范围吸光度较少,近红外成像可以减少散射和吸收来增加成像深度
  • 得益于FV4000上的685 nm、730 nm和785二极管激光器,成像深度远超可见光激光器的水平
  • 高NA硅油物镜可尽量减少球面像差,硅油也不会变干,两者都是延时成像的有利条件
  • 使用TruSight反卷积技术可提高整体图像质量和Z轴分辨率,从而获得出色的厚样品3D图像
  • 利用专门的cellSens软件算法,尽享从采集到出版的无缝工作流程

在减少光损伤的情况下精确捕获活细胞的动态变化过程

通常,在较短时间内使用较长波长进行荧光激发更有利于样品的整体健康。使用光毒性较小的光意味着可以进行更长时间的成像,从而可从活细胞成像实验中获得更一致、可再现性更高的数据。

FV4000系统不仅能通过685 nm、730 nm和785 nm激光器提供温和的延时成像,还配备了专用的TruFocus Red Z轴漂移补偿系统,以保持焦点位置。这款升级版TruFocus Red装置支持更大的波长范围,可与各种物镜兼容,包括我们的高性能X Line和A Line系列。

延时光刺激:对C2C12细胞进行了激光损伤。绿色伪彩色表示使用了FM 1-43浴液。图像使用2 μs普通检流计扫描振镜和UPLSAPO60XOHR物镜拍摄。405 nm激光用于光损伤,488 nm激光用于成像。样品承蒙以下人员和机构提供:国家儿童研究所遗传医学研究中心的Daniel Bittel和Jyoti Jaiswal。

用Hoechst33342(细胞核,蓝色)、MitoTracker Green(线粒体,绿色)、LysoTracker Red(溶酶体,黄色)、SiR-Tubulin(微管蛋白,洋红色)、POR-SA-Halo(ER,青色)染色的人宫颈癌传代细胞的延时图像。Hoechst33342: Ex 405 nm/Em,MitoTracker Green:LysoTrakcer Red: SiR-Tubulin: POR-SA-Halo: 样品承蒙以下人员和机构提供:日本名古屋大学转化生物分子研究所(WPI-ITbM)的Masayasu Taki博士和日本名古屋大学理科研究生院的Yuichi Asada和Ryusei Aruga。

用MitoTracker Red(线粒体,洋红色)、POR-SA-Halo(ER,青色)染色的人宫颈癌传代细胞的17小时延时图像。MitoTracker Red: Ex 561nm/Em,POR-SA-Halo: Ex 730nm/Em,样品承蒙以下人员和机构提供:日本名古屋大学转化生物分子研究所(WPI-ITbM)的Masayasu Taki博士和日本名古屋大学理科研究生院的Yuichi Asada和Ryusei Aruga。

清晰的深层图像

将我们的硅油物镜与FV4000显微镜配合使用,可获得样品深处特征和结构的清晰图像。硅油的折射率接近活细胞或组织的折射率,与空气、水或其他油料相比,可大幅降低球差。由于色像差较小,您可以获得样品深处更清晰的图像。而且硅油在37 ℃下不会干燥,因此可有效用于长期延时成像。

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