在本次网络讲座中,奥林巴斯显微镜专家 Lauren 和 Klaus 会阐述复杂显微镜系统中高质量的光学器件的重要性,以及哪些光学特性对最终的高画质具有重要意义。他们还重点介绍了新型物镜制造技术带来的新光学成就,并解释了为何这些新物镜能够令几乎所有光学显微技术应用受益,包括全玻片成像、超分辨率系统以及激光扫描显微成像等。
常见问题解答网络讲座常见问题解答 | 显微镜物镜:魔力之源您会建议如何检查点扩散函数?点扩散函数(Point Spread Function, PSF)是点源或点象经过成像系统后的光场分布。因此,PSF 对于共定位分析非常重要。 要确认PSF状态,建议使用如100 nm 荧光小球的样本,以 10–20 nm 步进采集 Z 序列图像,从而能够在亚分辨率级别测量 PSF。 此外,还建议将奥林巴斯镜油与奥林巴斯镜头配合使用。这是因为折射率 (RI) 和阿贝数(也称为 V 数)都很重要。阿贝数是材料色散的近似指标,描述 RI 如何随波长变化。阿贝数高表示色散低。使用奥林巴斯镜油可避免色散引起的色差。确保检查镜油瓶上的有效期。 最后,确保盖玻片为 1.5H 盖玻片,并考虑封片剂的 RI。 奥林巴斯还提供哪些其他类型的物镜?奥林巴斯为生命科学和材料科学领域大量的应用提供了多种物镜—可能您会感觉无从下手!对此,奥林巴斯官网设置了物镜查找器,大大简化了这一过程,您可以轻松地按功能和应用动态筛选合适的物镜。如果您需要额外的支持,还可以咨询我们当地的销售代表或显微镜工程师。 X Line还是 A Line物镜更适合激光扫描显微成像?为什么?X Line和 A Line物镜都适用于激光扫描显微成像。奥林巴斯 X Line物镜可在 400–1000 nm 范围内提供高质量的色差校正,从而实现极佳的色彩还原。此外,高数值孔径可采集高分辨率、明亮的图像,而合格的边缘校正(平场性)有助于获得从中心到边缘更均匀的高质量图像,即使视场较大也不受影响。 A Line物镜非常适合实现超分辨率等特定应用,也是可以考虑的重要选择。例如,由于硅油在 37˚C 下不会干燥,且其 RI 保持恒定,因此建议将 A Line硅油浸物镜用于活细胞应用。此外,硅油物镜提供了长工作距离,可以在更深层的组织和更广的视场进行观察。其中30倍硅油物镜特别适合类器官和斑马鱼成像。 使用 X Line物镜进行临床全玻片成像有什么优点吗?是的,临床应用是 X Line物镜极具优势的领域之一。例如,在神经科学应用中使用激光扫描共焦显微镜时,通常需要对整个切片进行成像,以便进行统一分析;这个操作需要图像拼接。但不均匀的视场可能需要拍摄额外的缩放图像以减少拼接伪影。而这会增加样品的光损伤,并延长整个扫描时长。奥林巴斯 X Line物镜无需缩放和拍摄额外图像就可实现高分辨率。 X Line和 A Line物镜能否用于非奥林巴斯生产的显微镜?虽然不建议这样做,但如果有匹配的物镜安装螺纹 (RMS),可以组合使用。然而,许多制造商已经改变了螺纹尺寸,以防止出现这种情况。此外,其他制造商镜筒长度等组件不统一导致放大倍率有偏差,同时也因不同部件的组合产生色差。来自其他供应商的镜油或不适合的盖玻片可能会导致色差,并且使用第三方显微镜可能会加剧这种情况。边缘区域的平场性/锐度也不太可能令人满意,因为只有奥林巴斯物镜针对 26.5 视场数进行了校正。 物镜能承受的最低温度是多少?建议在 5°C 至 40°C 温度区间使用。保持一致的温度至关重要,因为温度的变化可能会导致光学器件的膨胀或收缩。一些客户甚至将他们的物镜存储在培养箱中。 |