药物功效评估——微球对药物的反应
将共聚焦观察与该系统相结合,能够评估用相应荧光染料染色的微球药物功效。
目的
大多数抗癌药的功效评价方法均依赖于2D单层生长固定化细胞的使用。但是,这些2D单层细胞无法囊括诸如3D结构等癌细胞的复杂天然环境。因此,像微球这样的3D细胞培养作为具有改善细胞研究生理相关性的潜力模型而倍受关注。在这项研究中,通过将共聚焦观察与细胞成像分析系统相结合评估星形孢菌素(STS)在微球中的功效。
样品的制备
HeLa细胞悬液以500个细胞/孔的密度种入96U孔板(SUMITOMO BAKELITE CO.,
LTD)中。在细胞培养开始后48小时,将连续稀释的STS加入每个孔内。在添加STS后24小时,将Hoechst
33342(核染色染料)和碘化丙啶(PI:死细胞染色染料)添加到每个孔内。
结论
荧光图像的采集和分析
使用该系统获得上述被Hoechst
33342和PI染色的微球荧光图像。如图1*所示,随着STS浓度的增加,每个孔中死细胞(红色伪彩)与所有细胞(蓝色伪彩)的比率也出现增加。可以将比率与STS浓度进行图形显示(图2,条形图:SD,n
= 8),使用分析软件生成的细胞核识别和计数结果。这些结果表明该系统能够轻松评估一个微孔板中的药物功效。
图1: STS浓度依赖性死细胞/微球所有细胞图像* |
图2: STS浓度依赖性死细胞/微球中所有细胞的比率
|
PrimeSurface为Sumitomo Bakelite Co.,Ltd.的注册商标。
Olympus为注册商标,NoviSight和Insightful Analysis、Intelligent Answers均为Olympus Corporation的商标。
* 虽然它已经成为医学研究中最重要的细胞系之一,但我们必须认识到Henrietta
Lacks对科学的贡献是在未经她同意的情况下发生的。这一不公正现象在导致免疫学、传染病和癌症方面重大发现的同时,也引发了关于医学中的隐私、伦理和同意方面的重要对话。
要了解更多关于Henrietta Lacks的生平和她对现代医学的贡献,请点击这里。
http://henriettalacksfoundation.org/
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