靶标微球内部的抗癌药物分析
将荧光图像分析与细胞成像分析系统结合使用,可以表征靶标微球内部低氧区域的化合物。
目的
肿瘤组织中的细胞异质性与癌症进展、血管生成、药物耐药性以及其他问题密切相关。因此,细胞异质性成为药物开发策略中的重要因素。由于体外肿瘤微球肿瘤微球模型可以概括活组织中实体瘤的微环境,因此有望成为分析癌细胞异质性的有效工具。细胞成像分析系统可以定量分析从共聚焦荧光观察获得的图像数据。在这项研究中,通过微球尺寸和微球内部微环境的可视化对药物的细胞毒性进行定量评估。
样品的制备
使用PrimeUur 96U孔板(SUMITOMO BAKELITE CO., LTD)制备肿瘤肿瘤微球肿瘤微球(TH-29)。在使用系统进行测量前一天,将Hoechst 33342和MAR探针(GORYO Chemical)添加到微球中。然后对微球的尺寸和低氧区域观察。
结论
根据由不同数量HT-29细胞组成微球的最大荧光强度投影图像,低氧面积随微球尺寸的增加而增加(图1)。使用伊立替康(拓扑异构酶抑制剂)处理具有较大低氧面积微球的同时会减小微球尺寸和低氧面积(图2(a)和(b))。但是,使用鱼藤酮(线粒体中的电子转移链抑制剂)进行处理则只会减少低氧面积,而微球的尺寸不会减少(图2(c)和(d))。其结果表明该系统能够定量评估药物对癌细胞异质性的不同影响。
PrimeSurface为Sumitomo Bakelite Co.,Ltd.的注册商标。
Olympus为注册商标,NoviSight和Insightful Analysis、Intelligent Answers均为Olympus Corporation的商标。
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