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Visão geral
 | Superresolução confocal para todas as amostras de células vivasProjetado para rápida obtenção de imagens de superresolução tridimensionais e viabilidade celular prolongada em experimentos de lapso de tempo, o sistema de microscópio IXplore SpinSR oferece resolução XY até 120 nm sem a necessidade de procedimentos de rotulagem dedicados. |
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 Esquerda: confocal/Direita: super-resolução | Superresolução de alto nívelCorrija as imagens confocais com resolução XY de 120 nm usando a técnica confocal e superresolução da Olympus (OSR). *Imagem: Fibras de stress da célula Hela: Coloração de anticorpos com faloidina-Alexa488 (verde) para actina, Alexa 568 (vermelho) para cadeia pesada de miosina. |
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Adequado para espécimes vivosOs algoritmos OSR trabalham em tempo real para eliminar atrasos causados pela média de quadros ou pela reconstrução de imagens, fornecendo imagens instantâneas de superresolução para que você possa obter resultados rapidamente. Isso permite que o projeto experimental de superresolução inclua experimentos com células vivas, que são aprimoradas através das velocidades de imagem ultrarrápidas e capacidades de aquisição multicanal do disco giratório confocal. | Proteínas EB3 ligadas às extremidades das extensões dos microtúbulos em células vivas HeLa. Proteínas EB3 com identificação de GFP através da transgênese.*1 Imagem cortesia de Kaoru Kato, PhD., Instituto Nacional de Ciências Industriais Avançadas e Instituto de Pesquisa de Tecnologia Biomédica |
Campo amplo  Confocal  Superresolução  | Agilize sua pesquisaIntegre facilmente o sistema de microscópio IXplore SpinSR em experimentos existentes e exemplos de protocolos; você pode alternar de campo amplo, confocal e superresolução usando as mesmas amostras com apenas um clique de botão, o microscópio cuida do resto. Os dados de imagem podem ser melhorados usando as ferramentas de análise de imagem do software cellSens. O fluxo de trabalho eficiente permite aos usuários o gerenciamento eficaz dos dados e a execução de análises avançadas que ajudam a fomentar novas percepções. Os algoritmos de deconvolução TruSight são projetados para funcionar perfeitamente com algoritmos OSR, ajudando a evitar o processamento excessivo. Juntos, eles fornecem imagens mais nítidas e claras do que a técnica sozinha. |
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Mostra detalhes de superresolução dentro das suas amostrasPara observar estruturas intracelulares, é necessário evitar que a fluorescência fora de foco desfoque os dados verdadeiros em sua imagem final. O sistema de microscópio IXplore SpinSR incorporou um sistema óptico confocal, permitindo o uso de vários objetivos, incluindo ópticas de óleo de silicone, permitindo a aquisição de imagens nítidas de superresolução com menos desfoque, mesmo em amostras espessas. Além disso, não são necessários fluoróforos especiais ou buffers de imagem para que não haja necessidade de trocar amostras ou protocolos de preparação quando se deseja converter em superresolução. | Vídeos relacionadosImagem de intervalo de tempo de um neurônio primário de um rato identificado com EGFP depois de duas semanas de co-cultura com astrócito. É fácil ver a diferença entre uma espinha imatura (seta amarela) e uma madura (seta azul) e detectar a alteração morfológica no tempo. Imagem tridimensional adquirida com tempo de exposição de 500 ms/quadro, incremento Z de 0,15 um para 41 faixas. Imagens adquiridas a cada 2 minutos durante 1 hora. Imagem tridimensional exibida pelo FV31S-DT. Imagem cortesia de Yuji Ikegaya, PhD |
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   | Revele seus dadosNossa deconvolução TruSight pode ser combinada com superresolução para fornecer imagens mais claras e nítidas do que com a deconvolução sozinha. A deconvolução iterativa restrita tridimensional elimina a distorção no eixo Z e forma imagens tridimensionais nítidas.
*Imagem: tecido do rim de rato colorido com Alexa488 |
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Imagem com duas cores simultâneasO sistema IXplore SpinSR pode usar duas câmeras simultaneamente para obter imagens de superresolução de localização de duas cores rápidamente. Isto é conseguido usando fluoróforos e linhas de laser existentes. |
Metáfase celular do eixo miótico*1 As células HeLa derivadas do câncer cervical humano foram fixadas e tingidas com α-tubilina (microtúbulos, vermelho) e Hec1 (cinetócoro, verde), respectivamente. O DNA foi tingido com DAPI (cromossomos, azul). Os cromossomos interagem com microtúbulos que integram o eixo mitótico através de centrômeros, compostos na região de centrômeros dos cromossomos. |
Complexo de poros nucleares de células HeLa Nup153 (Alexa 488: verde), Nup62 (Alexa 555: vermelho) |
ReferênciasS. Hayashi e Y. Okada, “Ultrafast superresolution fluorescence imaging with spinning disk confocal microscope optics,” Mol. Biol. Cell 26(9), 1743–1751 (2015). S. Hayashi, “Resolution doubling using confocal microscopy via analogy with structured illumination microscopy,” Jpn. J. Appl. Phys. 55(8), 082501 (2016). A. Nagasawa-Masuda e K. Terai, “Yap/Taz transcriptional activity is essential for vascular regression via Ctgf expression and actin polymerization,” PLoS ONE 12(4), e0174633 (2017). H. Nakajima, et al., “Flow-Dependent Endothelial YAP Regulation Contributes to Vessel Maintenance,” Dev. Cell 40(6), 523-536.e6 (2017). K. Tateishi, et al., “Three-dimensional Organization of Layered Apical Cytoskeletal Networks Associated with Mouse Airway Tissue Development,” Sci. Rep. 7, 43783 (2017). E. Herawati, et al., “Multiciliated cell basal bodies align in stereotypical patterns coordinated by the apical cytoskeleton,” J. Cell Biol. 214(5) 571-586 (2016). M.-T. Ke, et al., “Super-Resolution Mapping of Neuronal Circuitry With an Index-Optimized Clearing Agent,” Cell Rep. 14(11) 2718–2732 (2016). |
*1 Embora tenha se tornado uma das linhagens celulares mais importantes na pesquisa médica, é importante reconhecer que a contribuição de Henrietta Lacks para a ciência aconteceu sem o seu consentimento. Essa injustiça, embora tenha levado a descobertas importantes em imunologia, doenças infecciosas e câncer, também levantou discussões importantes sobre privacidade, ética e consentimento na medicina. |
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Tecnologias aplicadas
Princípio OSRA tecnologia Olympus Super Resolution (OSR) consegue resolução lateral (XY) abaixo de 120 nm. Ela foi projetada exclusivamente para aproveitar os dados de alta frequência espacial em imagens confocais. Após o processamento, as imagens finais não são apenas mais nítidas através de uma redução no tamanho do ponto, mas também melhor resolvidas para estruturas muito próximas umas das outras. |
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  | Imagem rápida de superresolução e visualização de campo amploEm vez de examinar meticulosamente todo o campo de visão com um único feixe, a sensibilidade do sensor de imagem realiza capturas instantâneas no SpinSR10 de toda a área da amostra em apenas uma etapa fornecendo imagem rapidamente, isto permite aos pesquisadores observarem fenômenos biológicos de alta velocidade. No modo confocal e campo amplo, o sistema óptico do microscópio possui número de campo (FN) 18 para captura de imagens com campo de visão maior, ao mesmo tempo as duas câmeras permitem aos usuários adquirirem imagens simultâneas de superresolução bicolores. Baseada no sistema óptico confocal, a tecnologia de superresolução da Olympus permite a segmentação óptica para a aquisição de imagens de superresolução com a redução de ruído no fundo da imagem. Dados de imagem de aplicação, cortesia de: Hatsuho Kanoh, Tomoki Yano, Sachiko Tsukita
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O disco giratório fornece imagens de células vivas ao vivoO modelo de alta sensibilidade equipado com o disco SoRa realiza uma aquisição de imagem de superresolução mais brilhante graças ao disco giratório com microlente no pinhole confocal. Cada pinhole confocal permite que você crie imagens com menor potência de laser, reduzindo a fotodegradação e a fototoxicidade em sua amostra, ao mesmo tempo que permite imagens brilhantes de superresolução.
Em microscópios confocais regulares, a formação de imagem é um produto da função de propagação de ponto de iluminação (PSF) e detecção de PSF. Olhando para a formação da imagem no orifício na posição D do eixo óptico, é o produto da iluminação PSF e detecção PSF, e podemos ver que a informação da posição D/2 do eixo óptico é transmitida, mas não resolvida. Para corrigir isso, uma microlente é instalada no orifício e os pontos focais individuais projetados no orifício são reatribuídos opticamente ao centro, criando uma imagem ideal e aumentando o brilho e a resolução. Esse processo torna a resolução quase igual à de um microscópio confocal ideal, no qual o orifício foi reduzido a um tamanho infinitesimal. Referência: T. Azuma e T. Kei, “Super-Resolution Spinning-Disk Confocal Microscopy Using Optical Photon Reassignment, ” Opt. Express 23, 15003-15011 (2015). |
| Iluminação de fluorescência uniforme em todo o campo de visualizaçãoO trocador de ampliação é projetado para o microscópio invertido IX83P2ZF, fornecendo iluminação uniforme em todo o campo de visão. O sistema óptico telecêntrico do trocador maximiza o desempenho das objetivas, ao mesmo tempo que permite uma alternância perfeita e motorizada entre a confocal e a superresolução. |
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Resolução de Z aperfeiçoadaNossas objetivas de imersão em silicone foram projetadas para observação profunda de tecidos. A profundidade da observação é afetada pela aberração esférica causada pela disparidade do índice de refração. O índice de refração do óleo de silicone (ne = 1,40) é próximo daquele do tecido vivo ou dos pedaços da cultura de tecidos (ne = 1,38), isto permite imagem de superresolução de estruturas celulares internas a dezenas de micrômetros de profundidade com pouca aberração esférica. | Vídeos relacionados |
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| Reduz a aberração esféricaA unidade de colar de correção remota é usada para ajustar a posição da lente dentro da objetiva para corrigir a aberração esférica causada pela incompatibilidade do índice de refração, resultando em sinal, resolução e contraste drasticamente melhorados. A unidade IX3-RCC funciona com a objetiva UIS2 que possui um colar de correção. |
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Estabilidade de formação de imagemQuando combinado com o sistema de compensação de Z-drift TruFocus, o sistema de microscópio IXplore SpinSR pode capturar imagens de alta precisão em lapso de tempo alinhadas e no foco. | Vídeos relacionados |
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 | Gerenciamento de experimentos complexosO gerenciador de processos simplifica a aquisição de imagens multicoloridas, Z-stack e de intervalo de tempo. O gerenciador de ambiente gráfico (GEM) programável permite aos usuários programar automações mais complexas a partir de uma interface visual para suportar uma ampla variedade de protocolos experimentais de imagens e desencadeamento de dispositivos. A customização flexível dos protocolos dos experimentos pode ser alterada com facilidade, se necessário, a qualquer momento durante o processamento da imagem. |
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Especificações
| Estativa do microscópio | IX83P2ZF | |
|---|---|---|
| Método de observação > Superresolução | ✓ | |
| Método de observação > Confocal | ✓ | |
| Método de observação > Fluorescência (Excitação azul/verde) | ✓ | |
| Método de observação > Fluorescência (excitação ultravioleta) | ✓ | |
| Método de observação > Contraste de interferência diferencial (DIC) | ✓ | |
| Método de observação > Contraste de fase | ✓ | |
| Método de observação > Campo claro | ✓ | |
| Revólver porta-objetivas > Motorizado (6 posições) | ✓ | |
| Foco > Motorizado |
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| Foco > Compensador de desvio Z | ✓ | |
| Tubos de observação > Campo amplo (FN 22) > Tubo binocular com inclinação variável | ✓ | |
| Iluminador > Iluminador Köhler transmitido > Lâmpada LED | ✓ | |
| Iluminador > Iluminador Köhler transmitido > Lâmpada de halogênio de 100 W | ✓ | |
| Iluminador > Iluminador de fluorescência > Lâmpada de mercúrio de 100 W | ✓ | |
| Iluminador > Iluminador de fluorescência > Iluminação da guia de luz | ✓ | |
| Carrossel de espelho de fluorescência > Motorizado (8 posições) | ✓ | |
| Platina > Motorizado | Contact your local sales representative to hear about motorized stage options | |
| Platina > Mecânico > Platina mecânica IX3-SVR com pega à direita |
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| Platina > Mecânico > Platina mecânico IX3-SVL com pega curta à esquerda |
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| Condensador > Motorizado > Condensador universal | DT 27 mm, AN 0,55, abertura motorizada e polarizador | |
| Condensador > Manual > Condensador universal | NA 0,55/D.T. 27 mm | |
| Condensador > Manual > Condensador com distância de trabalho ultra longa | NA 0,3/D.T. 73,3 mm | |
| Escâner confocal | CSU-W1 | |
| Processamento de superresolução | Filtro de superresolução Olympus (OSR) | |
| Acessórios | Controlador remoto de colar de correção (IX3-RCC) | |
| Dimensões (L × D × A) | 323 (L) × 475 (D) × 706 (H) mm (corpo do microscópio IX83) | |
| Peso | Aprox. 47 kg (IX83P2ZF) |
Galeria de aplicações
Estereocílios e cinocílios das células ciliadas internas do órgão de Corti (Actina: Laranja, Tubulina: Verde) Imagem cortesia de Hatsuho Kanoh1, Toru Kamitani1,2, Hirofumi Sakaguchi2, Sachiko Tsukita1 |
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Vídeos relacionados | Célula epitelial de cultura miótica (Cromossomo: azul; tubulina: verde; ZO1: vermelho) Imagem cortesia de Hatsuho Kanoh, Tomoki Yano, Sachiko Tsukita |
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Mitocôndria identificada com GFP. Adquirida com 30 fps, capacidade de visualizar os movimentos individuais das mitocôndrias. Imagem cortesia de Kumiko Hayashi, Ph.D., Escola de pós-graduação de engenharia, Universidade de Tohoku |
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 | Células Purkinje identificadas com GFP. Imagem XYZ confocal e com superresolução em diferentes posições de Z. Imagens de superresolução são projetadas por Z (10 faixas). 3D exibida pelo FV31S-DT. Imagem cortesia de Michisuke Yuzaki, PhD., Departamento de Fisiologia, Escola de Medicina, Universidade de Keio |
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Recursos
Outros sistemas
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