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Visão geral
Consulte mais detalhes em profundidadeProjetado para formação de imagem em profundidade em espécimes biológicos, o microscópio multifóton FVMPE-RS ajuda a revelar como as células funcionam e interagem em tecido vivo. This product has been discontinued, check out our current product |
Formação de imagem multifóton em profundidade de alta resolução e alta sensibilidadeO microscópio multifóton FVMPE-RS emprega tecnologia avançada e design óptico para melhorar a sensibilidade e a resolução durante a formação de imagem em profundidade.
| Imagem 3D reconstruída de um cérebro de rato in vivo (rato Thy1-YFP-H, córtex sensorial) adquirida usando uma objetiva TruResolution com função de ajuste automático (à esquerda) e imagens de projeção máxima adquiridas em uma profundidade de aproximadamente 600 μm. Imagens adquiridas sem (parte superior direita) e com (parte inferior direita) a função de ajuste automático. As imagens foram adquiridas no RIKEN BSI-Olympus Collaboration Center e são uma cortesia do Dr. Hiromu Monai, Dr.Hajime Hirase e Dr. Atsushi Miyawaki. |
Vídeos relacionados
Fluxo sanguíneo de embrião de peixe-zebra.
| Formação de imagem de alta velocidade para processos celulares rápidos e dinâmicosA varredura ressonante de alta velocidade e a varredura linear de alta resolução são padrão.
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Excitação de vários comprimentos de onda para uma cobertura espectral mais amplaA plataforma de formação de imagem do FVMPE-RS suporta um laser infravermelho pulsado de comprimento de onda duplo ou dois lasers infravermelhos sintonizáveis independentes para formação de imagem de excitação multifóton e multicanal.
| Formação de imagem harmônica de terceira geração de tecido adiposo de suíno. Tecido adiposo de suíno não etiquetado irradiado com laser de femtosegundo a 1.250 nm, segundo harmônico detectado a partir de fibras de colágeno a 625 nm e terceiro harmônico a partir de interfaces de lípidos a 416 nm. |
Recursos opcionais para aplicações avançadasO microscópio multifóton FVMPE-RS é uma plataforma modular que o permite atualizar facilmente o seu sistema conforme a sua pesquisa precise crescer. As opções incluem:
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Software intuitivo otimizado para observação multifótonO layout personalizável do software oferece mais flexibilidade, aumentando a sua eficiência:
A análise online e o processamento de imagem, incluindo renderização 3D e sem mistura espectral, são padrão. |
3 opções de estrutura do microscópio |
Sistema de microscópio vertical — para microscopia multifóton in vivo e in vitroO grande espaço da platina e o longo curso de foco da estrutura vertical padrão acomodam uma ampla gama de espécimes, desde cortes de tecido até ratos e outros animais pequenos vivos. | Sistema de Microscópio Pórtico — para observações in vivo que requerem mais espaçoO espaço de 355 mm de altura entre a objetiva e a placa da base facilita observações in vivo que requerem equipamentos maiores, como a formação de imagem comportamental em ratos acordados. | Sistema de Microscópio Invertido — para observação in vitro de culturas 3D de células (esferoide) e de tecidoA estrutura invertida fornece uma plataforma estável para formação de imagem de lapso de tempo de espécimes vivos espessos, especialmente culturas de tecidos, culturas de células esferoides 3D e organoides. Essa configuração também é útil para a formação de imagem intravital de órgãos e tecidos através de uma abertura do corpo em um animal pequeno. |
Tecnologias aplicadas
Formação de imagem precisa e fácil de usar com alinhamento a laser automatizadoO desvio do laser causado pelo ajuste do comprimento de onda, a flutuação de temperatura e outras fontes de deslocamento de cavidade podem causar um desalinhamento do feixe de excitação em sistemas típicos. O microscópio multifóton FVMPE-RS mantém um alinhamento preciso do laser de 4 eixos do feixe de excitação na unidade de escâner, mesmo perante o desvio do laser, simplificando a manutenção do sistema. A posição e o ângulo do feixe são ajustados automaticamente para oferecer uma potência do laser maior e um registro de píxel consistente. Se o seu sistema tiver duas linhas de laser de excitação, este recurso manterá o coalinhamento entre os feixes, ajudando a eliminar erros de corregistro entre canais. |
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Varredura de alta velocidade em até 438 frames por segundoO escâner ressonante rápido e o escâner galvanômetro linear oferecem uma formação de imagem de alta velocidade e alta resolução em um único sistema. Com uma taxa de captura de até 438 fps em 512 × 32 píxeis ou 30 fps em 512 × 512 píxeis ao longo de todo o campo de visão (FN 18), você pode:
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Transmissão a laser eficienteOs espelhos do escâner revestidos de prata ajudam a oferecer mais potência de laser à sua amostra para gerar imagens mais claras. Quando comparada com os espelhos revestidos de alumínio convencionais, a reflectância aumentada na faixa do infravermelho próximo é especialmente vantajosa para experimentos in vivo em profundidade. |
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Opções do detector para maximizar o desempenho da formação de imagem de fluorescênciaAdquira imagens com alta relação sinal-ruído (SNR) a partir da fluorescência fraca com detectores de tubo fotomultiplicador (PMT) de fosfeto de arsenieto de gálio (GaAsP) de alta sensibilidade. Eles oferecem mais eficiência quântica que os PMTs multialcalinos (MA) padrão e possuem resfriamento sem ventoinha para melhorar ainda mais a SNR. Se você trabalha com amostras emissoras de luz, é possível combinar o alto SNR do detector de GaAsP com a variação dinâmica mais ampla do detector MA. Para obter uma maior eficiência luminosa, a trajetória de detecção non-descanned do sistema possui ópticas de área grande para melhor capturar fótons de fluorescência dispersos e usar totalmente a ampla capacidade de coleta das nossas objetivas multifóton. |
Objetivas MPE projetadas para formação de imagem em profundidade
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Maximize o sinal com o Modo de foco em profundidadeO modo de foco em profundidade ajusta o diâmetro do feixe de laser com base nas condições de dispersão do laser. Para espécimes in vivo com grande dispersão do laser, o feixe é reduzido para que mais fótons de excitação alcancem uma maior profundidade na sua amostra, ajudando a produzir imagens mais claras. |
Controle de fotoestimulação independentePara experimentos de fotoestimulação e fotobranqueamento com precisão de microssegundos, adicione:
As regiões de interesse (ROI) de estimulação arbitrária podem ser definidas independentemente de uma ROI de formação de imagem. A estimulação sequencial multipontos de acesso aleatório também está disponível quando for necessária uma velocidade maior. Em sistemas com duas linhas de formação de imagem por infravermelho, o escâner SIM permite a formação de imagem e a estimulação multifóton em simultâneo. |
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Tempo em microssegundos para eletrofisiologia e optogenéticaUm sequenciador de hardware fornece uma precisão de tempo de microssegundos para eventos de estimulação e acionamento. A estimulação pode ser sincronizada temporal e espacialmente com o rastreamento de formação de imagem, facilitando a captura de dinâmicas de resposta rápida em locais precisos. Para eletrofisiologia e optogenética, isso pode significar a diferenciação entre uma resposta de estímulo síncrona e uma resposta assíncrona. Para aquisições que duram duas semanas ou mais ou experimentos com procedimentos complexos que requerem alternâncias entre tarefas de formação de imagem, o módulo do software do gerenciador de sequência mantém uma precisão de milissegundos, fornecendo dados de alta qualidade em experimentos in vivo e in vitro complexos. Saiba mais sobre a formação de imagem de lapso de tempo multidimensional e multiárea |
Soluções
Sincronizar os dados eletrofisiológicos e a estimulação luminosa a laser com a unidade analógicaEntradas analógicas e E/S TTL digitais estão disponíveis para suportar experimentos eletrofisiológicos. A unidade de entrada analógica registra os sinais de tensão externa como dados da imagem. Os sinais elétricos estimulados por luz medidos com fixação de membranas podem ser sincronizados com a captura da imagem e exibidos como uma sobreposição de intensidade de cor falsa. Saiba mais sobre a unidade analógica O software avançado de mapeamento multipontos (MMASW) proporciona uma estimulação luminosa precisa de vários pontos selecionados arbitrariamente ou de pontos em uma região de interesse (ROI) retangular para varreduras de mapeamento. Ele consegue registrar sinais de tensão elétrica do sistema de fixação de membranas simultaneamente.
Saiba mais sobre o módulo do software de mapeamento e multipontos |
*Controle de laser ponto a ponto multicolorido suportado usando escâner SIM com vários lasers para realizar experimentos de ChR2 e NpHR mistos. |
Criar mapas de reação de estimulação 3DAs varreduras de mapeamento especializadas utilizam uma sequência pseudoaletória para fornecer mapas de reação espacial mais precisos ao medir a resposta eletrofisiológica à estimulação óptica. Os registros de fixação de membrana elétrica e sinais de fluorescência de cálcio ou indicadores de tensão podem ser sobrepostos em uma imagem de alta resolução. Os limites de intensidade podem ser usados para definir uma varredura multipontos de alta velocidade das regiões mais ativas. Isso pode ser estendido para mapas de reação 3D com uma unidade Piezo Z opcional. |
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Combinar um campo de visão amplo com alta resoluçãoVeja o seu espécime inteiro em alta resolução e em um contexto mais amplo com a função de lapso de tempo multiárea (MATL):
| Os dados da imagem são cortesia de Urs Ziegler e Jose Maria Mateos, Center for Microscospy and Image Analysis, Universidade de Zurique. Mouse line L15 gentilmente cedida por Pico Caroni, FMI, Basel. |
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Software
Controle seus experimentos com precisãoO gerenciador de sequências facilita a coordenação de experimentos. Você pode organizar e agilizar facilmente protocolos complexos com um tempo preciso, incluindo:
Você pode salvar e recarregar protocolos para obter uma execução de experimentos consistente. |
Separe canais sobrepostos com a deconvolução espectralEspectros de fluorescência estreitamente sobrepostos podem complicar estudos biológicos nos quais várias etiquetas são observadas em simultâneo. Agora, é possível separar os canais espectrais sobrepostos usando a deconvolução espectral baseada em um algoritmo de separação oculto ou em perfis multicanais salvos anteriormente. O Crosstalk entre os canais pode até ser eliminada durante a aquisição de imagem por meio do processamento em tempo real. |
Modo normalA sobreposição espectral de fluorescência vermelha e verde causa diafonia entre os canais durante a aquisição normal. | Modo de separação em tempo realO modo de separação em tempo real aplica a deconvolução espectral durante a aquisição de imagem para separar melhor os fluoróforos distintos. |
Renderização 3DÉ possível renderizar grandes quantidades de dados em pilha Z em uma apresentação 3D. É possível registrar exibições importantes como quadros fundamentais, facilitando a criação de exibições em animação de imagens 3D que ampliam e realizam a transição de diferentes ângulos da câmera. |
Pilha 3D de 4 mm em vaso sanguíneo etiquetada com Texas Red em um cérebro de rato.
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(Esquerda) Dados de 30 fps sem tratamento adquiridos com baixa potência de laser (0,05%, 488 nm).
| Processamento médio de rotaçãoA varredura de alta velocidade com baixa potência de laser para evitar fototoxicidade pode reduzir a relação sinal-ruído. Com o pós-processamento médio de rotação, você tem flexibilidade para ajustar as imagens de lapso de tempo de alta velocidade ao mesmo tempo que mantém a escala de tempo e os dados originais. |
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Observação de macro a microO uso de uma objetiva de abertura numérica alta (NA), uma platina motorizada e do software da Olympus permite a formação de imagem em mosaico:
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Compensação de brilho em profundidadeAo observar espécimes espessos, as imagens podem ficar mais escurecidas conforme o ponto focal se aprofunda. Porém, com a compensação de brilho de profundidade Brilho Z, a sensibilidade do detector e a potência do laser são ajustadas constantemente para manter um brilho consistente. Esta função complementa as objetivas dinâmicas TruResolution, que também ajustam automaticamente a compensação de aberração esférica com a profundidade. |
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Funções de análise expandidasO software da plataforma de formação de imagem FVMPE-RS está integrado ao software de análise de imagem cellSens da Olympus, expandindo as capacidades analíticas do sistema. Os recursos opcionais incluem:
O software opcional de análise NoviSight 3D também está disponível. Saiba mais sobre o software cellSens |
Especificações
FLUOVIEW FVMPE-RS |
Sistema com um laser | Sistema de linhas duplas | Sistema de lasers duplos | ||
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Unidade | Lasers infravermelhos pulsados qualificados com alteração de frequência negativa para excitação multifóton | Produtos Spectra-Physics: MAITAI HPDS-OL: 690 nm–1040 nm MAITAI eHPDS-OL: 690 nm–1040 nm INSIGHT X3-OL: 690 nm–1300 nm INSIGHT X3 DUAL/DUALC-OL: 680 nm–1300 nm + 1045 nm Produtos Coherent: Chameleon Vision I Olympus: 680 nm–1080 nm Chameleon Vision II Olympus: 680 nm–1080 nm Chameleon Vision S Olympus: 690 nm–1050 nm | ||
Laser IV pulsado principal |
MAITAI HPDS-OL
MAITAI eHPDS-OL INSIGHT X3-OL Chameleon Vision I Olympus Chameleon Vision II da Olympus Chameleon Vision S da Olympus |
INSIGHT X3 DUAL-OL
INSIGHT X3 DUALC-OL |
MAITAI HPDS-OL
MAITAI eHPDS-OL INSIGHT X3-OL Chameleon Vision I da Olympus Chameleon Vision II da Olympus Chameleon Vision S da Olympus | |
Linha de laser infravermelha adicional:
Use como segunda linha/laser de formação de imagem ou para estimulação simultânea (escâner SIM opcional) | – |
Linha fixa de 1045 nm do
INSIGHT X3 DUAL/DUALC-OL |
MAITAI HPDS-OL
MAITAI eHPDS-OL Chameleon Vision I da Olympus Chameleon Vision II da Olympus Chameleon Vision S da Olympus | |
Óptica de introdução automática |
Óptica de introdução com atenuação AOM
(incrementos de 0%–100%, 0,1%) Inclui expansor de feixe totalmente automatizado, deslocador XY e alinhamento de ângulos de dois eixos. (óptica de alinhamento automático Quadralign de 4 eixos) Acoplamento direto para a porta laser da unidade de varredura. |
Óptica de introdução com 2 conjuntos de atenuação AOM (incrementos de 0%–100%, 0,1%)
Inclui 2 conjuntos de expansores de feixe totalmente automatizados, deslocador XY e alinhamento de ângulos de dois eixos. (óptica de alinhamento automático Quadralign de 4 eixos) Acoplamento direto para a porta laser da unidade de varredura. | ||
Óptica de combinação do laser infravermelha | – | Trocador de caminho óptico motorizado com DM900, DM1000R e DM1100 para combinar dois comprimentos de onda infravermelha para formação de imagem | ||
Luz laser visível para estimulação opcional | Fonte de laser de 405 nm/50 mW, 458 nm/20 mW, 588 nm/20 mW com atenuação AOTF. Incrementos de 0%–100%, 0,1%, aumento de tempo de <2 μs | |||
Unidade de varredura | Método de varredura | Deflexão da luz por meio de 2 espelhos de varredura de galvanômetro revestidos com prata ou espelho de varredura ressonante revestido com prata | ||
Velocidade de varredura |
Escâner galvanômetro (formação de imagem normal): 512 × 512 com 1,1 s–264 s, tempo de resposta do píxel: 2 μs–1000 μs
Escâner ressonante (formação de imagem de alta velocidade): 30 fps a 512 × 512, 438 fps a 512 × 32 | |||
Modo de varredura | XY, XYZ, XYT, XYZT, linha livre, XZ, XT, XZT, PointT | |||
Escâner galvanômetro
(Formação de imagem normal) |
Varredura do galvanômetro da ROI: clipe retangular, elipse, polígono, área livre, linha, linha livre e ponto
Zoom: 1,0x–50,0x com incrementos de 0,01x, suporta 0°–360° de rotação e panorâmica Número do campo de varredura: 18 Tamanho da imagem: 64 × 64–4.096 × 4.096 | |||
Escâner ressonante
(Formação de imagem de alta velocidade) |
Varredura ressonante da ROI: clipe retangular, linha
Zoom: 1,0x–8,0x com incrementos de 0,01x Número do campo de varredura: 18 Tamanho da imagem: 512 × 512 | |||
Revestimento óptico | Óptica de suporte de infravermelho com revestimento 1.600 | |||
Detectores de formação de imagem MPE non-descanned |
Detecção refletida: configuração de 2 ou 4 canais: configuração de 2 PMTs, configuração de 4 PMTs ou 2 PMTs + 2 PMTs de GaAsP resfriados
Detecção transmitida: 2 unidades PMT com condensador de alta AN | |||
Detector de luz transmitida | Módulo com detector fotomultiplicador externo de luz transmitida integrado e lâmpada de halogênio de 100 W, troca motorizada e adaptação de fibra à estrutura do microscópio | |||
Unidade Z |
Módulo de foco motorizado integrado do microscópio, incremento mínimo de 0,01 μm
Opcional: revólver porta-objetivas Piezo altamente rígido*1 | |||
Escâner de estimulação simultânea opcional |
Escâner de estimulação simultânea altamente sincronizada, incluindo um conjunto de escâner galvanômetro, portas laser IV e VIS.
Varredura da ROI: clipe retangular, elipse, polígono, tornado, área livre, linha, linha livre e ponto. | |||
Caixa de entrada/saída analógica e digital opcional | Entrada do sinal analógico de 4 canais, entrada do acionador TTL digital de 6 canais, saída do acionador TTL digital de 5 canais. Tempo de saída do escâner | |||
Ambiente de operação | Temperatura ambiente: 20°C–25°C, umidade: 75% ou inferior a 25°C, requer fornecimento de alimentação contínuo (24 horas) | |||
Tamanho da mesa antivibrações |
1.500 mm × 1.650* mm
*1.800 mm com sistema de microscópio invertido |
1.500 mm × 1.650* mm
*1.800 mm com sistema de microscópio invertido | 1.500 mm × 2.000 mm | |
Software | Características básicas |
Câmara escura correspondente ao design da interface gráfica do usuário. Layout organizável pelo usuário.
Recursos de recarregamento do parâmetro de aquisição. Capacidade de gravação em disco rígido, ajuste da potência do laser e AT com aquisição em pilha Z. Pilha Z com combinação alfa, projeção de intensidade máxima, renderização de isossuperfície | ||
Controle do laser infravermelho | Controle do comprimento de onda do laser infravermelho totalmente integrado e modo de foco em profundidade | |||
Software da platina motorizada opcional |
Controle da platina motorizada XY. Aquisição de imagem de mapa para facilitar a localização do alvo. Aquisição lado a lado e união de imagens do software.
Definição de várias áreas para a formação de imagem de lapso de tempo. | |||
Software de estimulação multipontos e de mapeamento opcional |
Software de estimulação multipontos e de aquisição de dados. Mapeamento da estimulação de vários pontos para gerar um mapa de reação.
Recurso de filtragem para selecionar pontos. Estimulação multipontos. Estimulação única ou repetida. Seleção do comprimento de onda de estimulação independente de cada ponto. | |||
Gerenciador de sequência
opcional |
Software programável avançado usado para definir várias tarefas de formação de imagem/estimulação e execução por sequenciador de hardware.
Atraso mínimo de 100 ms entre tarefas. | |||
Software de compensação automática opcional |
Software de compensação de aberração esférica automática.
Controle das objetivas com função de compensação de aberração esférica automática. Ajuste automático do colar de correção motorizado para encontrar a melhor posição a uma determinada profundidade de observação. Ajuste automático do colar de correção juntamente com o movimento Z. |
*1 Não disponível em algumas áreas. |
Objetivas TruResolution |
FV30-AC10SV | FV30-AC25W | |
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Ampliações | 10 | 25 |
AN | 0,6 | 1,05 |
DT | 8 mm | 2 mm |
Espessura da lamínula | 0 mm–0,23 mm | 0 mm–0,23 mm |
Líquido de imersão | SCALEVIEW-A2 (água, óleo de silicone e óleo normal disponíveis) | Água |
Recursos especiais | Compensação automática, otimizada para formação de imagem multifóton | Compensação automática, otimizada para formação de imagem multifóton |
Dimensões (L × P × A) | 56 mm × 106,5 mm × 95 mm | 56 mm × 106,5 mm × 101 mm |
Peso | Aprox. 1 kg | Aprox. 1 kg |