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Veja mais além com a microscopia confocal com NIR

As tecnologias aprimoradas do sistema oferecem a multiplexagem expandida para que você veja mais em uma única imagem.

A formação de imagem NIR oferece maior capacidade de multiplexagem ao estender o perfil espectral de excitação (λ_Ex) e detecção (λ_Em) do sistema FV4000. Isso permite usar corantes adicionais para ajudar a minimizar a sobreposição do sinal de emissão.

  • Efetue a multiplexagem de até seis canais com a tecnologia TruSpectral™ atualizada e com os nossos detectores de alta sensibilidade SilVIR™
  • A grade e fenda de holograma de fase volumétrica (VPH) altamente eficiente podem detectar uma faixa de comprimento de onda de 400 a 900 nm com um incremento mínimo de 1 nm
  • Amplie suas opções de fluorocromo com até seis canais de banda larga ou seis detectores desviados para o vermelho para minimizar os danos e reduzir a autofluorescência
  • Os combinadores de laser modulares têm capacidade para até 10 linhas de laser de 405 a 785 nm em paralelo
     

    *Em março de 2023.

  • Células HeLa marcadas com 6 fluorocromos.
    Núcleos celulares (DAPI; azul), membrana celular (AF488; verde), poro nuclear (AF561; amarelo),
    microtúbulo (Qdot605; magenta), mitocôndria (MitoTracker DeepRed; azul claro), actina (faloidina AF750; cinza).

Óptica de alta qualidade para uma formação de imagem de fluorescência com NIR eficiente

Os elementos ópticos do sistema FV4000 têm uma alta transmissão de 400 nm a 1300 nm, incluindo o escâner galvanômetro e ressonante, que são revestidos em prata em vez de alumínio.

Nossas premiadas objetivas X Line™ são corrigidas para aberração cromática entre 400–1000 nm. Elas também têm uma abertura numérica mais alta, excelente nivelamento e transmissão muito alta de UV para NIR, aumentando as capacidades de multiplexagem.

Para uma melhor confiabilidade da colocalização, a nossa objetiva de imersão em óleo A Line™ (PLAPON60XOSC2) especializada (ne~1,40) minimiza significativamente a aberração cromática para proporcionar uma análise rigorosa da colocalização.

Série X

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Um total de 77 posições XYZ de quatro canais (11 × 7) foi adquirido usando um escâner ressonante de 1K em 16 minutos para criar a imagem montada, que costumava exigir 2 horas usando um escâner galvanômetro. A seção coronária de um cérebro de rato H-line, azul claro; DAPI (núcleos celulares), verde; YFP (neurônio), amarelo; astrócitos Cy3, magenta; AlexaFluor 750 (microtúbulo). Amostra cortesia de: Takako Kogure e Atsushi Miyawaki, Dinâmicas da função celular, RIKEN CBS.

Imagens confocais de alta qualidade em alta velocidade

Uma combinação exclusiva de tecnologias avançadas proporciona imagens de alta qualidade mais rápido do que os sistemas de microscópio de escaneamento a laser convencionais.

  • Imagens de alta resolução em alta velocidade: O escâner ressonante 1K x 1K de número de campo FN20 com 0,033 µs por pixel e o detector SilVIR permitem adquirir rapidamente imagens de alta resolução com mínimo de ruído
  • Imagens macro com qualidade excepcional: adquira rapidamente imagens macro montadas com uma qualidade excepcional para maximizar o seu tempo e potencial de pesquisa

Formação de imagem simples, precisa e com superresolução

Capture imagens de superresolução com o microscópio FV4000 sem hardware dedicado.

  • Observe facilmente estruturas subcelulares usando as nossas objetivas de alta resolução A Line e o nosso software de superresolução (FV-OSR)
  • O FV-OSR otimiza automaticamente a abertura confocal para detectar componentes de alta frequência e aumentar seu contraste para obter a resolução de 120 nm
  • Obtenha imagens de superresolução 8x mais rápido do que com os sistemas da geração anterior graças ao detector SilVIR e ao processamento em tempo real

Modo confocal 1AU (à esquerda) em comparação com o modo de superresolução (à direita)

Imagens 3D de alta resolução em amostras espessas

Esferoide de células HeLa marcado com DAPI (azul claro, núcleos celulares) e AlexaFluor790 (magenta, Ki-67). Foi possível efetuar a formação de imagem de todo o volume do esferoide com NIR 785 nm, mas somente foi possível observar os núcleos celulares da área da superfície usando um laser de 405 nm.

Ao formar imagens de amostras espessas, o microscópio FV4000 permite capturar imagens 3D de alta resolução.

  • Aproveite o comprimento de onda mais longo do NIR para penetrar mais profundamente no tecido, graças à ampla faixa dinâmica e sensibilidade do detector SilVIR
  • Forme imagens mais profundas com menos dispersão e absorção aproveitando o fato de que os componentes que dispersam a luz, como a melanina e o heme, absorvem menos luz entre 700–1500 nm
  • Forme imagens significativamente mais profundas do que é possível com lasers visíveis, graças aos lasers de diodo de 685, 730 e 785 nm do FV4000
  • As objetivas de silicone com alta AN minimizam a aberração esférica e o óleo de silicone não seca, o que é vantajoso para a formação de imagem de lapso de tempo
  • Melhore a qualidade geral da imagem e a resolução Z usando a deconvolução TruSight™ para obter imagens 3D incríveis de amostras espessas
  • Beneficie-se de um fluxo de trabalho perfeito, da aquisição à publicação com os algoritmos especializados do software cellSens™

Dinâmica precisa de células vivas com menos danos

Normalmente, o uso de ondas com comprimento mais longo para a excitação de fluorescência por curtos períodos é melhor para a integridade geral da amostra. O uso de menos luz fototóxica significa que você pode formar imagens durante períodos mais longos, permitindo obter dados mais consistentes e reproduzíveis a partir de experimentos de formação de imagem de células vivas.

O sistema FV4000 oferece não só formação de imagem de lapso de tempo delicada por meio de lasers de 685 nm, 730 nm e 785 nm, como também apresenta um compensador de desvio Z TruFocus Red exclusivo para manter a posição de foco. Essa unidade TruFocus Red atualizada é compatível com uma faixa maior de comprimentos de onda e com uma grande variedade de objetivas, incluindo as nossas séries X Line™ e A Line™ de alto desempenho.

Fotoestimulação de lapso de tempo: a lesão por laser foi executada em células C2C12. A pseudocor verde representa a aplicação de um banho FM 1-43. A imagem foi adquirida com um escâner galvanômetro de 2 μs e uma objetiva UPLSAPO60XOHR. Um laser de 405 nm e um 488 foi usado para formar a imagem. Amostra cortesia de: Daniel Bittel e Jyoti Jaiswal, Centro de Pesquisa de Medicina Genética, Children’s National Research Institute.

Imagem de lapso de tempo de células HeLa tingidas com Hoechst33342 (nuclear, azul), MitoTracker Green (mitocôndria, verde), LysoTracker Red (lisossomo, amarelo), SiR-Tubulin (tubulina, magenta), POR-SA-Halo (ER, azul claro). Hoechst33342: Ex 405 nm/Em, MitoTracker Green: LysoTrakcer Red: SiR-Tubulin: POR-SA-Halo: Amostra cortesia de: Masayasu Taki, Ph.D., Instituto de Biomoléculas Transformadoras (WPI-ITbM), Universidade de Nagoya, Japão, Yuichi Asada e Ryusei Aruga, Faculdade de Pós-Graduação em Ciências, Universidade de Nagoya, Japão.

Uma imagem de lapso de tempo de 17 horas de células HeLa tingidas com MitoTracker Red (mitocôndria, magenta), POR-SA-Halo (ER, azul claro). MitoTracker Red: Ex 561 nm/Em, POR-SA-Halo: Ex 730 nm/Em, Amostra cortesia de: Masayasu Taki, Ph.D., Instituto de Biomoléculas Transformadoras (WPI-ITbM), Universidade de Nagoya, Japão, Yuichi Asada e Ryusei Aruga, Faculdade de Pós-Graduação em Ciências, Universidade de Nagoya, Japão.

Imagens nítidas em profundidade

Use as nossas objetivas de imersão em silicone com o microscópio FV4000 e obtenha imagens nítidas de características e estruturas profundas na sua amostra. O óleo de silicone tem um índice de refração próximo ao das células ou tecidos vivos, reduzindo bastante a aberração esférica em comparação com ar, água ou outros óleos. Com menos aberração, você pode obter imagens mais nítidas da sua amostra em profundidade. E o óleo de imersão em silicone não seca a 37 °C (98,6 °F), tornando-o eficaz para a formação de imagem de lapso de tempo de longo prazo.

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