Microscópio multifóton de rastreamento com laser FLUOVIEW
A configuração do sistema de compartilhamento de laser FV1200MPE permite que dois microscópios compartilhem um laser de IV único. Ambos os microscópios podem ser usados de forma independente e o usuário é capaz de guiar o laser de IV para qualquer uma das estruturas ou dividi-lo pelas duas. O expansor de feixe motorizado atinge o ajuste automático do diâmetro do feixe de acordo com a objetiva e o comprimento de onda de excitação para fornecer condições ideais para a microscopia multifóton.
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Este sistema permite que dois microscópios compartilhem um laser único e fornece tecnologia de ponta para diversas áreas de pesquisa científica, como a neurociência e a biologia celular. Dessa forma, os tipos M, B, S e T do sistema FV1200MPE podem ser combinados em uma única plataforma.
O revestimento em prata antioxidante assegura a durabilidade e melhora a eficiência da reflexão durante a excitação e a emissão com um conjunto dos dois espelhos de rastreamento de galvanômetro, aumentando a reflexão na faixa visível entre 5 e 15% e a reflexão de IV até 22%, melhorando a eficiência da excitação multifóton em cerca de 50% de profundidade.
Uma vez que a probabilidade de excitação multifóton é muito baixa, é fundamental ter um volume de excitação muito pequeno (requer objetivas com alta NA) e guiar o máximo possível de luz IV para a amostra. Isso significa que a abertura traseira (abertura traseira focal) da objetiva deve ser completamente preenchida pelo feixe laser de excitação. Um feixe maior do que a abertura traseira focal significa uma perda da luz laser de excitação. Por vezes, as aberturas traseiras focais das objetivas diferem em mais de um fator de dois, originando perdas ou NA reduzida. Através da implementação de uma óptica para o expansor de feixe motorizado, a Olympus assegura que, para todas as objetivas e diferentes comprimentos de onda usados, o tamanho do feixe de IV é o adequado à abertura traseira focal da objetiva.
O módulo AOM integrado permite o controle de alta velocidade do laser, tanto para ligar/desligar como para ajustar a intensidade.
Em microscopia multifóton, um laser pulsado é necessário para atingir uma eficiência de excitação dos fluoróforos suficiente. À medida que os pulsos de laser (normalmente ~100 fs) são esticados ao viajarem através da óptica do microscópio (dispersão), a excitação dos fluoróforos e a detecção da fluorescência se tornam menos eficientes. Usando um laser pulsado de femtossegundos com pré-compensação de pulso (alteração de frequência negativa), esse efeito pode ser fortemente diminuído e a largura do pulso original pode ser quase totalmente restaurada. Para saber mais sobre as especificações, consulte as páginas dos componentes do sistema M, B, S e T do FV1000MPE.
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