A formação de imagem de bioluminescência no nível de célula única permite validar uma avaliação preliminar dos ensaios de luminescência usando um leitor de placas e esclarece as causas de resultados inesperados durante os experimentos. O nosso sistema de microscópio IXplore™ Live para luminescência* é otimizado para formação de imagem de bioluminescência de célula única e de tecido inteiro. O microscópio vem com os componentes necessários para o início imediato de seus experimentos de bioluminescência em um ambiente estável e controlado.

*Este sistema foi desenvolvido em colaboração com o professor Takeharu Nagai, Sanken, Universidade de Osaka, Tokai Hit Co. Ltd. e a Evident. O projeto foi financiado pela Agência de Ciência e Tecnologia do Japão (JST, Japan Science and Technology).

Observe várias amostras em uma microplaca

Adquira imagens confiáveis em uma variedade de designs de microplacas em uma resolução que pode identificar as células. O software de formação de imagem cellSens™ e uma platina motorizada permitem que o sistema memorize a posição XY de cada poço, facilitando a captura de imagens de todos os poços em uma placa de 96 poços.

Amostra: células HeLa com expressão de nanolanterna aprimorada com amarelo. Dados cedidos por Takeharu Nagai, Mitsuru Hattori, Departamento de Ciência e Engenharia Biomolecular, Sanken, Universidade de Osaka.

Formação de imagem de lapso de tempo estável e de longo prazo

Um sistema de incubação na platina fornece o ambiente adequado para experimentos de lapso de tempo de longo prazo com células e tecidos vivos. O sistema controla temperatura, CO₂ e outras condições ambientais a fim de manter a integridade das amostras durante a formação de imagens.

A formação de imagem de bioluminescência não requer luz de excitação como na fluorescência, pois a fonte de luz é uma reação química. A bioluminescência minimiza a fototoxicidade e elimina a contribuição do sinal de autofluorescência, tornando-se ideal para a observação estável e a longo prazo de células vivas.

Observação de longo prazo usando uma incubadora de platina (24 horas: contraste de fase/luminescência/mescla). Amostra: células HeLa com expressão de nanolanterna aprimorada com amarelo (prato com fundo de vidro de 35 mm).

Dados cedidos por Takeharu Nagai, Mitsuru Hattori, Departamento de Ciência e Engenharia Biomolecular, Sanken, Universidade de Osaka.

Combine formação de imagem por fluorescência, bioluminescência e luz transmitida

Combine métodos e modalidades de observação para ver as alterações em toda a célula e no nível do gene ao mesmo tempo. Por exemplo, observe a expressão gênica de Ascl1 e o ciclo celular no processo de autorreplicação de células-tronco neurais. Usando um indicador de ciclo celular baseado em ubiquitinação fluorescente (Fucci, Fluorescent ubiquitination-based cell cycle indicator), o sistema permite que você visualize as flutuações na expressão gênica de Ascl1 em cada estágio do ciclo celular.

Formação de imagem com três canais e resolução de célula única usando fluorescência (direita, vermelho/verde), bioluminescência (esquerda, amarelo) e contraste de fase (esquerda, escala de cinza). Dados cedidos por Itaru Imayoshi, Centro de Pesquisa para Sistemas Vivos Dinâmicos, Faculdade de Bioestudos, Universidade de Kyoto; Akihiro Isomura, Ryoichiro Kageyama, Instituto de Pesquisa Viral, Universidade de Kyoto.

Bibliografia: Science. 2013 Dec 6;342(6163):1203-8. doi: 10.1126/science.1242366.

Formação de imagem de resposta a fármaco para avaliação de eficácia

É possível medir a atividade de receptores acoplados à proteína G (GPCRs, G protein-coupled receptors; um alvo farmacológico estudado com frequência) usando a concentração de cálcio em um esferoide. A triagem e análise de teor elevado usando uma microplaca permite que você analise as diferentes condições, como concentrações e condições ambientais, assim como a biblioteca de possíveis fármacos.

Um sistema estável de incubação permite observar as diferenciações morfológicas celulares e a resposta aos fármacos no decorrer de períodos prolongados. A bioluminescência oferece uma melhor relação sinal-ruído (SNR, Signal-to-Noise Ratio) em comparação à fluorescência, permitindo detectar até mesmo respostas em uma escala de minutos.