A fonte de luz do microscópio é uma das partes mais importantes do seu instrumento. A iluminação correta permite a observação ideal de suas amostras, bem como a captura de imagens e análise de dados. Dependendo do tipo de fonte de luz de excitação por fluorescência (lâmpada de arco de mercúrio, lâmpada de haleto metálico de mercúrio ou LED), existem diferentes maneiras de melhorar seu sistema.
Como a segunda parte de nossa série de aprimoramento de microscópio, este artigo fornece dicas úteis para otimizar sua fonte de luz fluorescente.
Lâmpadas de arco de mercúrio
As lâmpadas de arco de mercúrio tradicionais são geralmente montadas em um compartimento de lâmpadas conectado diretamente ao microscópio, embora em sistemas como microscópios confocais sua saída possa ser fornecida por meio de um guia de luz. Para maximizar a vida útil dessas fontes de luz, execute estas quatro práticas recomendadas, seguindo as instruções do fabricante:
Ligue e desligue a lâmpada com menos frequência:
Precisa sair da sala brevemente? Mantenha a lâmpada acesa! Ligar e desligar frequentemente a luz encurta a vida útil de uma lâmpada. Embora algumas unidades de energia para lâmpadas de mercúrio tenham um recurso de espera de resfriamento para evitar mudanças frequentes, estar atento a essa característica pode ajudá-lo a estender a vida útil da lâmpada.Certifique-se de que sua lâmpada seja nova:
A intensidade das lâmpadas de mercúrio começa a diminuir após apenas 70 horas. Em 200 horas, elas estão significativamente mais fracas. Certifique-se de trocar sua lâmpada de acordo com a vida útil nominal (200 ou 300 horas). Sempre descarte essas lâmpadas de acordo com a política de resíduos perigosos de sua organização.Alinhe a lâmpada:
O alinhamento adequado resulta em iluminação de campo homogênea. Releia o manual do usuário para seguir o processo correto para o seu porta-lâmpadas. Uma maneira fácil de verificar se sua lâmpada está desalinhada é colocar um cartão de papel branco na platina do microscópio (o cartão de visita de seu representante da Olympus também serve). Em seguida, visualize-o em baixa ampliação usando a excitação azul. A celulose apresenta fluorescência natural, portanto, a iluminação irregular será facilmente percebida.Tenha uma peça sobressalente à mão:
Tenha sempre ao menos uma peça sobressalente para caso de falha da lâmpada. Às vezes, as lâmpadas de mercúrio velhas podem parar de acender a qualquer momento e você não quer ser pego desprevenido quando estiver pronto para fazer a imagem de suas amostras. Lembre-se de trocar a lâmpada de acordo com as instruções do fabricante (normalmente após 200 ou 300 horas, dependendo da lâmpada) e descartar a velha como resíduo perigoso de mercúrio.
Sistemas de lâmpadas de mercúrio e haletos metálicos
Os sistemas de lâmpadas de mercúrio e de haletos metálicos usam uma lâmpada pré-centrada de haletos metálicos de longa duração revestida com mercúrio. Essas lâmpadas duram normalmente 2.000 horas e são instaladas pré-centralizadas na unidade de energia principal. A iluminação é normalmente fornecida ao microscópio por meio de um guia de luz líquida (LLG), embora existam algumas unidades de montagem direta no mercado.
Um exemplo de uma lâmpada de iodetos metálicos
Essas fontes de luz mantêm uma produção relativamente estável durante as primeiras 1.000 horas, depois a intensidade começa a diminuir. Consulte as informações técnicas do fabricante sobre a saída espectral ao longo do tempo e substituição de acordo com as instruções. Assim como acontece com as lâmpadas de mercúrio, você deve descartar as antigas de acordo com a política de resíduos perigosos de sua organização.
Muitas pessoas não percebem que o LLG se degrada com o uso e se torna significativamente menos eficiente após 4.000 a 6.000 horas. Se sua unidade de energia principal tiver um obturador embutido, use-o em vez do microscópio para bloquear a luz de excitação. Isso ajudará a manter a eficiência do LLG por mais tempo.
No entanto, você deve planejar a troca da guia de luz líquida após a segunda ou terceira substituição da lâmpada. As guias de luz líquida não precisam ser centralizadas, mas devem estar totalmente encaixadas no soquete da unidade de potência e no adaptador LLG montado no microscópio. Certifique-se de seguir as instruções do fabricante ao substituir o LLG.
Guias de luz líquida fornecem luz para o microscópio
Fontes de luz LED
A atualização de uma fonte de luz fluorescente à base de mercúrio para uma unidade de díodo emissor de luz (LED) tem muitos benefícios para o desempenho do microscópio e facilidade de manutenção, incluindo:
- Picos espectrais mais brilhantes do que o mercúrio
- Ligar/desligar instantaneamente sem aquecimento
- Vida útil extremamente longa (20.000 horas ou mais)
- Não há necessidade de comprar ou alinhar lâmpadas (hurra!)
- Ecologicamente correto devido ao menor consumo de energia e à ausência de mercúrio
Muitas fontes de LED produzem pico de saída espectral mais brilhante do que o mercúrio em comprimentos de onda importantes, como 488, 568 e 647. Os modelos estão disponíveis entre três a 16 comprimentos de onda de excitação de comutação rápida independentes.
As fontes de LED têm tempos de ativação/desativação muito rápidos e a maioria oferece intensidades variáveis, algumas por comprimento de onda. Eles podem obter o comprimento de onda do obturador manualmente ou ser disparados via USB ou sinal de lógica transistor-transistor (TTL) do seu PC/software. Aqueles que oferecem comprimentos de onda acionados individualmente são fantásticos para atualizar um microscópio manual mais antigo para fluorescência multicanal automatizada (usando um conjunto de filtros multicanal). Vá um passo além e adicione um dispositivo de foco Z, câmara ambiental e software apropriado para converter aquele microscópio invertido manual antigo em um sistema de imagem de lapso de tempo de célula viva.
Os sistemas de LED são muito mais fáceis de gerenciar porque não exigem alinhamento e não têm lâmpadas para trocar. Eles duram dezenas de milhares de horas, não têm resíduos de mercúrio e consomem muito menos energia. Como resultado, eles podem expandir a gama de aplicações que você pode gerenciar com seu microscópio mais antigo a um custo geral de propriedade muito mais baixo.
Encontre mais dicas de especialistas para melhorar o microscópio
Acreditamos que obter mais do seu sistema de microscópio existente deve ser fácil. É por isso que reunimos uma série de postagens sobre o assunto para tornar o processo o mais simples (e sem estresse!) possível.
Se ainda não o fez, certifique-se de revisar a primeira parte de nossa série de aprimoramento de microscópio: Cinco maneiras de prolongar a vida (e desempenho) do seu microscópio. E fique ligado na nossa próxima postagem para ficar por dentro de atualizações simples para imagens de células vivas estáveis.
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