As objetivas desempenham um papel fundamental no sistema do seu microscópio, dado que ajudam a estabelecer a qualidade da imagem. Na verdade, muitas objetivas convencionais introduzem desafios de formação de imagem que podem comprometer o desempenho do seu microscópio.

Felizmente, a tecnologia óptica continua a avançar e a corrigir erros de formação de imagem comuns. A publicação de hoje do blog explorará três vantagens de usar objetivas de alto desempenho X Line^™ da Olympus para obter dados de formação de imagem de alta qualidade. 

1. Nivelamento expandido para qualidade uniforme.

Ao usar objetivas convencionais, pode ser desafiador obter imagens uniformemente niveladas em um campo de visão amplo. Um nivelamento fraco da imagem pode causar bordas de imagem escuras ou desfocadas, reduzindo a qualidade da imagem e dificultando a análise ou medição das amostras.

Como é que as nossas objetivas X Line podem ajudar? As nossas objetivas proporcionam excelente nivelamento da imagem do centro até a borda em observações de campo de visão alargado. A alta qualidade constante de imagem em todo o campo de visão ajuda você a criar imagens montadas com precisão de espécimes grandes, como seções de tecido inteiro. Você também pode ficar seguro de que tem dados de imagem confiáveis para análises quantitativas.

Segue-se um exemplo:

Estas imagens 12 × 12 de uma seção de cérebro de camundongo Fucci2 Tg foram captadas com o microscópio confocal FV3000 usando objetivas de imersão em óleo 60x X Line e objetivas convencionais (AN 1,42). (Ciano: DAPI [405 nm].)

Como você pode ver, o nivelamento melhorado da objetiva X Line produz uma imagem lado a lado mais nítida em um campo de visão amplo.

(As imagens são cortesia de Takako Kogure e Atsushi Miyawaki do Laboratory for Cell Function Dynamics, RIKEN Center for Brain Science.)

2. Correção cromática melhorada para reprodutibilidade de cores excepcional.

A aberração cromática é um desafio óptico comum. Ocorre quando uma lente não foca diferentes cores no mesmo lugar. Isto é, a lente atua como um prisma; as cores que atravessam a lente se dividem em ângulos diferentes. A menos que sejam corrigidas, as imagens de microscopia terão um aspecto distorcido com margens coloridas ao redor das bordas. Apesar disto, muitas lentes convencionais não oferecem correção cromática suficiente.

As nossas objetivas X Line garantem ampla correção de aberração cromática entre 400 e 1.000 nm. Isso resulta em melhor reprodutibilidade de cor durante a formação de imagens de fluorescência multicores e de campo claro. A reprodução de cores precisa também melhora a precisão da imagem, para que você possa confiar em seus dados.

Veja a diferença nas seguintes imagens.

Essas imagens de uma célula HeLa identificada usando a técnica FISH foram captadas com o microscópio confocal FV3000 com objetivas de imersão em óleo 60x X Line e objetivas convencionais (NA 1,42). (CEP17 [espectro verde], CEP18 [espectro laranja] e núcleo [DAPI]).

Com o amplo alcance de correção cromática das objetivas X Line de 400–1.000 nm, os sinais verdes e vermelhos são apresentados com precisão no núcleo. Na imagem obtida com objetivas convencionais, os sinais localizados na parte inferior do núcleo da célula são apresentados fora dele.

3. Abertura numérica melhorada para excelente qualidade de imagem.

A abertura numérica de uma objetiva define a capacidade de absorver luz e determina a resolução da imagem. Em resumo, uma objetiva com uma abertura numérica superior pode capturar imagens mais claras com maior resolução, para que você possa ver mais da sua amostra.

Em contrapartida, uma objetiva com alta ampliação mas baixa abertura numérica limitará a sua capacidade de ver detalhes da amostra, aumentando o risco de deixar passar informações importantes.

As nossas objetivas X Line oferecem uma abertura numérica superior de até 1,45 para ajudar a garantir excelente qualidade de imagem para análise quantitativa. Uma abertura numérica melhorada pode ajudar em muitas aplicações, como a detecção de sinais fracos durante a observação com fluorescência ou a minimização de fototoxicidade/fotobranqueamento em experimentos de formação de imagem de células vivas.

No exemplo abaixo, veja como a AN superior das nossas objetivas X Line melhora o brilho.

Estas imagens de fluorescência de campo amplo de células NG108-15 foram captadas usando objetivas a seco 20x convencionais e objetivas X Line. (Azul: núcleo; verde: microtúbulos; vermelho: filamentos de actina.)

Como você pode ver na comparação de imagens, a abertura numérica melhorada da objetiva X Line captou mais luz e produziu uma imagem mais clara.

Objetivas excelentes possibilitam experimentos eficientes

As objetivas convencionais muitas vezes exigem que você concilie estas três vantagens importantes: abertura numérica, nivelamento da imagem ou correção cromática. Se você trocar de objetivas para obter uma melhoria em uma área, poderá comprometer outra.

A série de alto desempenho X Line da Olympus foi desenvolvida com lentes ultrafinas para ajudar você a obter os três benefícios em uma objetiva, permitindo experimentos mais eficientes. Saiba mais sobre a série X Line para descobrir as objetivas certas para a sua aplicação.

* Embora tenha se tornado uma das linhagens celulares mais importantes na pesquisa médica, é importante reconhecer que a contribuição de Henrietta Lacks para a ciência aconteceu sem o seu consentimento. Essa injustiça, embora tenha levado a descobertas importantes em imunologia, doenças infecciosas e câncer, também levantou discussões importantes sobre privacidade, ética e consentimento na medicina.
Para saber mais sobre a vida de Henrietta Lacks e sua contribuição para a medicina moderna, clique aqui.
http://henriettalacksfoundation.org/
 

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