Qual é a resolução máxima do sistema Alpha3 no plano X–Y e ao longo do eixo Z?

A resolução máxima no plano X–Y é dada pelo comprimento físico dos píxeis na câmera dividido pelo aumento da objetiva. Por exemplo, a 40x, a resolução máxima é de 6,5 µm/40 = 0,16 µm.

Na microscopia Light Sheet, a resolução máxima ao longo do eixo Z é limitada pela largura da iluminação light sheet: a light sheet mais fina que é possível usar no sistema Alpha3 é de 2 µm. Para aumentos acima de 10x, cada 1 mícron da amostra pode ser escaneado. A amostragem de Nyquist limita a resolução máxima no plano Z ao dobro disso, ou seja 2 µm.

Que tipos de laseres são usados na microscopia Light Sheet e qual é a potência nominal média?

É possível integrar de 4 a 6 linhas de laser nos combinadores. São principalmente díodos de laser, com exceção da linha 561, que é DPS e requer um modulador para configuração da potência. Geralmente, a potência nominal média fica entre 50 e 100 mW.

O sistema Alpha³  pode ter configuração de câmera dupla?

A maioria das configurações é flexível o suficiente com uma câmera, embora a configuração de duas câmeras também seja possível.

O sistema Alpha³  consegue formar imagens multicoloridas?

Existem dois métodos de formação de imagens multicoloridas no sistema Alpha³. O primeiro envolve escanear a mesma região da amostra várias vezes e trocar o laser e o filtro de emissão a cada vez.

O segundo é o “modo intermitente” que usa um filtro de rejeição após a objetiva que permite a passagem de todo o espectro de banda larga, mas corta as linhas de laser. Dessa forma, é possível escanear a amostra uma vez e ativar cada laser em cada uma das camadas. Esse método é mais rápido e fornece uma colocalização muito melhor em amostras vivas.

Os laseres IR podem ser integrados ao sistema Alpha³  para microscopia light sheet multifóton?

Nesse momento, 730 nm é o comprimento de onda mais longo para o espectro visível que está disponível, mas estamos explorando aplicações multifóton.

Os algoritmos de deconvolução convencionais podem ser usados nos dados gerados pelo sistema Alpha3?

Sim, a deconvolução pode ser realizada nos dados gerados e esta análise foi realizada anteriormente pela Olympus.

As imagens capturas pelo sistema Alpha³  podem ser exportadas para uma plataforma de código aberto para deconvolução?

O software incluído no sistema Alpha³ gera imagens que podem ser abertas por qualquer software de código aberto. No entanto, o sistema usado para processamento de imagens deve ser capaz de carregar e processar grandes conjuntos de dados de 300 a 800 GB.

Existem requisitos especiais para a manipulação de dados ou armazenamento de imagens na microscopia light sheet?

O sistema Alpha³ inclui um computador com memória suficiente para manipular grandes conjuntos de dados, mas recomendamos o uso de um servidor para armazenamento a longo prazo. Também é melhor carregar os dados em um servidor o mais rápido possível após a aquisição.

Qual é a velocidade de aquisição mais rápida possível usando a varredura de foco óptico?

A varredura de foco óptico reduzirá a taxa de aquisição em um fator de 4. Por exemplo, para um tempo de exposição de 10 ms, você pode ter um tempo de quadro de 40 ms que fornecerá 20 quadros/segundo.

É fácil esterilizar os suportes de amostra e as braçadeiras?

Todas as peças foram fabricadas a partir de aço inoxidável de grau médico e são inertes e resistentes a produtos químicos e corrosão. Elas podem ser autoclavadas ou submersas em etanol puro para esterilização.

Qual é a câmera incluída no sistema Alpha³?

O sistema inclui uma câmera CMOS digital ORCA-flash 4.0. Ela possui píxeis de 6,5 µm e um sensor de 2.048 × 2.048.

O sistema Alpha³  inclui uma placa de rede rápida para transferência de dados?

Fornecemos opções de 1, 10 e 100 GHz para transferência de dados, mas também atendemos solicitações personalizadas.