Vantagens do uso do condensador motorizado do escâner de lâminas SLIDEVIEW™ VS200 para ajustar o contraste do espécime

Controle do contraste da amostra

Em microscopia óptica, a abertura do diafragma pode ser usada para controlar a resolução e o contraste, pois mudar a abertura do diafragma altera o cone de iluminação projetado na objetiva. O ajuste correto da abertura do diafragma do condensador é crucial para capturar imagens de alta qualidade porque ela controla a abertura numérica, o poder de resolução, a profundidade do campo e o caráter geral da imagem.

Há duas maneiras de controlar a quantidade de luz que chega a uma amostra: ajustar o diafragma do condensador ou alterar a quantidade de energia que chega à fonte de luz.

Veja abaixo um exemplo de um espécime de fígado de rato tingido com H&E adquirido com objetiva UPlanXAPO (AN 0,95) 40x em um sistema de escaneamento de slide VS200 em configurações diferentes de diafragma condensador.

Estas imagens mostram que, da esquerda para direita, a abertura do diafragma do condensador faz com que as imagens percam contraste, mas ganhem resolução.*

O sistema VS200 é equipado com um condensador universal motorizado Olympus BX3-UCD8A (AN 0,9), que permite fácil controle da abertura. Com o software do sistema, a abertura pode ser ajustada de fechada a totalmente aberta em incrementos de 1%. O sistema faz automaticamente esses ajustes, dependendo da ampliação e da abertura numérica (AN) da objetiva.

Como valor padrão o sistema VS200 usa uma abertura do diafragma que é 75% da AN da objetiva. Quanto maior a AN da objetiva, mais ampla é abertura do diafragma. É possível criar um novo método de observação (OM) em que a configuração da abertura do diafragma seja, por exemplo, 50% da AN da objetiva.

Para isso, abra o software VS200-ASW e acesse "Personalização do Dispositivo". Faça uma cópia do método de observação BF e dê um nome a ela.

Finalmente, defina o valor da abertura do diafragma (parada de abertura BX3) e salve o método de observação.

_{Observação: mudar a abertura do diafragma pode afetar a correção de sombreamento do novo método de observação de campo claro.
Calibre a correção de sombreamento em separado para o novo método de observação.}

Exemplo de aplicação:

O teste de Papanicolau, abreviado como teste Pap, é um método de varredura cervical usado para detectar possíveis processos pré-cancerígenos e cancerígenos no cérvix.

A amostra de teste Pap humano nestas imagens é corada com hematoxilina, laranja G6 e eosina. As imagens à esquerda foram capturadas com uma abertura do diafragma de 75% e as imagens à direita foram capturadas com uma abertura do diafragma de 50%. As imagens mostram que a abertura menor do diafragma melhorou o contraste da amostra, ao mesmo tempo que reduziu ligeiramente a resolução.

_{Imagens escaneadas com a objetiva UPlanXAPO 20x, NA de 0,8, com configuração de abertura do diafragma padrão (75% de abertura) e abertura do diafragma de 50%, o que melhora o contraste com perda mínima de resolução.}

Conclusão:

A abertura do diafragma ajustável e motorizada do sistema VS200 oferece flexibilidade para que os usuários consigam o máximo das amostras, especialmente se forem muito tênues ou com baixo contraste. Isso pode ser aplicado a amostras hematológicas, bem como lâminas com corante imuno-histoquímico (IHC) com pouca coloração.

_{* Para mais informações sobre a abertura do diafragma e como ela é usada, acesse:
www.olympus-lifescience.com/en/microscope-resource/primer/java/kohler/contrast}