새로운 장기간의 살아있는 세포를 사용하거나 유기체 연구 어플리케이션을 모델링해야 하지만 오래된 연구용 도립 현미경으로 이 어플리케이션을 처리할 수 있는지 확신하지 못하시나요? 새로운 도립 현미경 비용이 현재 예산에서 벗어납니까? 몇 가지 주요 개조만으로 현재의 현미경이 연구 목표를 달성할 수 있는 "다리"를 가질 수 있다는 사실을 알게 되면 놀라실 겁니다.
현미경 개선 시리즈의 파트 1 및 파트 2에서 설명한 업그레이드와 함께 환경 제어 챔버 또는 인클로저를 추가하면 실현 불가능하다고 생각한 라이브 이미징 연구 목표를 달성할 수 있습니다.
안정적인 라이브 셀 이미징을 위한 환경 통제의 중요성
라이브 셀 이미징에는 20분, 수 시간 또는 심지어 그 이상이 걸릴 수 있습니다. 장기적인 실험에서는 실온 변화와 관련된 Z-포커스 드리프트 외에도 다음 조건을 통제해야 할 수도 있습니다.
- 온도(최대 37°C[99°F] 또는 최저 22°C[72°F])
- 습도
- CO2(혈중 산소 감소 조건과 관련이 있는 경우 O2)
현미경 환경 통제는 이러한 기능 중 일부 또는 전체를 포함하도록 구성될 수 있으므로 다양한 라이브 셀 및 모델 유기체 이미징 어플리케이션에 맞게 쉽게 업그레이드할 수 있습니다.
스테이지 상단형 유닛의 이점
Tokai Hit 및 Okolab의 제품과 같은 스테이지 상단형 시스템은 편리하게 탈착 가능한 챔버 장치를 제공합니다. 따라서 필요에 따라 환경 통제를 추가 및 제거할 수 있습니다. 이 기능은 특히 라이브 셀 이미징이 필요하지 않은 어플리케이션에 장비를 사용할 때 특히 유용합니다.
또한 이러한 시스템은 수 시간, 심지어 며칠 동안 생존 가능성을 유지하는 데 매우 효과적입니다. 관류 포트를 통해 습도 조절 및 영양분/작용제 공급을 위한 수분 및 배지 보충이 가능하고, 사용 가능한 인라인 솔루션 히터는 열 충격을 최소화합니다.
또한, 샘플과 접촉할 때 이멀전 대물렌즈가 열 흡수원 역할을 하므로 이러한 광학계를 사용할 때에는 대물렌즈 히터를 추가하는 것이 좋습니다.
라이브 셀 이미징용 현미경 인클로저
또 다른 옵션은 전체 현미경 배양 인클로저입니다. 현미경에서 인클로저를 쉽게 제거할 수 없지만 스테이지 상단형 챔버를 사용할 때보다 더 큰 용량 내에서 환경 통제를 유지할 수 있습니다.
이 인클로저는 유체 분사 장치를 수용할 수 있을 만큼 충분히 넓고 안정적인 온도 환경을 제공합니다. 잦은 가열/냉각 주기는 현미경 구성 요소의 마모 및 파손을 증가시키므로 이것은 샘플과 현미경 모두에 유용합니다. 많은 제조업체는 인클로저 내부에서 어두운 환경을 유지할 수 있는 블랙아웃 모델을 제공하므로 별도의 현미경 공간이 필요하지 않습니다.
실내 환경의 변화가 타임 랩스(Time-Lapse) 이미징에 미치는 영향
대다수 현미경 배양 시스템은 평균 온도 25°C(77°F)에 맞게 보정됩니다. 일부 시스템은 온도를 정밀하게 모니터링하여 신속하게 온도를 보정합니다. 그렇더라도 온도 변화가 잦은 영역에 장비를 두지 않는 것이 가장 좋습니다. 장비를 환기구 아래에 두지 않아야 하지만, 부득이한 경우에는 칸막이를 사용하여 공기 흐름이 현미경에 직접 닿지 않도록 하십시오.
마지막으로, 현미경은 원심분리기, 냉장고, 냉동고, 자주 사용하는 문과 같은 대형 장비와 떨어진 곳에 두어야 합니다. 이러한 장비와 가까이에 두면 Time-series 이미징 실험에 진동 아티팩트가 포함될 수 있습니다. 공압식 방진 테이블은 장비를 격리하는데 유용하지만, 이미징 실험에서는 어떠한 진동 방해의 위험도 피하는 것이 가장 좋습니다.
현미경 활용 극대화
더 많은 현미경 개선 팁이 필요하세요? 이 시리즈의 파트 1 및 파트 2를 읽고 효과적인 라이브 셀 이미징을 위해 고려해야 할 다른 시스템 업데이트를 확인하십시오. 지금 바로 아래 사항도 확인하십시오.
