현미경 광원은 기기의 가장 중요한 부분 중 하나입니다. 적절한 조명을 통해 샘플 관찰뿐만 아니라 이미지 캡처 및 데이터 분석도 최적화할 수 있습니다. 형광 여기(Excitation) 광원의 유형(수은등, 수은 메탈 할라이드 램프 또는 LED)에 따라, 시스템을 개선하는 여러 방법이 있습니다.
이 게시물은 현미경 개선 시리즈 2부로, 형광 광원을 최적화하는 데 유용한 조언을 제공합니다.
수은등
기존의 수은등은 일반적으로 현미경에 직접 부착된 램프 하우스에 장착되지만, 컨포칼 현미경과 같은 시스템에서는 광가이드를 통해 출력이 전달될 수 있습니다. 이러한 광원의 수명을 최대화하려면 제조업체 지침에 따라 다음 네 가지 모범사례를 수행해 보세요.
램프를 켜고 끄는 빈도를 줄입니다.
곧 방 밖으로 나가야 하나요? 램프를 켜두세요! 자주 스위치를 켜고 끄면 램프의 수명이 단축됩니다. 일부 수은등용 전원 장치에는 빈번한 스위칭을 방지하는 쿨다운 대기 기능이 있지만, 이 특성을 염두에 두면 전구의 수명을 연장하는 데 도움이 될 수 있습니다.전구가 새 것인지 확인하세요.
수은 전구의 강도(Intensity)는 불과 70시간 후부터 떨어지기 시작합니다. 200시간까지, 강도는 상당히 약해집니다. 정격 수명(200 또는 300시간)에 따라 전구를 교체하세요. 항상 해당 조직의 유해 폐기물 정책에 따라 사용한 전구를 폐기하세요.전구를 배열합니다.
적절하게 정렬하면 시야 조명이 균일해집니다. 사용 설명서를 검토하여 램프 하우스에 대한 올바른 프로세스를 따르세요. 전구가 잘못 정렬되었는지를 확인하는 쉬운 방법은 현미경 스테이지에 백지 카드를 놓는 것입니다(Olympus 담당자의 명함도 좋습니다). 그런 다음 블루형광을 사용하여 저배율에서 봅니다. 셀룰로오스는 자연적으로 형광을 내므로, 고르지 않은 조명이 쉽게 나타납니다.예비품을 가까운 곳에 두세요.
전구 고장 시를 대비해서 항상 하나 이상의 예비품을 준비해 두세요. 가끔 오래된 수은 전구는 그냥 작동을 멈추므로, 샘플을 촬영할 모든 준비를 마친 상태에서, 조명 없이 촬영하는 상황을 만들고 싶지 않을 겁니다. 제조업체의 지침에 따라 전구를 교체하고(전구에 따라, 일반적으로 200 또는 300시간 후) 오래된 전구를 수은 유해 폐기물로 폐기하세요.
수은 및 메탈할라이드 램프 시스템
수은 및 메탈할라이드 램프 시스템은 중심이 미리 맞춰진 수명이 긴 수은 도핑 메탈할라이드 전구를 사용합니다. 일반적으로 이러한 전구는 2,000시간 지속되고 주 전원 장치에 미리 중심이 맞춰져 설치됩니다. 시중에는 몇 개의 직접 장착형 장치가 있지만, 일반적으로 조명은 LLG(Liquid Light Guide)를 통해 현미경으로 전달됩니다.
메탈할라이드 램프의 예
이러한 광원은 상대적으로 처음 1,000시간 동안은 안정적인 출력을 유지하고, 그 이후부터 강도(Intensity)가 약해지기 시작합니다. 시간 경과에 따른 스펙트럼 출력 및 지침에 따른 교체는 제조업체의 기술 정보를 참조하세요. 수은 전구처럼, 해당 조직의 유해 폐기물 정책에 따라 오래된 전구를 폐기하고자 할 것입니다.
많은 사람들이 LLG는 사용하면서 저하되고 4,000~6,000시간 후에는 효율성이 크게 떨어진다는 사실을 깨닫지 못합니다. 주 전원 장치에 내장된 셔터가 있는 경우 현미경의 셔터가 아닌 이 셔터를 사용하여 여기광(Excitation light)을 차단하세요. 이렇게 하면 LLG의 효율성을 더 오래 유지하는 데 도움이 됩니다.
그럼에도 불구하고, 두 번째 또는 세 번째 전구 교체 후에는 LLG(Liquid Light Guide) 교체를 계획해야 합니다. LLG가 중심에 놓일 필요는 없지만, 전원 장치 소켓과 현미경에 장착된 LLG 어댑터 모두에 단단히 안착되어야 합니다. LLG를 교체할 때 제조업체의 지침을 따르세요.
LLG가 현미경에 빛을 전달
LED 광원
수은 기반 형광 광원에서 발광 다이오드(LED) 장치로 업그레이드할 경우, 다음을 포함하여 현미경 성능과 유지보수 편이성에 있어 많은 이점이 있습니다.
- 수은보다 더 밝고 많은 스펙트럼 피크
- 예열 없이 즉시 켜기/끄기
- 매우 긴 수명(20,000시간 이상)
- 전구 구입 또는 정렬 필요 없음
- 에너지 사용량이 적고 수은이 없어 환경 친화적
많은 LED 소스가 488, 568 및 647과 같은 주요 파장에서 수은보다 더 밝은 피크 스펙트럼 출력을 생성합니다. 모델은 3개~16개의 독립형 신속 전환 여기 파장으로 어디에나 사용할 수 있습니다.
LED 소스는 켜기/끄기 시간이 매우 빠르고 대부분 가변 강도를 제공합니다(일부는 파장에 의함). 이들은 핸드 컨트롤러로 파장을 셔터링하거나 PC/소프트웨어에서 USB 또는 TTL(Transistor-Transistor Logic) 신호를 통해 트리거링될 수 있습니다. 개별적으로 트리거링된 파장을 제공하는 소스는 이전의 수동 현미경을 자동 다중채널 형광으로(다중 채널 필터 세트를 사용함) 업그레이드하는 데 매우 탁월합니다. 한 발 더 나아가 Z-포커스 장치, 환경 챔버 및 적합한 소프트웨어를 추가하여 이전의 수동 도립 현미경을 라이브 셀 타임랩스 이미징 시스템으로 변환합니다.
LED 시스템은 정렬이 필요 없고 교체할 전구가 없으므로 관리하기가 훨씬 더 쉽습니다. 이들 시스템은 수만 시간 지속되며, 수은 폐기물이 없고, 훨씬 적은 에너지를 사용합니다. 그 결과, 훨씬 적은 총 소유 비용으로 구형 현미경으로 관리할 수 있는 애플리케이션 범위를 확장할 수 있습니다.
전문가에게서 더 많은 현미경 개선 조언 구하기
우리는 기존 현미경 시스템을 더 쉽게 최대한 활용할 수 있어야 한다고 생각합니다. 이를 위해, 가능한 한 (그리고 스트레스 없이) 프로세스를 단순화해야 한다는 주제로 게시물 시리즈를 게재하고 있습니다.
아직 게시물을 살펴보지 않으셨다면, 현미경 개선 시리즈 1부: 현미경 수명 (및 성능)을 연장하는 5가지 방법을 꼭 확인하세요. 그리고 후속 시리즈에서 안정적인 라이브 셀 이미징을 위한 간편한 업그레이드 방법에 대해서도 알아보세요.
