약물 치료에 대한 반응-3D 세포 배양의 세포 주기 분석

세포 이미징을 통해 3D 세포 배양에 미치는 항암제의 영향을 평가할 수 있습니다.
항암제가 세포 주기 지표인 Fucci와 함께 세포 주기에 미치는 영향을 조사할 수 있습니다.

목적

최근에, 기존 2D 세포 배양 외에, 항암제의 기계적 연구에 3D 세포 배양이 사용되었습니다. 본 연구에서는 세포 주기와 세포 죽음 단계에서 약제에 대한 3D 세포 배양의 반응을 분석하였습니다.

샘플 제공

Fucci는 이중 색상 배합을 사용하는 세포 주기 지표입니다. 유전자 이식 HT-29 세포 발현 Fucci의 세포 현탁액을 U자형 바닥 96웰 플레이트에 파종하였습니다. 세포 배양의 시작으로부터 72시간 후 세포 배양을 연속 희석된 시스플라틴(0-10nM)에 노출하였습니다. 96시간 배양 후 시스플라틴이 포함된 배지를 세포 배양에서 제거한 후 세포 배양물을 4% 포르말린으로 고정시켰습니다.

결론
형광 이미지의 획득 및 분석

세포 이미징 분석 시스템의 결합 사용(Ex: 488nm 및 561nm)을 통해 3D 세포 배양의 컨포칼 형광 이미지를 획득하였습니다. 최대 강도 투사로 형광 강도 데이터를 처리하고 뒤이어 분석 소프트웨어 및 세포 계수를 사용하여 핵을 식별하였습니다. 시스플라틴의 추가로부터 96시간 후 스페로이드 내 HT-29 세포 수가 그림 1에 표시됩니다. 이중 색상 신호 분석에서는 3D 세포 배양을 시스플라틴으로 처리하여 세포 주기의 G0 및 G1 위상과 세포 수가 감소되었음이 밝혀졌습니다(그림 2 및 3).

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