스페로이드의 내부를 대상으로 한 항체 약제의 분석

세포 이미징 분석 시스템의 사용을 결합한 형광 이미지의 분석을 통해 스페로이드 내 저산소성 영역을 표적으로 한 화합물의 특성화가 가능합니다.

목적

종양 조직의 세포 이질성은 암 진행, 혈관형성, 약제내성 및 기타 사안과 긴밀히 관련됩니다. 따라서 신약 개발 전략에 세포 이질성이 중요한 인자가 되고 있습니다. 체외 암 스페로이드 모델은 살아있는 조직 내 고형 종양의 미세환경을 재현할 수 있기 때문에 암세포 내 이질성의 분석에 유용한 도구가 될 것으로 예상됩니다. 세포 이미징 분석 시스템이 컨포칼 형광 관찰에서 획득된 이미지 데이터를 분석합니다. 본 연구에서는 스페로이드 크기의 시각화 및 스페로이드 내 미세환경을 통해 약제의 세포독성을 정량적으로 평가하였습니다.

샘플 제공

PrimeSurface® 96U plate(SUMITOMO BAKELITE CO., LTD)를 사용하여 암 스페로이드(TH-29)를 준비하였습니다. 시스템으로 측정한 날로부터 1일 후 스페로이드에 Hoechst 33342와 MAR 프로브(GORYO Chemical)를 추가하였습니다. 그런 다음 스페로이드의 크기 및 저산소성을 시각화하였습니다.

결론

HT-29 세포의 각기 다른 수로 구성된 스페로이드의 최대 강도 투사 이미지에 따라, 스페로이드 크기의 증가 시 저산소성 영역이 증가하였습니다(그림 1). 저산소성 영역이 큰 스페로이드를 이리노테칸(국소이성화요소 억제제)으로 처리하여 스페로이드 크기와 저산소성 영역이 동시에 감소되었습니다(그림 2(a) 및 (b)). 하지만 로테논(미토콘드리아 내 전자 전이 체인의 억제제)으로 처리한 경우는 스페로이드 크기가 감소되지 않고 저산소성 영역만 감소되었습니다(그림 2(c) 및 (d)). 이러한 결과는 시스템을 통해 암세포 내 이질성에 미치는 약제의 각기 다른 영향에 대한 정량적 평가를 수행할 수 있는 것을 나타냅니다.

PrimeSurface는 Sumitomo Bakelite Co., Ltd의 등록 상표입니다.
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