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개요
Olympus cellFRAP은 연구자들을 염두에 두고 설계되었으며 데이터 표시 요구에 대한 다양한 평가 옵션과 함께 매우 정확하고 유연한 라이브 셀 광조작을 제공합니다. cellFRAP은 전시야에 걸쳐 표백 영역의 고강도 및 정밀 위치결정을 위해 회절 한정된 레이저 스폿을 이용합니다. 이 시스템의 뛰어난 스폿 품질 덕분에 표백 영역의 위치 및 모양이 완전히 유연하게 될 수 있으며 극도로 정확하게 표백 영역을 제어할 수 있습니다. Olympus IX3 오픈 소스 프레임으로 통합된 cellFRAP 데크는 호환 액세서리의 모든 범위에 걸쳐 기존 이미징 플랫폼에 용이하게 적용될 수 있습니다. Olympus cellSens GEM(Graphical Experiment Manager)의 cellFRAP 솔루션을 이용하여 간단한 시스템 설정 및 실험 제어를 할 수 있습니다. |
최고의 공간 및 시간 해상도cellFRAP 시스템은 광조작 응용에서 확실하고 재현 가능한 데이터를 획득하기 위한 최고의 공간 및 시간 해상도를 보장합니다. 이 시스템의 회절 한정된 스폿 속성에 따라 표백 영역이 극도로 정확하게 제어될 수 있습니다. cellFRAP 시스템은 Olympus Real-time 컨트롤러 기반으로 표백과 표백 후 획득 간에 타의 추종을 불허하는 200µs에 불과한 짧은 지연 시간를 제공합니다. 따라서 이 시스템을 통해 모든 중요한 샘플 응답을 즉시 관찰하고 수집할 수 있습니다. |
표백과 획득 간 200µs | 회절 한정된 스폿 크기는 전체 스캔 영역에 걸쳐 스캐닝 정밀성 및 균일성을 보장합니다. |
회절 한정된 레이저 스폿Olympus cellFRAP 솔루션을 사용하여 샘플을 움직일 필요 없이 최상의 광조작 결과를 얻을 수 있습니다. cellFRAP은 회절 한정된 레이저 스폿을 이용하여 최고의 표백 강도를 보장할뿐 아니라 전시야에 걸쳐 표백 영역의 모양 및 위치에서 정밀하고 유연한 선택도 보장합니다. 고품질 착색 보정된 광학을 통해 예를 들어 광유전학 기술 응용을 위한 하나의 실험 중 최대 네 개의 레이저를 사용할 수 있습니다 |
재현성대부분의 사용자들은 초정밀 실험 제어 및 재현성에 관심이 있습니다. cellFRAP 시스템은 ~1µs 시간 해상도에서 높은 시스템 수준 동기화로 부여된 초정밀 실험 제어에 의해 이러한 요구를 처리합니다. 또한 실험의 전체 워크플로가 기록되고 언제든지 쉽게 재현될 수 있습니다. |
간단한 설정 및 제어시스템이 Olympus Life Science 이미징 플랫폼인 cellSens에 완전히 통합되어 있기 때문에 cellFRAP 작동은 직관적이고 간단합니다. 교정 절차가 자동화되어 사용 중인 대물렌즈 및 레이저 라인을 고려하면서 스캐너와 카메라를 완벽하게 정렬하는 것이 용이합니다. cellSens GEM(Graphical Experiment Manager)의 cellFRAP 작동은 직관적인 시스템 설정 및 실험 제어와 최고의 작동 유연성을 제공하며 최적 속도 성능에 최적화되어 있습니다. 따라서 복잡한 획득 워크플로도 쉽게 정의하여 재현할 수 있으며 모든 장치 작동을 자동화할 수 있습니다. |
cellSens의 GEM(Graphical Experiment Manager)을 사용하여 복잡한 획득 및 분석 워크플로도 쉽게 정의하고 반복할 수 있습니다. | 가변 모양의 점, 선 또는 영역을 표백하고 각 모양에 대해 독립적으로 별도로 표백 조건을 수정할 수 있습니다. |
인터랙티브 실험 제어cellFRAP을 사용하여 표백 영역을 샘플 구조에 정밀하게 적용할 수 있습니다. 실험 조건의 인터랙티브 정의에는 점과 선을 포함한 가변 모양의 표백/광조작 영역에 대한 자유로운 선택이 포함됩니다. 사용 가능한 두 가지 작동 모드: 사전 정의된 관심 영역 기반의 조작 또는 인터랙티브 “Click & Bleach” 모드. 주문형 강도 프로필을 표시하여 시간의 흐름에 따른 신호 강도 변경도 온라인으로 관찰할 수 있습니다. |
데이터 평가 방법 선택데이터를 정확히 평가하기 위해 광조작 이벤트의 시작 및 종료에 대한 타임 마커가 기록된 데이터에 추가됩니다. cellFRAP에는 결과를 분류하기 위한 정성적 FRAP 분석이 포함됩니다. 여기서 배경 및 표백 보정을 포함하여 기록된 데이터로부터 회수율과 이동성 부분 및 고정된 부분이 빠르게 계산됩니다. 또한 카이머그래프는 사용자 정의된 궤적을 따라 타임라인 시각화와 비슷하게 나타납니다. 통합된 내보내기 함수를 통해 추가 데이터 평가를 할 수 있습니다. |
공개 데이터 및 표시에 대한 용이한 해석을 위한 타임라인 시각화 |
요구에 따른 유연성Olympus IX3 오픈 소스 개념 내에 통합된 cellFRAP 데크 솔루션은 기존 이미징 플랫폼에 쉽게 적용될 수 있으며 ZDC, 인큐베이터, 수동 또는 전동 스테이지, Manipulator 등 다양한 액세서리와 결합됩니다. 이를 통해 회전 디스크 및 TIRF 현미경 같은 기타 하이엔드 응용 장치와 함께 광조작 실험의 설정이 가능합니다. 이 시스템에는 별개의 포토스위칭 또는 광유전학 기술 같은 더욱 정교한 응용의 전제 조건에 해당하는 최대 네 개의 광조작용 레이저가 장착될 수 있습니다. |
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응용분야
광활성화 및 포토스위칭많은 세포 입자들은 바이러스 등의 소포(Vesicle)나 세포 내 병원균 같이 빠르게 예측할 수 없이 움직입니다. 따라서 광활성화 및 광변환 속성을 나타내는 형광 분자는 동적 거동을 추적하기 위한 마커로 사용됩니다. 예를 들어 특정 파장이 있는 조명 시 각기 스펙트럼 특성에서 가역적으로 또는 불가역적으로 바뀔 수 있는 PA-GFP, KFP1 및 카에데 같은 형광단을 사용할 수 있습니다. 특히 추가 형광단을 끊임없이 제공할 필요 없이 활성화된 표지 분자에 의한 단백질의 발육에 따라 신호 및 최소 배경 조건이 제공됩니다. |
‘Click & Bleach’cellSens 소프트웨어의 ‘Click & Bleach’ 기능을 통해 사용자는 직접적인 마우스 상호작용을 사용하여 샘플 역학에 대응하고 대상을 광조작할 수 있습니다. 여러 점을 표백하거나 활성화할 수 있으며 표백 절차 중 또는 표백 직후에 결과적 이미지를 캡처할 수 있습니다. |
FRAP광표백 후 형광 회복(FRAP)은 세포의 특정 대상 영역 내에서 특정 분자의 확산 계수를 계산하기 위한 이상적인 방법을 제공합니다. 이는 대상 영역 내에서 특정 분자에 부착된 형광단을 광표백한 후 해당 영역으로의 형광 복구(회복)의 역학을 평가하여 달성됩니다. |
FLIP광표백 후 형광 손실(FLIP)은 세포막에 따른 분자 이동(측면 멤브레인 유동성) 및 특히 막소기관에 대한 멤브레인 연속성을 연구하는 데 유용합니다. 멤브레인 또는 세포의 정의된 영역이 지속적으로 표백되고 나머지 영역에서는 미표백 부분에 의해 정의된 영역에서 표백된 분자가 교체됨에 따라 나머지 영역에서 형광의 동적 손실이 측정됩니다. |
FLAP광표백 후 형광 편재화(FLAP)는 FRAP의 영리한 적응으로 특정 분자 내에서의 역학이 관심사입니다. 대상 분자는 분포와 편재화가 중첩되도록 두 개의 형광단으로 공동 발현됩니다. 형광단의 하나가 정의된 장소에서 표백된 후 두 개의 형광단의 상대 및 절대 분포를 비교하여 분자의 움직임을 따라갈 수 있습니다. |
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