대물렌즈는 이미지 품질을 확정해주는 데 도움이 되기 때문에 현미경 시스템에 중요한 역할을 합니다. 사실은 많은 기존 대물렌즈가 현미경의 성능을 손상시킬 수 있는 이미징 문제를 가져옵니다.
다행스럽게도 지속적인 광학 기술 발전을 통해 일반적인 이미징 오차의 보정이 이루어지고 있습니다. 오늘의 블로그 게시물에서는 고품질 이미징 데이터를 얻을 수 있는 Olympus의 고성능 X 라인™ 대물렌즈 사용의 세 가지 장점을 살펴봅니다.
1. 균일한 품질을 위한 평탄도 확대.
기존 대물렌즈를 사용할 경우 광시야(FOV)에서 균일하게 평탄한 이미지를 얻는 것이 어려울 수 있습니다. 이미지 평탄도가 나쁠 경우 가장자리가 어둡거나 흐려지게 되어 이미지 품질이 낮아지고 샘플을 분석하거나 측정하기 어려워질 수 있습니다.
X 라인 대물렌즈가 어떤 도움을 줄 수 있나요? Olympus의 대물렌즈는 대규모 시야 관찰 시에 중심부터 가장자리까지 뛰어난 이미지 평탄도를 제공합니다. 전체 시야에 대한 지속적으로 높은 이미지 품질을 통해 전체 조직 부분 같이 대규모 표본의 정밀하게 스티칭된 이미지를 만드는 데 도움이 됩니다. 또한 정량 분석을 위한 신뢰할 만한 이미지 데이터를 가지고 있다고 확신할 수 있습니다.
예를 살펴보겠습니다.
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기존 대물렌즈(좌측) 대 X 라인 대물렌즈(우측) 간 이미지 평탄도 비교.
이 Fucci2 Tg 쥐 뇌 부분의 12 × 12 이미지는 기존 및 X 라인 60x 오일 이멀젼 대물렌즈(NA 1.42)를 사용하여 FV3000 컨포칼 현미경으로 캡처되었습니다. (청록색: DAPI(405nm).)
보시다시피 X 라인 대물렌즈의 향상된 평탄도가 대규모 FOV에서 더욱 선명한 타일 이미지를 제공합니다.
(이미지 제공: 뇌과학 RIKEN 센터, 세포 기능 동역학 실험실의 Takako Kogure 및 Atsushi Miyawaki)
2. 뛰어난 색 재현을 위한 색 보정 강화
색 수차는 일반적인 광학적 문제입니다. 이 문제는 렌즈가 동일한 곳에서 각기 다른 색의 초점을 맞추지 못할 경우 발생합니다. 기본적으로 렌즈는 프리즘처럼 작용하므로 렌즈를 통과하는 색이 다양한 각도로 분할됩니다. 보정을 하지 않을 경우 현미경 이미지는 가장자리 주위의 줄무늬 색으로 왜곡되어 보입니다. 그럼에도 불구하고 많은 기존 렌즈들의 색 보정은 불충분합니다.
Olympus의 X 라인 대물렌즈는 400–1000nm의 폭넓은 색수차 보정을 제공합니다. 이에 따라 명시야 및 멀티 컬러 형광 이미징 중에 색 재현성이 크게 향상됩니다. 또한 정확한 색 재현으로 이미지 신뢰도가 향상되므로 데이터에 대한 자신감을 얻을 수 있습니다.
다음 이미지들의 차이를 직접 확인해 보세요.
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기존 대물렌즈(좌측) 대 X 라인 대물렌즈(우측) 간 색 재현성 비교.*
FISH 기법을 사용하여 표지된 HeLa 세포의 이 이미지는 기존 및 X 라인 60x 오일 이멀젼 대물렌즈(NA 1.42)를 사용하여 FV3000 컨포칼 현미경으로 캡처되었습니다. (CEP17(스펙트럼 녹색), CEP18(스펙트럼 주황색) 및 핵(DAPI)).
X 라인 대물렌즈의 폭넓은 색 보정 범위(400–1000nm)로 녹색 및 빨간색 신호가 핵 내에서 정확히 나타납니다. 기존 대물렌즈로 촬영된 이미지에서 세포 핵의 하단에 위치한 신호는 바깥에 보이게 됩니다.
3. 뛰어난 이미지 품질을 위한 개구수 향상.
대물렌즈의 개구수는 빛 수집 능력을 정의하고 이미지 해상도를 결정합니다. 기본적으로, 대물렌즈의 개구수가 높을수록 더 높은 해상도와 더 밝은 이미지가 포착될 수 있으므로 샘플의 더 많은 부분을 볼 수 있습니다.
이와 대조적으로 배율이 높지만 개구수가 낮은 대물렌즈의 경우 샘플 세부를 보는 능력이 제한되어 중요한 정보를 간과할 위험이 높아집니다.
Olympus의 X 라인 대물렌즈는 최대 1.45의 높은 개구수를 제공하여 정량적 분석을 위한 뛰어난 이미지 품질을 보증합니다. 개구수가 향상되면 형광 관찰 시 어두운 신호 검출 또는 형광 라이브 셀 이미징 실험 중 광독성/광퇴색 최소화 등 많은 용도로 사용될 수 있습니다.
아래 실험에서 개구수가 더 높은 Olympus의 X 라인 대물렌즈가 밝기를 향상시키는 방법을 확인해보세요.
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기존 대물렌즈(좌측, NA 0.75) 대 X 라인 대물렌즈(우측, NA 0.8) 간 이미지 해상도 비교.
이 NG108-15 세포의 광시야 형광 이미지는 기존 및 X 라인 20x 건식 대물렌즈를 사용하여 캡처되었습니다. (파란색: 핵, 녹색: 미소관, 빨간색: 액틴 필라멘트.)
이미지 비교에서 볼 수 있듯이 개구수가 향상된 X 라인 대물렌즈가 더 많은 빛을 캡처하고 더 밝은 이미지를 야기하였습니다.
우수한 대물렌즈가 효율적 실험을 가능하게 합니다
기존 대물렌즈는 개구수, 이미지 평탄도 또는 색 보정 등 세 가지 중요한 장점 간의 상쇄를 종종 요구합니다. 대물렌즈를 바꿔서 한 곳이 향상되면 이로 인해 다른 곳이 손상될 수 있습니다.
Olympus의 X 라인 고성능 시리즈는 한 대물렌즈에 세 가지 모든 장점을 얻을 수 있도록 초박 렌즈로 제조되어 보다 효율적인 실험을 가능하게 합니다. X 라인 시리즈에 대해 자세히 알아보고 용도에 맞는 대물렌즈를 찾으십시오.
* 비록 헬라 세포가 의료 연구에서 가장 중요한 세포주가 되었다고 해도, 과학에 대한 Henrietta Lacks의 공헌이 동의를 받지 않은 것이었다는 것을 인정해야만 합니다. 이로 인해 면역학, 전염병, 암에 대한 중요한 발견이 이루어졌지만 사생활, 윤리, 의학적 동의에 대한 중요한 논의도 촉발되었습니다.
Henrietta Lacks의 삶과 현대 의학에 대한 그녀의 공헌을 알아보려면 여기를 클릭하세요.
http://henriettalacksfoundation.org/
