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Vue d’ensemble
 | Voir plus de détails en profondeurConçu pour l’imagerie profonde dans des échantillons biologiques, le microscope multiphotonique FVMPE-RS permet d’observer le fonctionnement et l’interaction des cellules dans les tissus vivants. This product has been discontinued, check out our current product |
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Imagerie multiphotonique profonde à haute sensibilité et à haute résolutionLe microscope multiphotonique FVMPE-RS utilise une technologie et un design optique avancés pour améliorer la sensibilité et la résolution en imagerie profonde.
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Image reconstruite en 3D d’un cerveau de souris in vivo (souris Thy1-YFP-H, cortex sensoriel) acquise à l’aide d’un objectif TruResolution avec une fonction de réglage automatique (gauche) et des images de projection maximales acquises à une profondeur d’environ 600 μm. Images acquises sans (en haut à droite ) et avec (en bas à droite) la fonction de réglage automatique. Les images ont été acquises au Centre de collaboration RIKEN BSI-Olympus et reproduites avec l’aimable autorisation des Drs Hiromu Monai, Hajime Hirase et Atsushi Miyawaki. |
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Flux sanguin d’embryon de poisson-zèbre.
| Imagerie à haute vitesse pour les processus cellulaires dynamiques et rapidesLe balayage à résonance à haute vitesse et le balayage linéaire à haute résolution sont fournis de série.
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Excitation multi-longueur d’onde pour une couverture spectrale plus largeLa plateforme d’imagerie FVMPE-RS prend en charge un laser pulsé infrarouge à double longueur d’onde ou deux lasers infrarouges réglables et indépendants pour l’imagerie d’excitation multicanal et multiphotonique.
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Imagerie par génération de troisième harmonique du tissu adipeux porcin. Le tissu adipeux porcin non marqué a été irradié avec un laser femtoseconde à 1250 nm, le deuxième harmonique est détecté dans les fibres de collagène à 625 nm et le troisième harmonique dans les interfaces lipidiques à 416 nm. |
| Fonctions en option pour les applications avancéesLe microscope multiphotonique FVMPE-RS est une plateforme modulaire qui vous permet de mettre facilement votre système à niveau en fonction de l’évolution des besoins de vos travaux de recherche. Les options suivantes sont offertes :
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Logiciel intuitif optimisé pour l’observation multiphotoniqueLa disposition d’interface personnalisable du logiciel vous offre plus de flexibilité pour accroître votre efficacité :
L’analyse et le traitement d’images en ligne, y compris le démixage spectral et le rendu 3D, sont fournis de série. |
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3 options de monture du microscope |
Système de microscope droit – Pour la microscopie multiphotonique in vivo et in vitroLe grand dégagement de la platine et la longue course de mise au point de la monture droite standard conviennent à une large gamme d’échantillons, des coupes de tissus aux souris vivantes et autres petits animaux vivants. |
Système de microscope à portique — Pour les observations in vivo nécessitant plus d’espaceLe dégagement d’une hauteur de 355 mm entre l’objectif et la plaque de fixation facilite les observations in vivo qui nécessitent un appareil de grande taille, comme l’imagerie comportementale chez des souris éveillées. |
Système de microscope inversé — Pour l’observation in vitro de cultures cellulaires 3D (sphéroïdes) et tissulairesLa monture inversée fournit une plateforme stable pour l’imagerie par intermittence d’échantillons vivants épais, en particulier les cultures de tissus et les cultures de cellules 3D sphéroïdes et organoïdes. Cette configuration est également utile pour l’imagerie intravitale des organes et des tissus à travers une fenêtre corporelle chez un petit animal. |
Technologies appliquées
  | Imagerie précise et conviviale avec alignement du laser automatiséDans les systèmes classiques, la dérive du laser causée par le réglage de la longueur d’onde, la fluctuation de la température et d’autres sources de déplacement de la cavité, peut engendrer un mauvais alignement du faisceau d’excitation. Le microscope multiphotonique FVMPE-RS maintient un alignement laser à 4 axes précis du faisceau d’excitation dans le scanner, même en cas de dérive du laser, ce qui simplifie l’entretien du système. La position et l’angle du faisceau sont automatiquement ajustés pour assurer une plus grande puissance du laser et un enregistrement des pixels uniforme. Si votre système possède deux lignes de laser d’excitation, cette caractéristique maintient le coalignement entre les faisceaux, ce qui permet d’éliminer les erreurs de coenregistrement entre les canaux. |
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Balayage à haute vitesse allant jusqu’à 438 images par secondeLe scanner à résonance rapide et le scanner galvanométrique linéaire fournissent une imagerie à haute vitesse et à haute résolution dans un seul système. Grâce à des vitesses de capture allant jusqu’à 438 ips à une résolution de 512 × 32 pixels, ou jusqu’à 30 ips à une résolution de 512 × 512 pixels, sur tout le champ de vision (FN 18), vous pouvez :
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| Transmission efficace du laserLes miroirs à revêtement en argent du scanner permettent de fournir plus de puissance laser à votre échantillon afin que vous obteniez des images plus lumineuses. Une réflectance accrue dans la gamme du proche infrarouge par rapport aux miroirs conventionnels à revêtement en aluminium est particulièrement avantageuse pour les expériences profondes in vivo. |
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Options de détection maximisant les performances d’imagerie par fluorescenceObtenez des images à rapport signal sur bruit élevé à partir d’une faible fluorescence grâce à des détecteurs à tube photomultiplicateur à haute sensibilité au phospho-arséniure de gallium (GaAsP). Ils offrent un rendement quantique plus élevé que les tubes photomultiplicateurs multialcalins (MA) standards et ont une fonction de refroidissement sans ventilateur qui améliore davantage le rapport signal sur bruit. Si vous travaillez avec des échantillons ayant une forte émission lumineuse, vous pouvez combiner le rapport signal sur bruit élevé du détecteur GaAsP avec la gamme dynamique plus large du détecteur MA. Pour une plus grande efficacité lumineuse, le trajet de détection non descannée du système comprend des composants optiques de grande surface pour mieux capturer les photons de fluorescence diffusés et tirer pleinement parti de la grande capacité de collecte de nos objectifs multiphotoniques. |
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Objectifs d’imagerie à excitation multiphotonique conçus pour l’imagerie profonde
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Maximisation du signal avec le mode de focalisation profondeLe mode de focalisation profonde ajuste le diamètre du faisceau laser en fonction des conditions de diffusion de la lumière laser. Pour les échantillons in vivo avec une forte diffusion de la lumière laser, le faisceau est rétréci pour qu’un plus grand nombre de photons d’excitation pénètrent plus profondément dans votre échantillon, afin de produire des images plus lumineuses. |
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| Contrôle indépendant de la photostimulationPour des expériences précises de photostimulation et de photoblanchiment de l’ordre de la microseconde, ajoutez :
Des régions d’intérêt de stimulation arbitraire peuvent être définies indépendamment d’une région d’intérêt pour l’imagerie. Une stimulation séquentielle multipoint à accès aléatoire est également possible lorsqu’une vitesse supérieure est requise. Sur les systèmes avec deux lignes d’imagerie infrarouge, le scanner SIM permet une stimulation et une imagerie multiphotoniques simultanées. |
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Synchronisation en microsecondes pour l’électrophysiologie et l’optogénétiqueUn séquenceur matériel fournit une synchronisation de précision en microsecondes pour la stimulation et pour le déclenchement d’événements. La stimulation peut être synchronisée spatialement et temporellement avec le balayage d’imagerie, ce qui facilite la saisie de la dynamique des réponses rapides à des emplacements précis. Pour l’électrophysiologie et l’optogénétique, cela peut permettre de distinguer une réponse à un stimulus synchrone d’une réponse à un stimulus asynchrone. Pour les acquisitions d’une durée de deux semaines ou plus ou pour les expériences avec des procédures complexes qui nécessitent de basculer entre les tâches d’imagerie, le module logiciel du gestionnaire de séquence maintient une précision de l’ordre de la milliseconde, ce qui permet de générer des données de haute qualité lors des expériences in vivo et in vitro astreignantes. En savoir plus sur l’imagerie multidimensionnelle et multizone par intermittence |
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Solutions
Synchronisation des données électrophysiologiques et de la stimulation par lumière laser avec l’unité analogiqueDes entrées analogiques ainsi qu’une entrée et une sortie TTL numériques sont disponibles pour prendre en charge les expériences d’électrophysiologie. L’unité d’entrée analogique enregistre les signaux de tension externes sous forme de données d’image. Les signaux électriques stimulés par la lumière et mesurés avec des « patch clamps » peuvent être synchronisés avec la capture d’image et affichés sous forme de superposition d’intensités de pseudo-couleurs. En savoir plus sur l’unité analogique Le logiciel avancé de cartographie multipoint (MMASW) permet une stimulation lumineuse précise de plusieurs points sélectionnés arbitrairement ou de points dans une région d’intérêt rectangulaire pour les balayages cartographiques. Il peut enregistrer simultanément des signaux de tension électrique provenant du système de « patch clamp ».
En savoir plus sur le module logiciel multipoint ou cartographique |
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* Contrôle multicolore du laser point par point pris en charge à l’aide d’un scanner SIM et plusieurs lasers pour des expériences combinant de la ChR2 et de la NpHR. |
| Création de cartes de réaction à une stimulation 3DLes balayages cartographiques spécialisés utilisent une séquence pseudo-aléatoire pour générer des cartes de réaction spatiale plus précises lors de la mesure de la réponse électrophysiologique à une stimulation optique. Les enregistrements de signaux électriques directs par « patch clamps » et les signaux de fluorescence des indicateurs de calcium ou de tension peuvent être superposés sur une image à haute résolution. Les seuils d’intensité peuvent être utilisés pour définir un balayage multipoint à haute vitesse des régions les plus actives. Cela peut être étendu aux cartes de réaction 3D avec un entraînement en Z piézoélectrique en option. |
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Combinaison d’un champ de vision large avec une haute résolutionVisualisez l’intégralité de votre échantillon en haute résolution et dans un contexte plus large avec la fonction de prise d’images par intermittence multizones (MATL) :
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Données d’images offertes par Urs Ziegler et Jose Maria Mateos, Center for Microscospy and Image Analysis, Université de Zurich. Lignée de souris L15 aimablement fournie par Pico Caroni, FMI, Bâle. |
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Logiciel
Contrôle précis de vos expériencesLe gestionnaire de séquence facilite la coordination des expériences. Vous pouvez facilement organiser et accélérer les protocoles complexes avec une synchronisation précise, notamment :
Vous pouvez enregistrer et recharger des protocoles pour profiter d’une répétabilité des expériences. |
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Séparation des canaux se chevauchant grâce à la déconvolution spectraleLes spectres de fluorescence qui se chevauchent étroitement peuvent compliquer les études biologiques qui examinent simultanément plusieurs marqueurs. Désormais, les canaux spectraux qui se chevauchent peuvent être séparés grâce à la déconvolution spectrale basée sur un algorithme de démixage aveugle ou des profils multicanaux précédemment enregistrés. La diaphonie entre les canaux peut même être éliminée au cours de l’acquisition des images grâce au traitement en temps réel. |
Mode normal
Le chevauchement spectral de la fluorescence rouge et verte provoque une diaphonie entre les canaux pendant l’acquisition normale. | Mode de démixage en temps réel
Le mode de démixage en temps réel applique la déconvolution spectrale lors de l’acquisition des images pour mieux séparer les différents fluorophores. |
Rendu 3DDe grandes quantités de données sur l’empilement selon l’axe Z peuvent être représentées dans un affichage 3D. Les vues importantes peuvent être enregistrées en tant qu’images clés, ce qui facilite la création de vues animées d’images 3D qui zooment et passent sous différents angles de caméra. |
Empilement 3D de 4 mm de vaisseaux sanguins marqués au Texas Red dans le cerveau d’une souris
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(À gauche) Données brutes de 30 ips acquises avec un laser de faible puissance (0,05 %, 488 nm).
| Traitement par moyenne mobileLe balayage haute vitesse avec un laser de faible puissance pour éviter tout problème de phototoxicité a pour inconvénient de réduire le rapport signal sur bruit. Grâce au post-traitement par moyenne mobile, vous avez la possibilité d’ajuster des images par intermittence à grande vitesse tout en conservant l’échelle de temps et les données d’origine. |
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Observations macroscopiques et microscopiquesL’utilisation d’un objectif à grande ouverture numérique, d’une platine motorisée et du logiciel Olympus permet l’imagerie en mosaïque :
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| Compensation profondeur-luminositéLors de l’observation d’échantillons épais, les images peuvent s’assombrir à mesure que le point focal s’approfondit. Cependant, avec l’excellente compensation profondeur-luminosité sur l’axe Z, la sensibilité du détecteur et la puissance du laser sont continuellement ajustées pour maintenir une luminosité constante. Cette fonction vient compléter le travail des objectifs dynamiques TruResolution, lesquels ajustent également automatiquement la compensation d’aberration sphérique en fonction de la profondeur. |
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Fonctions d’analyse étenduesLe logiciel de la plateforme d’imagerie FVMPE-RS est intégré au logiciel d’analyse d’images cellSens d’Olympus, étendant ainsi les capacités analytiques du système. Les fonctions offertes en option incluent :
Le logiciel d’analyse 3D NoviSight est également disponible. En savoir plus sur le logiciel d’imagerie cellSens |
Caractéristiques techniques
FLUOVIEW FVMPE-RS |
| Système à un laser | Système à doubles lignes | Système à lasers jumelés | ||
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| Unité | Lasers pulsés IR qualifiés avec fluctuation de longueur d’onde négative pour l’excitation multiphotonique | Produits Spectra-Physics : MAITAI HPDS-OL : de 690 nm à 1040 nm MAITAI eHPDS-OL : de 690 nm à 1040 nm INSIGHT X3-OL : de 690 nm à 1 300 nm INSIGHT X3 DUAL/DUALC-OL : de 680 nm à 1300 nm + 1045 nm Produits Coherent : Chameleon Vision I Olympus : de 680 nm à 1080 nm Chameleon Vision II Olympus : de 680 nm à 1080 nm Chameleon Vision S Olympus : de 690 nm à 1050 nm | ||
| Laser pulsé IR principal |
MAITAI HPDS-OL
MAITAI eHPDS-OL INSIGHT X3-OL Chameleon Vision I Olympus Chameleon Vision II Olympus Chameleon Vision S Olympus |
INSIGHT X3 DUAL-OL
INSIGHT X3 DUALC-OL |
MAITAI HPDS-OL
MAITAI eHPDS-OL INSIGHT X3-OL Chameleon Vision I Olympus Chameleon Vision II Olympus Chameleon Vision S Olympus | |
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Ligne laser IR supplémentaire :
utilisation comme deuxième ligne/laser d’imagerie ou pour une stimulation simultanée (scanner SIM en option) | – |
Ligne fixe à 1045 nm
de l’INSIGHT X3 DUAL/DUALC-OL |
MAITAI HPDS-OL
MAITAI eHPDS-OL Chameleon Vision I Olympus Chameleon Vision II Olympus Chameleon Vision S Olympus | |
| Composant optique automatique de démarrage |
Composant optique de démarrage avec atténuation AOM
(de 0 à 100 %, incréments de 0,1 %) Comprenant un extenseur de faisceau entièrement automatisé, un décaleur XY et un alignement d’angle sur deux axes. (Composants optiques à alignement automatique quadriligne sur 4 axes) Couplage direct au port du laser de l’unité de balayage. |
Composant optique de démarrage avec 2 ensembles d’atténuation AOM (de 0 à 100 %, incréments de 0,1 %)
Comprenant un extenseur de faisceau entièrement automatisé, un décaleur XY et un alignement d’angle sur 2 axes. (Composants optiques à alignement automatique quadriligne sur 4 axes) Couplage direct au port du laser de l’unité de balayage. | ||
| Composant optique combiné au laser IR | – | Commutateur de trajectoire optique motorisé avec DM900, DM1000R, DM1100 pour combiner deux longueurs d’onde IR pour l’imagerie | ||
| Laser à lumière visible en option pour la stimulation | Source laser de 405 nm/50 mW, 458 nm/20 mW, 588 nm/20 mW avec atténuation AOTF. De 0 à 100 %, incréments de 0,1 %, temps de montée < 2 μs | |||
| Unité de balayage | Méthode de balayage | Déflexion de lumière oar 2 miroirs de balayage galvanométrique à revêtement en argent, ou un miroir de balayage à résonance à revêtement en argent | ||
| Vitesse de balayage |
Scanner galvanométrique (imagerie normale) : 512 × 512 pixels, de 1,1 s à 264 s, durée de pixel : de 2 μs à 1000 μs
Scanner à résonance (imagerie à haute vitesse) : 30 ips à 512 × 512 pixels, 438 ips à 512 × 32 pixels | |||
| Mode de balayage | XY, XYZ, XYT, XYZT, ligne libre, XZ, XT, XZT, PointT | |||
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Scanner galvanométrique
(imagerie normale) |
Balayage de la région d’intérêt par scanner galvanométrique : rectangle, ellipse, polygone, zone libre, ligne, ligne libre et point
Zoom : de 1,0x à 50,0x avec incréments de 0,01x, compatible avec la rotation et le panoramique de 0° à 360° Nombre de champs de balayage : 18 Taille de l’image : de 64 × 64 à 4096 × 4096 | |||
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Scanner à résonance
(imagerie à haute vitesse) |
Balayage de la région d’intérêt par scanner à résonance : rectangle, ligne
Zoom : de 1,0x à 8,0x avec incréments de 0,01x Nombre de champs de balayage : 18 Taille de l’image : 512 × 512 | |||
| Revêtement optique | Optique de support IR avec revêtement 1600 | |||
| Détecteurs d’imagerie à excitation multiphotonique non descannés |
Détection réfléchie : configuration à 2 ou 4 canaux : configuration à 2 tubes photomultiplicateurs, configuration à 4 tubes photomultiplicateurs ou 2 tubes photomultiplicateurs + 2 tubes photomultiplicateurs à haute sensibilité au GaAsP refroidis.
Détection transmise : unité à 2 tubes photomultiplicateurs avec condenseur NA élevé | |||
| Détecteur de lumière transmise | Module avec détecteur photomultiplicateur externe intégré de lumière transmise et lampe halogène de 100 W, commutation motorisée, adaptateur pour fibre optique sur le statif du microscope | |||
| Motorisation en Z |
Module de mise au point motorisé intégré au microscope, incréments minimaux de 0,01 μm
En option : tourelle porte-objectifs piézoélectrique très rigide*1 | |||
| Scanner de stimulation simultanée en option |
Scanner de stimulation simultanée hautement synchronisée, comprenant un ensemble de scanner galvanométrique, VIS et port laser IR.
Balayage de la région d’intérêt : rectangle, ellipse, polygone, tornade, zone libre, ligne, ligne libre et point. | |||
| Boîte d’entrée/sortie analogique et numérique en option | Entrée de signal analogique à 4 canaux, entrée de déclenchement TTL numérique à 6 canaux, sortie de déclenchement TTL numérique à 5 canaux. Sortie de synchronisation du scanner | |||
| Environnement de fonctionnement | Température ambiante : de 20 °C à 25 °C, humidité : 75 % ou moins à 25 °C, nécessite une alimentation continue (24 heures) | |||
| Taille de la table anti-vibration |
1500 × 1650* mm
* 1800 mm avec système de microscope inversé |
1500 × 1650* mm
* 1800 mm avec système de microscope inversé | 1500 × 2000 mm | |
| Logiciel | Caractéristiques de base |
Chambre sombre assortie à la conception de l’interface graphique. Disposition d’écran configurable par l’utilisateur.
Fonctions de rechargement des paramètres d’acquisition. Capacité d’enregistrement sur disque dur, puissance laser réglable et HV avec acquisition par empilement selon l’axe Z. Empilement selon l’axe Z avec mélange alpha, projection à intensité maximale, rendu de surface iso. | ||
| Contrôle du laser IR | Contrôle de longueur d’onde IR du laser entièrement intégré et mode de focalisation profonde | |||
| Logiciel pour platine motorisée en option |
Contrôle de platine motorisée XY. Acquisition d’images cartographiques pour une localisation facile des cibles. Acquisition de mosaïques et assemblage d’images logicielles.
Définition de plusieurs zones pour la prise d’images par intermittence. | |||
| Logiciel de cartographie et de stimulation multipoint en option |
Logiciel de stimulation multipoint et d’acquisition de données. Cartographie de la stimulation multipoint pour générer une carte de réaction.
Fonction de filtrage pour sélectionner des points. Stimulation multipoint. Stimulation unique ou répétée. Sélection de longueur d’onde de stimulation indépendante pour chaque point. | |||
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Gestionnaire de séquence
en option |
Logiciel programmable avancé pour la définition de plusieurs tâches d’imagerie/stimulation et l’exécution par séquenceur matériel.
Écart minimal de 100 ms entre les tâches. | |||
| Logiciel de compensation automatique en option |
Logiciel de compensation d’aberration sphérique automatique.
Contrôle des lentilles d’objectif avec la fonction de compensation d’aberration sphérique automatique. Réglage automatique de la bague de correction motorisée pour trouver la meilleure position à une certaine profondeur d’observation. Réglage automatique de la bague de correction avec déplacement sur l’axe Z. | |||
*1 Non disponible dans certaines régions. |
Objectifs TruResolution |
| FV30-AC10SV | FV30-AC25W | |
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| Grossissements | 10 | 25 |
| Ouverture numérique | 0,6 | 1,05 |
| Distance de travail | 8 mm | 2 mm |
| Épaisseur de la lamelle couvre-objet | De 0 mm à 0,23 mm | De 0 mm à 0,23 mm |
| Liquide d’immersion | SCALEVIEW-A2 (eau, huile de silicone et huile normale disponibles) | Eau |
| Fonctions spéciales | Compensation automatique, optimisée pour l’imagerie multiphotonique | Compensation automatique, optimisée pour l’imagerie multiphotonique |
| Dimensions (L × P × H) |
56 × 106,5 × 95 mm
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56 × 106,5 × 101 mm
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| Poids | Environ 1 kg | Environ 1 kg |
