Les objectifs jouent un rôle essentiel dans votre système de microscope, car ils contribuent à établir la qualité de l’image. La réalité est que de nombreux objectifs classiques introduisent des problèmes d’imagerie qui peuvent compromettre les performances de votre microscope.

Heureusement, la technologie optique continue de progresser et de corriger les erreurs d’imagerie courantes. L’article de blogue d’aujourd’hui explore trois avantages liés à l’utilisation des objectifs X Line^™ hautes performances d’Olympus pour obtenir des données d’imagerie de haute qualité.

1. Une planéité étendue pour une qualité uniforme.

Avec les objectifs classiques, il est parfois difficile d’obtenir des images uniformément planes dans un grand champ de vision. Une mauvaise planéité de l’image peut causer une perte de luminosité ou de netteté au niveau du pourtour de l’image, réduire la qualité de l’image et rendre difficile l’analyse ou la mesure des échantillons.

Comment nos objectifs X Line peuvent-ils vous aider? Nos objectifs assurent une planéité exceptionnelle de l’image du centre jusqu’au pourtour dans les observations de grand champ de vision. La qualité d’image uniformément élevée sur tout le champ de vision vous permet de créer des images assemblées avec précision de grands échantillons, tels que des coupes de tissus entiers. Vous pouvez également être assuré de disposer de données d’image fiables pour les analyses quantitatives.

Prenons un exemple :

Ces images 12 × 12 d’une coupe de cerveau de souris Fucci2 Tg ont été capturées avec le microscope confocal FV3000 avec des objectifs à immersion dans l’huile classiques et X Line 60x (ON de 1,42). (Cyan : DAPI [405 nm].)

Comme vous pouvez le constater, la planéité améliorée de l’objectif X Line offre une image en mosaïque plus uniforme sur un grand champ de vision.

(Images reproduites avec l’aimable autorisation de Takako Kogure et Atsushi Miyawaki du Laboratory for Cell Function Dynamics, RIKEN Center for Brain Science.)

2. Une correction chromatique améliorée pour une reproductivité chromatique exceptionnelle.

L’aberration chromatique est souvent un problème en optique. Elle se produit lorsqu’un objectif ne parvient pas à focaliser différentes couleurs au même endroit. La lentille agit essentiellement comme un prisme : les couleurs qui traversent la lentille se dispersent selon différents angles. À moins d’être corrigées, les images de microscope sembleront déformées avec des franges colorées sur les bords. Malgré cela, de nombreuses lentilles classiques offrent une correction chromatique insuffisante.

Nos objectifs X Line assurent une large correction de l’aberration chromatique de 400 à 1 000 nm. Il en résulte une bien meilleure reproductivité chromatique lors de l’imagerie en fond clair et en fluorescence multicolore. La reproduction fidèle des couleurs améliore également la fiabilité des images, de sorte que vous pouvez avoir confiance en vos données.

Constatez par vous-même la différence dans les images suivantes.

Ces images d’une cellule HeLa marquée à l’aide la technique FISH ont été capturées avec le microscope confocal FV3000 avec des objectifs à immersion dans l’huile classiques et X Line 60x (ON de 1,42). (CEP17 [spectre vert], CEP18 [spectre orange] et le noyau [DAPI]).

Avec la large plage de correction chromatique de l’objectif X Line de 400 à 1 000 nm, les signaux verts et rouges sont correctement localisés dans le noyau. Sur l’image prise avec des objectifs classiques, les signaux situés au bas du noyau cellulaire apparaissent en dehors du noyau.

3. Une ouverture numérique améliorée pour une excellente qualité d’image.

L’ouverture numérique d’un objectif définit sa capacité à capter la lumière et détermine la résolution de l’image. Un objectif avec une plus grande ouverture numérique peut capturer des images de résolution plus élevée et plus lumineuses pour vous permettre de voir davantage de caractéristiques de votre échantillon.

En revanche, un objectif à fort grossissement, mais à faible ouverture numérique, limitera votre capacité à voir les détails des échantillons et augmentera le risque de passer à côté d’informations importantes.

Nos objectifs X Line offrent une plus grande ouverture numérique jusqu’à 1,45 pour garantir une excellente qualité d’image pour l’analyse quantitative. Une ouverture numérique améliorée peut s’avérer extrêmement utile dans de nombreuses applications, telles que la détection de signaux faibles pendant l’observation en fluorescence ou la minimisation de la phototoxicité ou du photoblanchiment pendant les expériences d’imagerie en fluorescence de cellules vivantes.

Dans l’exemple ci-dessous, vous pouvez voir comment la plus grande ouverture de nos objectifs X Line améliore la luminosité.

Ces images de fluorescence à grand champ de cellules NG108-15 ont été capturées à l’aide d’objectifs à secs classiques et X Line 20x. (Bleu : noyau; vert : microtubules; rouge : filaments d’actine.)

Comme vous pouvez le constater dans la comparaison des images, l’ouverture numérique améliorée de l’objectif X Line a permis de capturer plus de lumière et de produire une image plus lumineuse.

L’efficacité de vos expériences dépend de l’excellence de vos objectifs

Les objectifs classiques vous obligent souvent à trouver un compromis entre trois avantages importants : l’ouverture numérique, la planéité de l’image et la correction chromatique. Si vous changez d’objectif pour améliorer l’un de ces facteurs, vous risquez d’en compromettre un autre.

Les objectifs haute performance de la gamme Olympus X Line sont fabriqués avec des lentilles ultraminces pour vous aider à obtenir les trois avantages avec un seul objectif et ainsi renforcer l’efficacité de vos expériences. En savoir plus sur la gamme X Line pour trouver les objectifs appropriés à votre application.

* Bien que la lignée cellulaire HeLa soit devenue l’une des plus importantes dans la recherche médicale, nous devons absolument reconnaître que la contribution de Henrietta Lacks à la science s’est produite sans son consentement. Cette injustice, bien qu’elle ait mené à des découvertes clés en immunologie, en maladies infectieuses et en cancer, a également suscité d’importantes conversations sur la confidentialité, l’éthique et le consentement en médecine.
Pour en savoir plus sur la vie de Henrietta Lacks et sur sa contribution à la médecine moderne, cliquez ici.
http://henriettalacksfoundation.org/
 

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