Ce webinaire vous présente la microscopie à feuillet de lumière. Capable de réaliser des coupes optiques très fines et équipé de composants optiques Olympus de haute qualité, le microscope à feuillet de lumière Alpha3 a été conçu pour l’imagerie 3D haute résolution d’échantillons biologiques vivants ou fixés. Le système de microscopie Alpha3 intègre des technologies de pointe pour produire une qualité d’image sans précédent à une résolution subcellulaire améliorée. Dans ce webinaire, vous découvrirez un système à feuillet de lumière très polyvalent et modulaire conçu pour la recherche de routine ou haut de gamme, de la macro à la micro-imagerie d’organes entiers aux très petits spécimens.
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FAQFAQ du webinaire | Approfondir la connaissance du vivant avec la microscopie à feuillets de lumièreQuelle est la résolution maximale du système Alpha3 dans le plan x-y et le long de l’axe z ?La résolution maximale dans le plan x-y est donnée par la longueur physique des pixels de la caméra divisée par le grossissement de l’objectif. Par exemple, à 40X, la résolution maximale est de 6,5 µm/40 = 0,16 µm. En microscopie à feuillet de lumière, la résolution maximale le long de l’axe z est limitée par la largeur du feuillet de lumière éclairante ; le feuillet de lumière le plus fin possible dans le système Alpha3 est de 2 µm. Pour les grossissements supérieurs à 10X, chaque micron de l’échantillon peut être scanné. L’échantillonnage de Nyquist limite alors la résolution maximale dans le plan z à deux fois cette valeur, soit 2 µm. Quels types de lasers sont utilisés en microscopie à feuillet lumineux, et quelle est leur puissance moyenne ?Nous pouvons intégrer de quatre à six lignes laser dans les combinateurs. Il s’agit principalement de diodes laser, à l’exception de la ligne 561, qui est un DPS nécessitant un modulateur pour régler la puissance. La puissance moyenne est généralement comprise entre 50 et 100 mW. Le système Alpha3 peut-il être configuré avec deux caméras ?Bien que ce soit envisageable, la plupart des configurations à une seule caméra sont assez polyvalentes. Le système Alpha3 peut-il faire de l’imagerie multicolore ?Le système Alpha3 propose deux méthodes d’imagerie multicolore. La première consiste à balayer la même région de l’échantillon plusieurs fois ainsi qu’à changer le laser et le filtre d’émission à chaque balayage. La seconde est le « mode clignotant », lequel utilise un filtre de rejet après l’objectif pour laisser passer l’ensemble du spectre à large bande tout en bloquant les lignes laser. De cette façon, nous pouvons balayer l’échantillon une seule fois tout en faisant clignoter chaque laser pour chaque couche. Cette méthode est plus rapide et permet une bien meilleure colocalisation dans les échantillons vivants. Les lasers IR peuvent-ils être intégrés au système Alpha3 pour la microscopie multiphotonique à feuillet de lumière ?Actuellement, la plus grande longueur d’onde du spectre visible disponible est de 730 nm, mais nous explorons actuellement le potentiel des applications multiphoton. Les algorithmes de déconvolution conventionnels peuvent-ils être utilisés sur les données générées par le système Alpha3 ?Oui, la déconvolution peut être effectuée sur les données générées, et cette analyse a déjà été effectuée par Olympus. Les images prises par le système Alpha3 peuvent-elles être exportées dans une plateforme open source à des fins de déconvolution ?Le logiciel inclus dans le système Alpha3 génère des images qui peuvent être ouvertes par n’importe quel logiciel open source. Cependant, le système utilisé pour le traitement des images doit être capable de charger et de traiter de grands ensembles de données de 300 à 800 Go. Existe-t-il des exigences particulières pour le traitement des données ou le stockage d’images en microscopie à feuillet de lumière ?Bien que le système Alpha3 soit fourni avec un ordinateur doté d’une mémoire suffisante pour traiter de larges ensembles de données, nous recommandons de les placer sur un serveur pour le stockage à long terme. Il est également préférable de télécharger les données sur un serveur aussi rapidement que possible après acquisition. Quelle est la vitesse d’acquisition la plus rapide possible au moyen du balayage optique focalisé ?Le balayage optique focalisé ralentit la vitesse d’acquisition d’un facteur 4. Par exemple, pour un temps d’exposition de 10 ms, vous pouvez avoir un temps d’image de 40 ms, ce qui donne 20 images/seconde. La stérilisation des porte-échantillons et des pinces présente-t-elle des difficultés ?Toutes les pièces sont fabriquées en acier inoxydable de qualité médicale et sont inertes et résistantes aux produits chimiques ainsi qu’à la corrosion. Elles peuvent être stérilisées à l’autoclave ou immergées dans de l’éthanol pur. Quelle caméra est incluse dans le système Alpha3 ?Le système est livré avec la caméra numérique CMOS ORCA-flash 4.0. Cette dernière est équipée d’un capteur de 2048 × 2048 à pixels de 6,5 µm. Le système Alpha3 est-il livré avec une carte réseau rapide de transfert de données ?Nous proposons des options de transfert de données à 1, 10 et 100 GHz, mais pouvons également répondre aux demandes personnalisées. |
