Un nivel superior para el ámbito de super resolución

Super resolución de Olympus

La tecnología de super resolución de Olympus es rápida, fácil de usar y brinda imágenes a partir de 100 micrómetros de profundidad dentro de una célula, en áreas que son difíciles de acceder usando otros modos de super resolución. Las imágenes de células vivas con super resolución en estructuras celulares internas pueden ser capturadas con una resolución de hasta 120 nm en toda clase de muestra mediante el uso de tinciones fluorescentes convencionales.

(Hayashi S. Resolution doubling using confocal microscopy via analogy with structured illumination microscopy [Duplicación de resolución usando microscopía confocal mediante analogía con microscopía de iluminación estructurada]. Jpn J Appl Phys. 2016)

Imágenes nítidas con super resolución

El algoritmo de deconvolución de Olympus emplea imágenes con super resolución para crear imágenes 3D claras y nítidas.

Imágenes de células vivas con super resolución

El sistema IXplore SpinSR10 combina velocidad, fototoxicidad reducida y estabilidad durante los experimentos en intervalos para crear datos de imágenes 3D con super resolución que permiten a los usuarios observar cambios dinámicos y fenómenos entre células vivas.

Super resolución para muestras vivas

El sistema óptico confocal de disco giratorio adquiere imágenes hasta en 200 fotogramas por segundo, lo que permite capturar rápidas dinámicas intracelulares en muestras vivas.

Imagen de mitocondria obtenida en 30 fps 
Mitocondria marcada con GFP. La adquisición en 30 fps permite visualizar los movimientos individuales de la mitocondria. 
Datos de imagen por cortesía de: Kumiko Hayashi, Ph.D., Facultad de posgrados en Ingeniería, Universidad de Tohoku

Imágenes bicolor simultáneas

El sistema SpinSR10 puede usar dos cámaras simultáneamente para generar rápidamente imágenes de localización bicolor.

Huso mitótico en metafase celular^*. Células HeLa provenientes de cáncer cervical humano fijadas y teñidas respectivamente con α-tubulina (microtúbulos, rojo) y Hec1 (cinetocoro, verde). DNA teñido con DAPI (cromosomas, azul): 
Los cromosomas interactúan con los microtúbulos que constituyen el huso mitótico a través de cinetocoros dispuestos en la región centromérica de los cromosomas. 
Datos de imagen por cortesía de Masanori Ikeda y Kozo Tanaka, Departamento Oncológico Molecular, Instituto de Desarrollo, Envejecimiento y Cáncer, Universidad de Tohoku

Estereocilios y cinocilios de células ciliadas internas en órgano espiral (de Corti). [Actina: Naranja; Tubulina: Verde] 
Datos de imagen por cortesía de: Hatsuho Kanoh1, Toru Kamitani^1,2, Hirofumi Sakaguchi², Sachiko Tsukita^1
1 Facultad de posgrados en Biociencias fronterizas y Facultad de posgrados en Medicina, Universidad de Osaka 
² Facultad de Otorrinolaringología: cirugía de cabeza y cuello, Universidad de Medicina de la Prefectura de Kioto.

Fibras de estrés de células HeLa^*: 
Tinción de anticuerpo con Alexa Fluor 488 (verde) para actina y Alexa Fluor 568 (rojo) para cadena pesada de miosina. 
Imagen por cortesía de: Keiju Kamijo,Ph.D. División de Anatomía y Biología celular, Facultad de Medicina, Sector medical y farmacéutico de la Universidad de TOHOKU.

Tinción fluorescente de microtúbulos (rojo: Alexa Fluor 594) y actina (verde: Alexa Fluor 488) en cono de crecimiento neural de células NG108: 
Imagen por cortesía de: Dr.Kaoru Katoh, Instituto de Investigación biomedical, Instituto nacional de Ciencias y Tecnología industrial avanzada (AIST)

Índice mitótico de células epiteliales (cromosoma: azul; tubulina: verde; ZO1: rojo): 
Imagen por cortesía de: Hatsuho Kanoh, Tomoki Yano, Sachiko Tsukita 
Facultad de posgrados en Biociencias fronterizas y Facultad de posgrados en Medicina, Universidad de Osaka

Rápidas imágenes con super resolución y amplio campo de visión

En lugar de escanear el completo campo de visión mediante un solo haz, el sensor de adquisición de imagen sensible del sistema SpinSR10 captura imágenes instantáneas de una completa área de muestra en un paso para ofrecer imágenes rápidas, lo que facilita una observación de los fenómenos biológicos a alta velocidad.{{{{{ En el modo confocal y de amplio campo, el sistema óptico del microscopio tiene un número de campo (FN) de 18 para capturar imágenes con un campo de visión más extenso; pero, con dos cámaras, es posible adquirir simultáneamente imágenes bicolor con super resolución.

Super resolución en tiempo real^*

Los algoritmos de tratamiento de datos de alta velocidad permiten visualizar imágenes en vivo con super resolución en una pantalla. Esto permite visualizar en tiempo real las actividades celulares en comparación con otras técnicas de cálculo de super resolución en células vivas.

Proteínas EB3 vinculadas a la parte superior de los microtúbulos que se extienden en las células vivas HeLa: 
Proteínas EB3 con marcado GFP por transgénesis. 
Datos de imagen por cortesía de: Kaoru Kato, PhD., Instituto nacional de Ciencias industriales avanzadas e Instituto de Investigación biomédica

Fototoxicidad reducida

El controlador de tiempo real (U-RTCE) sincroniza el láser y la cámara con una precisión de iluminación en microsegundos para reducir el fotoblanqueo y fototoxicidad, ayudando a las células a permanecer sanas durante experimentos complejos.

Mantenga sus muestras focalizadas

Durante el tratamiento de imágenes en intervalos, el mínimo cambio en la temperatura, la humedad y los otros factores pueden causar el desenfoque de su muestra. El compensador de deriva Z (IX3-ZDC2) usa un láser infrarrojo de baja fototoxicidad para identificar el plano de la muestra y ajustar el enfoque para obtener imágenes claras en intervalos. La función de autoenfoque continuo emplea recipientes de vidrio y plástico.

Consulte la información acerca del producto IX3-ZDC2

Vea el interior de sus muestras con la super resolución

Observación en profundidad

Los usuarios pueden observar claramente estructuras individuales no solo en la superficie de la muestra sino, también, en una profundidad de hasta 100 micras en la muestra.

Células Purkinje marcadas con GFP: 
Imagen XYZ con imagen confocal y de super resolución en diferentes posiciones Z. Las imágenes con super resolución son proyectadas por Z (10 cortes). Imagen 3D mostrada por FV31S-DT. 
Datos de imagen por cortesía de: Michisuke Yuzaki, PhD.  
Departamento de fisiología, Facultad de medicina, Universidad de Keio.

Estructuras 3D en imágenes

Obtenga datos de imágenes 3D precisos con super resolución durante el tratamiento de imágenes en intervalos.

Imagen 3D en intervalos de neuronas: 
Imagen en intervalos de neurona primaria de ratón marcada con EGFP después de co-cultivo celular con astrocito para 2 semanas. Diferencia fácil de ver entre la espina inmadura (flecha amarilla) y espina madura (flecha azul) y detección del cambio morfológico en función del tiempo. 
Imagen 3D adquirida en tiempo de exposición de 500ms/fotogramas, en paso Z de 0,15 micrómetros para 41 cortes. Imágenes adquiridas cada 2 minutos durante 1 hora. Imagen 3D mostrada por FV31S-DT. 
Datos de imagen por cortesía de: Yuji Ikegaya, PhD. 
Laboratorio de Farmacología química, Facultad de posgrados en Ciencias farmacéuticas, Universidad de Tokio

Resolución en Z mejorada

Los objetivos de inmersión en silicona están diseñados para observaciones en profundidad dentro del tejido. La profundidad de la observación es afectada negativamente por la aberración esférica causada por la diferencia del índice de refracción. El índice de refracción del aceite de silicona (ne = 1,40) es cercano al de las células vivas o cortes de tejidos cultivados (ne = 1,38), lo que permite otorgar una super resolución a las imágenes de estructuras celulares internas en decenas de micrómetros de profundidad con una aberración esférica mínima.

Durante las observaciones de tejidos profundos, la calidad de la imagen depende de cuán cerca se mantiene el índice de refracción de la muestra al medio de inmersión. Al trabajar con un objetivo de inmersión en silicona, la diferencia entre el índice de refracción de las muestras y el aceite de silicona es mínima, lo cual genera imágenes con fluorescencia más brillante y una mejor relación entre sonido y ruido.

Aberración esférica reducida

La unidad del collar de corrección remoto es usada para ajustar fácilmente la posición de la lente dentro del objetivo con el fin de corregir la aberración esférica que pueda ser causada por la diferencia del índice de refracción. Esto mejora drásticamente la señal, resolución y contraste. La unidad IX3-RCC funciona con cualquier objetivo UIS2 que se dota de un collar de corrección.

Seccionamiento óptico

Basada en el sistema óptico confocal, la tecnología de super resolución de Olympus ejecuta un seccionamiento óptico para adquirir imágenes claras con super resolución para reducir distorsiones de fondo.

Un sistema flexible que ayuda a simplificar su investigación

El software de análisis de imágenes cellSens de Olympus soporta los experimentos complejos llevados a cabo con el sistema IXplore SpinSR10. Los eficientes flujos de trabajo del software permiten que los usuarios administren sus datos y efectúen análisis avanzados que ayudan a descubrir nuevos conocimientos. El sistema se integra fácilmente a protocolos existentes sin necesidad de efectuar mayores cambios; los laboratorios pueden continuar usando su protocolo de muestra existente y sistemas de marcado.

Alterne fácilmente entre los métodos de observación

El software facilita la alternación entre las condiciones de observación. Alterne entre los modos de imagen con fluorescencia confocal, super resolución e imágenes multicolores mediante un simple clic.

Administre experimentos complejos

El administrador de procesos facilita la adquisición de imágenes multicolores en intervalos, apiladas en Z. El administrador de experimentos gráfico programable (GEM) permite que los usuarios creen automatizaciones más complejas a partir de una interfaz visual para soportar una amplia variedad de protocolos de imagen experimentales y accionamiento de dispositivos. La personalización flexible de los protocolos experimentales puede ser modificada según sea necesario durante el tratamiento de imagen.

Realice ajustes de precisión

Con la función de super resolución, la capacidad para realizar ajustes de precisión de la platina es fundamental. La platina ultrasónica IX3-SSU de alta precisión es fácil de usar y controlar con el software o controlador de platina. La platina presenta una deriva térmica baja para la adquisición de imágenes múltiples reproducibles y estabilidad durante experimentos en intervalos prolongados.

Con la nueva estructura de su estativo y mecanismo de enfoque, el sistema IX3 ofrece más estabilidad, lo que reduce a su vez el efecto de las vibraciones y la temperatura. Mantiene las posiciones deseadas a lo largo de los ejes X, Y y Z para favorecer la precisión de las imágenes de múltiples puntos en intervalos. Además, al ser combinado con la platina ultrasónica IX3-SSU de Olympus y el compensador de deriva en Z (IX3-ZDC2), el sistema se adapta perfectamente a la captura de imágenes de múltiples puntos en intervalos con alta precisión sin revelar desenfoque o mala alineación.

Un sistema con tres modos de imagen

Los investigadores pueden usar el modo de imagen que mejor se adapte a su muestra usado un solo sistema. Los usuarios pueden alternar entre los modos de imagen multicolor de campo amplio, confocal y super resolución con un clic para ubicar áreas de interés y representar posteriormente estructuras finas.

Potentes e intuitivos análisis de imágenes

El software de tratamiento de imágenes cellSens de Olympus proporciona varios tipos de datos numéricos que pueden ser extraídos a partir de las imágenes capturadas usando las funciones de análisis de imágenes. Puede medirse la distancia lineal recta, la longitud de límite o el área de un polígono. Las siguientes mediciones avanzadas también pueden ser realizadas:

Análisis de información de objeto

Analice la información de los objetos en sus imágenes, como la cantidad de objetos, la medida de área, la luminosidad y la morfología.

Discriminación de superposiciones en espectro

La función de colocalización permite analizar el espectro de fluorescencia y discriminar las superposiciones dentro del espectro.

Seguimiento de los datos de imágenes en intervalos

Durante las imágenes en intervalos, la función de seguimiento permite a los usuarios medir y analizar la migración y división de células y, también, la luminosidad.