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Descripción
 | Tecnología de detección de vanguardiaEl detector SiLVIR combina dos tecnologías avanzadas: un fotomultiplicador de silicona (SiPM) y nuestro rápido método de procesamiento de señales patentado*. Gracias a nuestra innovadora tecnología de detección, como centro para los sistemas FV4000 y FV4000MPE, saque provecho de un nivel de ruido mucho más bajo, de una mayor sensibilidad y de capacidades mejoradas para la resolución de fotones. |
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Tecnología del detector SiLVIRFotomultiplicador de silicona El fotomultiplicador de silicona, que viene integrado en el detector, se compone de fotodiodos de avalancha accionados por el modo Geiger (APD). Detecta fotones incidentes aleatorios de forma simultánea para proporcionar una mayor eficacia a nivel de la detección fotónica para una más amplia variedad de longitudes de onda y rango dinámico. Asimismo, proporciona datos cuantitativos: la altura del impulso de salida muestra de forma precisa el número de fotones detectados. Rápido procesamiento de señales patentado* Nuestro procesamiento de señales digitales emplea un diseño de circuito integrado con semiconductores de matriz de puertas [gate array] programables en campo (FPGA) dentro del convertidor analógico/digital (A/D) de alta velocidad. Además, reduce la curva de actividad SiPM y permite detectar con exactitud el número de fotones basándose en la altura de cada impulso de salida. También, reduce de forma simultánea y considerable el ruido por debajo de un fotón. *N.º de patente: US11237047 |
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Potencia y rendimiento combinados Juntas, estas tecnologías permiten detectar un rango dinámico alto y lineal de hasta 2000 fotones/2 µs. La eficacia del detector en la detección fotónica es superior a la de los detectores PMT GaAsP usados tradicionalmente para el procesamiento de señales confocales de alta sensibilidad con todas las longitudes de onda. Esto permite que el detector SiLVIR pueda ofrecer una relación señal-ruido (S/N) superior para dar vida a las señales de fluorescencia más débiles. Y, dado que los detectores SiLVIR se basan en la tecnología de semiconductores, su sensibilidad no se degrada y las diferencias individuales entre los distintos detectores son muy pequeñas, lo que ayuda a garantizar unos resultados fiables y uniformes entre los diversos usuarios y tiempos. |
 Comparación de una captura llevada a cabo con un detector PMT GaAsP (izquierda) vs. el detector SilVIR (derecha) | Imágenes de alta calidad aun con fluorescencia débilLa capacidad de los sistemas FV4000 y FV4000MPE al capturar imágenes a partir de una fluorescencia débil supera la de otros sistemas de escaneo láser de generaciones anteriores. El detector SiLVIR ofrece un nivel de ruido muy bajo y una eficiencia de detección fotónica más alta que los detectores PMT GaAsP tradicionales a través de todo el rango de longitud de onda del violeta al infrarrojo cercano; por tanto, proporciona una calidad de imagen mejorada especialmente a partir de una adquisición de fluorescencia tenue. Es posible capturar imágenes de fluorescencia muy intensas con un fondo claro sin tener que ajustar la compensación. La sensibilidad más alta significa que se requiere menos potencia del láser, lo cual reduce fotodaños en sus muestras. Y, si combina el detector con nuestro escáner resonante, podrá adquirir imágenes de alta calidad con una frecuencia de fotogramas superior en menos tiempo. |
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Cuantificación revolucionariaLa tecnología del detector SiLVIR le permite cuantificar de forma precisa la intensidad de imagen para obtener datos más fiables. Los datos obtenidos a partir del procesamiento de imágenes se generan como número de fotones, ofreciendo el valor absoluto de la intensidad de fluorescencia para cada imagen. El rango dinámico más amplio proporciona una cuantificación precisa de la intensidad de la fluorescencia por número de fotones, incluso a niveles de intensidad altos. |
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Comparación de una captura llevada a cabo con un detector PMT GaAsP (izquierda) vs. el detector SilVIR (derecha) | Descubra el rango dinámico completo de la fluorescenciaEn lugar de optar por un enfoque de las áreas de fluorescencia tenues o de aquellas luminosas, los microscopios FV4000 y FV4000MPE permiten capturar ambas opciones en una única imagen sin saturación ni pérdida de información gracias al rango dinámico alto del detector SiLVIR. Esto permite llevar a cabo un análisis de imágenes exacto y procesarlo con menos trabajo. |
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Interfaz de usuario y flujos de trabajo intuitivosLos tubos fotomultiplicadores, usados tradicionalmente en el procesamiento de imágenes confocales, requieren ajustes de tensión en función del nivel de brillo de la muestra y del valor de compensación dedicado a reducir el ruido de la señal. Por tanto, es necesario contar con la experiencia y los conocimientos avanzados para ejecutar los ajustes adecuados y poder adquirir imágenes confocales de alta calidad. La tensión del detector SiLVIR ha sido optimizada con respecto a la sensibilidad y el bajo ruido en fábrica, por lo que no es necesario proceder con ajustes de tensión ni de compensación. Todo lo que se tiene que hacer es ajustar la potencia láser para conseguir un número específico de fotones. Dado que la relación señal-ruido (S/N) es proporcional al número de fotones, es posible mantener una calidad de imagen uniforme manteniendo el número de fotones constante. |
Ajustes del detector |
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Aplicaciones
Cilios gustativos y sistema traqueal en Drosophila (pupación de 42 horas)
Punta de una pata de Drosophila (42 horas de pupación), teñida con faloidina (AlexaFluor 405, F-actina, cian), anticuerpo anti-fosfotirosina (AlexaFluor 555, superficie celular, rojo) y anticuerpo anti-HRP (AlexaFluor 647, axón, azul).
Imagen multicolor de una cepa híbrida de C. elegans formada por una cepa de NeuroPAL y una cepa de GCaMP. La cepa NeuroPAL fue generada por Eviatar Yemini y Oliver Hobert.
| Células Cos-7: anti-tubulina (Alexa Fluor 488; verde).
Cadena pesada de neurofilamentos (NFH) en verde, proteína básica de la mielina (MBP) en rojo, glutatión S-tranferasa pi 1 (GSTpi) en azul. Cerebelo de un ratón capturado con un objetivo UPLXAPO10X.
Imagen general del ala de una Drosophila [pupación de 42 horas]. Tinción con faloidina (AlexaFluor 405, F-actina, cian), anticuerpo anti-fosfotirosina (AlexaFluor 555, superficie celular, rojo) y anticuerpo anti-HRP (AlexaFluor 647, axón, azul).
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Células Cos-7: anti-tubulina (Alexa Fluor 488; verde).
Cadena pesada de neurofilamentos (NFH) en verde, proteína básica de la mielina (MBP) en rojo, glutatión S-tranferasa pi 1 (GSTpi) en azul. Cerebelo de un ratón capturado con un objetivo UPLXAPO10X.
Imagen general del ala de una Drosophila [pupación de 42 horas]. Tinción con faloidina (AlexaFluor 405, F-actina, cian), anticuerpo anti-fosfotirosina (AlexaFluor 555, superficie celular, rojo) y anticuerpo anti-HRP (AlexaFluor 647, axón, azul).
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