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Descripción
 | Obtenga más detalles en profundidadDesarrollado para un procesamiento de imágenes profundas en muestras biológicas, el microscopio multifotón FVMPE-RS ayuda a revelar el funcionamiento de las células y su forma de interactuar dentro del tejido vivo. This product has been discontinued, check out our current product |
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Procesamiento de imágenes multifotón profundas de alta resolución y alta sensibilidadEl microscopio multifotón FVMPE-RS utiliza un diseño óptico y de tecnología avanzada para mejorar la sensibilidad y la resolución durante el procesamiento de imágenes profundas.
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Imagen 3D reconstruida de un cerebro de ratón in vivo (ratón Thy1-YFP-H, corteza sensorial) adquirida con un objetivo TruResolution con una función de autoajuste (izquierda) e imágenes de máxima proyección adquiridas a una profundidad aproximada de 600 μm. Imágenes adquiridas sin función de ajuste automático (lado superior derecho) y con función de ajuste automático (lado inferior derecho). Las imágenes se adquirieron en el centro RIKEN BSI-Olympus Collaboration Center, cortesía del Dr. Hiromu Monai, el Dr. Hajime Hirase y el Dr. Atsushi Miyawaki. |
Videos asociados
Flujo sanguíneo de embrión de pez cebra
| Procesamiento de imágenes a alta velocidad para procesos celulares dinámicos rápidos.El escaneo resonante de alta velocidad y el escaneo lineal de alta resolución son procedimientos normalizados.
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Excitación de longitud de onda múltiple para una cobertura espectral más ampliaLa plataforma de procesamiento de imágenes FVMPE-RS soporta un láser pulsado de longitud de onda doble o dos láseres infrarrojos independientes ajustables para un procesamiento de imágenes multicanal y con excitación multifotón.
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Generación de imágenes de tercer harmónico de tejido adiposo porcino. El tejido adiposo porcino sin etiquetar ha sido irradiado con láser de femtosegundos a 1250 nm, se ha detectado el segundo harmónico en las fibras de colágeno en 625 nm y tercer harmónico de los acoplamientos lípidos a 416 nm. |
| Características opcionales para aplicaciones avanzadasEl microscopio multifotón FVMPE-RS es una plataforma modular, que le permite actualizar fácilmente su sistema a medida que crecen sus necesidades de investigación. Las opciones incluidas son:
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Software intuitivo optimizado para observación multifotónEl diseño personalizable del software le aporta flexibilidad, aumentando su eficiencia:
El análisis y el procesamiento de imágenes en línea, incluida la separación espectral y el renderizado en 3D, vienen de serie. |
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3 opciones de estativo del microscopio |
Sistema de microscopio vertical: para microscopia multifotón in vivo e in vitroLa amplia distancia de la platina y el largo trazo de enfoque del estativo vertical estándar permiten alojar una amplia gama de muestras, desde secciones de tejido hasta ratones vivos y otros animales pequeños. |
Sistema de microscopio en puente — Para observaciones in vivoque requieren más espacioLa distancia de 355 mm de altura entre el objetivo y la placa base facilita las observaciones in vivo que requieren grandes aparatos, como las imágenes de comportamiento en ratones despiertos. |
Sistema de microscopio invertido — Para observaciones in vitro de células 3D (esferoides) y cultivos de tejidoEl estativo invertido proporciona una plataforma estable para el procesamiento de imágenes time-lapse de muestras vivas gruesas, especialmente cultivos de tejidos y cultivos de células esferoides y organoides en 3D. Esta configuración también es útil para el procesamiento de imágenes intravital de órganos y tejidos a través de una ventana corporal en un animal pequeño. |
Tecnologías aplicadas
  | Procesamiento de imágenes sencillo y preciso con alineación automática del láserLa deriva del láser causada por la sintonización de la longitud de onda, la fluctuación de la temperatura y otras fuentes de desplazamiento de la cavidad pueden causar una desalineación del rayo de excitación en los sistemas convencionales. El microscopio multifotón FVMPE-RS mantiene una alineación láser precisa y cuatriaxial del haz de excitación en la unidad del escáner, incluso frente a la deriva del láser, lo que simplifica el mantenimiento del sistema. La posición y ángulo del haz se ajustan automáticamente para ofrecer una potencia láser superior y un registro uniforme de los píxeles. Si su sistema tiene dos líneas de láser de excitación, esta característica mantiene la coalineación entre los rayos, ayudando a eliminar los errores de coregistro entre canales. |
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Escaneo de alta velocidad de hasta 438 fotogramas por segundoEl rápido escáner resonante rápido y el galvanómetro lineal proporcionan una generación de imágenes de alta velocidad y alta resolución en un único sistema. Con velocidades de captura de hasta 438 fps a 512 × 32 píxeles o 30 fps a 512 × 512 píxeles en todo el campo de visión (FN 18), podrá:
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| Transmisión láser eficienteLos espejos revestidos de plata de los escáneres ayudan a proporcionar más potencia láser a su muestra para obtener imágenes más brillantes. La reflectancia potenciada en el rango del infrarrojo cercano, en comparación con los espejos revestidos en aluminio, es especialmente ventajosa para experimentos de profundidad in vivo. |
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Opciones del detector que optimizan el desempeño del procesamiento de imágenesAdquiera imágenes con una óptima relación entre señal y ruido (SNR) a partir de una fluorescencia tenue proporcionada por detectores de tubo fotomultiplicador (PMT) de arseniuro de galio (GaAsP) de alta sensibilidad. Estos ofrecen una mayor eficiencia cuántica que los PMT multialcalinos (MA) estándar y se dotan de un sistema de refrigeración sin ventilación para mejorar aún más la SNR. Si se trabaja con muestras de emisión brillante, es posible combinar la alta SNR del detector de GaAsP con el rango dinámico más amplio del detector MA. Para una mayor eficiencia lumínica, la trayectoria de detección no descaneada del sistema presenta una óptica de gran superficie para captar mejor los fotones de fluorescencia dispersos y aprovechar al máximo la amplia capacidad de captación de nuestros objetivos multifotónicos. |
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Objetivos MPE desarrollados para un procesamiento de imágenes profundas
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Maximice la señal con el modo de enfoque profundoEl modo de enfoque profundo ajusta el diámetro del haz de láser basándose en unas condiciones de dispersión de láser. Para las muestras in vivo con dispersión fuerte de láser, el haz se estrecha de manera que más fotones de excitación pueden profundizar en la muestra para generar imágenes más brillantes. |
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| Control de fotoestimulación independientePara experimentos precisos de fotoestimulación y fotoblanqueo de microsegundos, añada:
Es posible definir regiones de interés (ROI) de estimulación arbitraria independientemente a un procesamiento de imágenes ROI. La estimulación secuencial multipunto de acceso aleatorio también está disponible cuando se requiere una mayor velocidad. En sistemas con dos líneas de procesamiento de imágenes IR, el escáner SIM permite la estimulación y el procesamiento de imagen simultáneos. |
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Sincronización de microsegundo para electrofisiología y optogenéticaUn secuenciador de instrumentación proporciona una sincronización de precisión de microsegundos para eventos de estimulación y activación. La estimulación puede sincronizarse tanto de forma espacial como temporal al barrido de la imagen, lo que facilita la captura de dinámicas de respuesta rápida en ubicaciones precisas. En el caso de la electrofisiología u optogenética, esto podría suponer la diferencia entre distinguir una respuesta sincrónica o asincrónica a un estímulo. Para las adquisiciones o experimentos que duran dos semanas o más con procedimientos complejos que requieren conmutación de tareas, el software gestor de secuencia mantiene una precisión de milisegundo lo que brinda datos de calidad alta en los exigentes experimentos in vivo e in vitro. Conozca mejor la generación de imágenes multidimensionales y multiárea con lapso de tiempo |
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Soluciones
Sincronice los datos electrofisiológicos y la estimulación de luz láser con la unidad analógicaLas entradas analógicas y las E/S TTL digitales están disponibles para llevar a cabo experimentos electrofisiológicos. La unidad de entrada analógica registra las señales de voltaje externas como datos de imagen. Las señales eléctricas fotoestimuladas medidas con pinza de parche pueden sincronizarse con la captura de imagen y mostrarse como una superposición de intensidad de pseudocolor. Más información acerca de la unidad analógica El software avanzado de mapeo multipunto (MMASW) permite una estimulación lumínica precisa de múltiples puntos seleccionados arbitrariamente o puntos en un área de interés (ROI) rectangular para escaneos de mapeo. Es posible registrar simultáneamente las señales de voltaje eléctrico del sistema de sujeción del parche.
Más información acerca del módulo de software de mapeo y multipunto |
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*Control láser punto a punto multicolor compatible mediante el uso de escáner SIM con láseres múltiples para experimentos combinados de ChR2 y NpHR. |
| Cree mapas 3D de reacción por estimulaciónLos escaneos de mapeo especializados usan una secuencia pseudoaleatoria para obtener mapas de reacción espacial más precisos al medir la respuesta electrofisiológica con respecto a la estimulación óptica. Las grabaciones directas de los dispositivos Patch Clamp y las señales de fluorescencia de los indicadores de calcio o de voltaje pueden superponerse en una imagen de alta resolución. Asimismo, es posible usar umbrales de intensidad para definir un escaneo multipunto de alta velocidad de las regiones más activas. Esto también puede hacerse en mapas de reacción 3D con una unidad piezoeléctrica Z opcional. |
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Combine un amplio campo de visión con alta resoluciónVea su muestra completa en alta resolución y en un contexto más amplio con la función multiárea a intervalos (MATL):
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Imagen por cortesía de Urs Ziegler y Jose Maria Mateos, Center for Microscospy and Image Analysis, Universidad de Zúrich. Línea de ratón L15 por cortesía de Pico Caroni, FMI, Basilea. |
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Software
Control de precisión para sus experimentosEl Administrador de secuencias (Sequence Manager) facilita la coordinación de los experimentos. Puede organizar y agilizar fácilmente protocolos complejos con tiempos precisos, incluyendo:
Puede guardar y recargar los protocolos para la ejecución uniforme de los experimentos. |
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Canales superpuestos e independientes con deconvolución espectralLos espectros de fluorescencia superpuestos muy cerca pueden complicar los estudios biológicos en los que se observan varios marcados de ensayo simultáneamente. Ahora, los canales espectrales superpuestos pueden separarse con la deconvolución espectral basada en un algoritmo de separación ciega o en perfiles multicanal guardados anteriormente. Las señales cruzadas entre los canales pueden eliminarse incluso durante la captura de imágenes mediante el procesamiento en tiempo real. |
Modo normal
La superposición espectral de la fluorescencia roja y verde causa señales cruzadas entre los canales durante la adquisición normal. | Modo in vivo no combinado
El modo in vivo no combinado aplica la deconvolución espectral durante la adquisición de imágenes para separar mejor los distintos fluoróforos. |
Renderizado en 3DSe pueden renderizar grandes cantidades de datos de apilamiento en Z en una pantalla 3D. Las vistas importantes pueden registrarse como cuadros clave, facilitando la creación de imágenes en 3D animadas que amplían y hacen transición hacia diferentes ángulos de la cámara. |
Apilamiento 3D de 4 mm en la etiqueta del vaso sanguíneo con Texas Red en el cerebro de ratón.
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Datos adquiridos sin tratamiento en 30 fps con baja potencia del láser (0,05 %, 488 nm) [izquierda].
| Proceso promedio de laminaciónEl escaneo de alta velocidad con baja potencia del láser para evitar fototoxicidad puede reducir la relación entre la señal y el ruido. El posprocesado promedio de laminación le brinda flexibilidad para ajustar imágenes en intervalos de alta velocidad manteniendo asimismo la escala de tiempo y los datos originales. |
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Observación macro a microEl uso de un objetivo de alta apertura numérica (A.N.), una platina motorizada y el software Olympus permiten la obtención de imágenes de mosaico:
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| Compensación de brillo-profundidadCuando se observan muestras gruesas, las imágenes pueden oscurecerse a medida que el punto focal se hace más profundo. La compensación de brillo-profundidad Bright Z permite ajustar continuamente la sensibilidad del detector y la potencia del láser para mantener un brillo constante. Esta función complementa los objetivos dinámicos TruResolution que también ajustan automáticamente la compensación de la aberración esférica con la profundidad. |
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Funciones de análisis ampliadasEl software de la plataforma de procesamiento de imágenes FVMPE-RS está integrado con el software de análisis de imágenes Olympus cellSens que expande las capacidades analíticas del sistema. Las siguientes son algunas de las características opcionales:
También, se encuentra disponible el software opcional de análisis 3D NoviSight. Obtenga más información sobre el software de creación de imágenes cellSens |
Especificaciones
FLUOVIEW FVMPE-RS |
| Sistema de láser individual | Sistema de líneas dual | Sistema de láseres dobles | ||
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| Unidad | Láseres IR de impulso; calificados con impulso corto negativo para la excitación multifotón | Productos de Spectra-Physics: MAITAI HPDS-OL: 690 nm – 1040 nm MAITAI eHPDS-OL: 690 nm – 1040 nm INSIGHT X3-OL: 690 nm – 1300 nm INSIGHT X3 DUAL/DUALC-OL: 680 nm – 1300 nm + 1045 nm Productos de Coherent: Chameleon Vision I Olympus: 680 nm - 1080 nm Chameleon Vision II Olympus: 680 nm - 1080 nm Chameleon Vision S Olympus: 690 nm - 1050 nm | ||
| Láser IR de impulso principal |
MAITAI HPDS-OL
MAITAI eHPDS-OL INSIGHT X3-OL Chameleon Vision I Olympus Chameleon Vision II Olympus Chameleon Vision S Olympus |
INSIGHT X3 DUAL-OL
INSIGHT X3 DUALC-OL |
MAITAI HPDS-OL
MAITAI eHPDS-OL INSIGHT X3-OL Chameleon Vision I Olympus Chameleon Vision II Olympus Chameleon Vision S Olympus | |
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Línea IR/Láser adicional:
Usar como segunda línea de procesamiento de imágenes/láser o para la estimulación simultánea (escáner SIM opcional) | – |
Línea fija de 1045 nm de
INSIGHT X3 DUAL /DUALC-OL |
MAITAI HPDS-OL
MAITAI eHPDS-OL Chameleon Vision I Olympus Chameleon Vision II Olympus Chameleon Vision S Olympus | |
| Óptica de introducción automática |
Óptica de introducción con atenuación AOM
(incrementos de 0 %–100 %, 0,1 %) Incluido el expansor de haces totalmente automatizado, Desplazador XY y alineación de ángulo con dos ejes. (óptica de autoalineación de alineación cuádruple de 4 ejes) Acoplamiento directo al puerto láser de la unidad de escaneo. |
Óptica de introducción con 2 juegos de atenuación de AOM (0 %-100 %, incrementos de 0,1 %)
Incluidos 2 juegos de expansores de haces totalmente automatizados, un desplazador XY y una alineación de ángulo de dos ejes. (óptica de autoalineación de alineación cuádruple de 4 ejes) Acoplamiento directo al puerto láser de la unidad de escaneo. | ||
| Óptica de combinación de láser de IR | – | Conmutador de trayectoria de luz motorizado con DM900, DM1000R, DM1100 para combinar dos longitudes de onda de IR para el procesamiento de imágenes | ||
| Láser de luz visible opcional para estimulación | Fuente de láser con atenuación de AOTF de 405 nm/50 mW, 458 nm/20 mW, 588 nm/20 mW. Incrementos de 0 %–100 %, 0,1 %, tiempo de ascenso < 2 μs | |||
| Unidad de escaneo | Método de escaneo | Desviación de la luz a través de 2 espejos de escaneo galvanométricos con recubrimiento de plata, o espejo de escaneo resonante recubierto de plata. | ||
| Velocidad de escaneo |
Escáner galvanométrico (procesamiento de imágenes normal): 512 × 512 con 1,1 s–264 s, tiempo de píxel: 2 μs–1000 μs
Escáner de resonancia (procesamiento de imágenes de alta velocidad): 30 fps a 512 × 512, 438 fps a 512 × 32 | |||
| Modo de escaneo | XY, XYZ, XYT, XYZT, línea libre, XZ, XT, XZT, PointT | |||
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Escáner galvanométrico
(Imagen normal) |
Escaneo ROI galvanométrico: clip rectangular, elipse, polígono, área libre, línea, línea libre y punto
Aumento: 1,0x–50,0x con incrementos de 0,01x, compatible con rotación y vista panorámica de 0°–360° Número de campo de escaneo: 18 Tamaño de imagen: 64 × 64–4096 × 4096 | |||
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Escáner resonante
(Imagen de alta velocidad) |
Escaneo de ROI resonante: clip rectangular, línea
Aumento: 1.0x-8.0x con incrementos de 0.01x Número de campo de escaneo: 18 Tamaño de imagen: 512 × 512 | |||
| Revestimiento óptico | Óptica de soporte IR con recubrimiento 1600 | |||
| Detectores de procesamiento de imágenes MPE no descaneado |
Detección reflejada: configuración de 2 o 4 canales: configuración de 2 PMT, configuración de 4 PMT o 2 PMT + 2 PMT de GaAsP refrigerados
Detección transmitida: 2 unidades PMT con un condensador de alta A.N. | |||
| Detector de luz transmitida | Módulo con detector fotomultiplicador de luz transmitida externa integrado y lámpara halógena de 100 W, conmutación motorizada, adaptación de la fibra al estativo del microscopio | |||
| Unidad Z |
Módulo de enfoque motorizado integrado del microscopio, incremento mínimo de 0,01 μm
Opcional: portaobjetivos piezoeléctrico de alta rigidez*1 | |||
| Escáner de estimulación simultánea opcional |
Escáner de estimulación simultánea altamente sincronizado, incluido un juego de escáner galvanométrico, VIS y puerto láser IR.
Escaneo de ROI: clip rectangular, elipse, polígono, tornado, área libre, línea, línea libre y punto. | |||
| Caja de entrada/salida digital y analógica opcional | Entrada de señal analógica de 4 canales, entrada de disparo de TTL digital de 6 canales, salida de disparo de TTL digital de 5 canales. Salida de temporización del escáner | |||
| Entorno de funcionamiento | Temperatura ambiente: 20 °C-25 °C, humedad: 75 % o menos a 25 °C, requiere una fuente de energía continua (24 horas) | |||
| Tamaño de la tabla antivibración |
1500 mm × 1650* mm
*1800 mm con sistema de microscopio invertido* |
1500 mm × 1650* mm
*1800 mm con sistema de microscopio invertido* | 1500 mm × 2000 mm | |
| Software | Características básicas |
Diseño de interfaz gráfica del usuario que se adapta a salas oscuras. Diseño personalizable por el usuario.
Características de recarga de parámetros de adquisición. Capacidad de grabación en disco duro, ajuste de potencia láser y HV con adquisición de apilamiento en Z. Adquisición de apilamiento en Z con mezcla alfa, proyección de intensidad máxima, representaciones de isosuperficie. | ||
| Control de láser IR | Control de la longitud de onda del láser IR completamente integrado y modo de enfoque profundo | |||
| Software de platina motorizada opcional |
Control de platina motorizada XY. Adquisición de imágenes de mapa para facilitar la ubicación del objetivo. Adquisición de imágenes en mosaico y ensamblado de imagen por software.
Definición de área múltiple para la creación de imágenes en intervalos. | |||
| Software opcional de mapeo y estimulación multipunto | Software de estimulación multipunto y adquisición de datos. Estimulación multipunto con mapeo para generar un mapa de reacción.
Característica de filtrado para seleccionar puntos. Estimulación multipunto. Estimulación única o repetida. Selección de longitud de onda de estimulación independiente para cada punto. | |||
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Secuencia opcional
Gestor | Software programable avanzado para definir varias tareas de procesamiento de imágenes/estimulación y ejecutarlas mediante un secuenciador de hardware.
Retardo mínimo de 100 ms entre tareas. | |||
| Software opcional de compensación automática | Software de compensación automática de aberración esférica.
Control de la lente de objetivo con función de compensación automática de aberración esférica. Ajuste automático de collar de corrección motorizado para encontrar la mejor posición en una profundidad de observación determinada. Ajuste automático del collar de corrección a lo largo del movimiento en Z | |||
*1 No disponible en algunas áreas. |
Objetivos TruResolution |
| FV30-AC10SV | FV30-AC25W | |
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| Aumentos | 10 | 25 |
| A. N. | 0,6 | 1,05 |
| D. T. | 8 mm | 2 mm |
| Espesor de cubreobjetos | 0 mm–0,23 mm | 0 mm–0,23 mm |
| Medio de inmersión | SCALEVIEW-A2 (agua, aceite de silicona y aceite normal disponible) | Agua |
| Características especiales | Compensación automática, optimizada para procesamiento de imágenes multifotón | Compensación automática, optimizada para procesamiento de imágenes multifotón |
| Dimensiones (ancho × profundidad × altura) |
56 mm × 106,5 mm × 95 mm
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56 mm × 106,5 mm × 101 mm
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| Peso | Aprox. 1 kg | Aprox. 1 kg |
