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FV4000

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Vea más con la microscopía confocal NIR

Las tecnologías mejoradas del sistema ofrecen una multiplexación extendida para ver más en una imagen.

El procesamiento de imágenes con NIR ofrece mejores capacidades de multiplexación por medio de la ampliación del perfil espectral de excitación (λ_Ex) y detección (λ_Em) del sistema FV4000. Esto permite que se utilicen más colorantes para minimizar la superposición de las señales de emisión.

  • Multiplexe hasta seis canales con la actualizada tecnología TruSpectral™ y nuestros detectores SilVIR™ de alta sensibilidad
  • La rejilla y la rendija del holograma de fase y volumen (HFV) de alta eficiencia pueden detectar una banda relevante de longitud de onda* desde 400 nm hasta 900 nm con un paso mínimo de 1 nm.
  • Amplíe las opciones del fluorocromo hasta con seis canales de banda ancha o detectores con desplazamiento hacia el rojo para minimizar los daños y reducir la autofluorescencia.
  • Los combinadores láser modulares permiten hasta 10 líneas de láser desde 405 nm hasta 785 nm en paralelo.
     

    *Según los estudios demostrados hasta marzo de 2023.

  • Células HeLa marcadas con seis fluorocromos.
    Núcleos celulares (DAPI; azul), membrana celular (AF488; verde), poro nuclear (AF561; amarillo),
    microtúbulo (Qdot605; magenta), mitocondria (MitoTracker DeepRed; cian), actina (AF750 faloidina; gris).

Óptica de alta calidad para el procesamiento eficiente de imágenes por fluorescencia de NIR

Los elementos ópticos del sistema FV4000 cuentan con una transmisión elevada de 400 nm a 1300 nm, como el escáner galvanométrico y el escáner resonante, que presentan revestimientos de plata en lugar de aluminio.

Nuestros galardonados objetivos X Line™ han sido corregidos para las aberraciones cromáticas de 400 a 1000 nm. Además, presentan una apertura numérica más alta, una excelente planitud y una transmitancia mucho más elevada de UV a NIR, lo que aumenta el potencial de la multiplexación.

Con el fin de mejorar la fiabilidad de la colocalización, nuestro especializado objetivo de inmersión en aceite A Line™ (PLAPON60XOSC2) [ne~1.40] disminuye considerablemente la aberración cromática para el análisis riguroso de colocalización.

Serie X

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Se adquirió un total de 77 posiciones XYZ a partir de cuatro canales (11 × 7) con un escáner resonante de 1K en 16 minutos para crear la imagen mosaico, que se precisaba habitualmente dos horas con un escáner galvanométrico. Corte coronal de un cerebro de ratón de línea H en cian; DAPI (núcleos celulares) en verde; YFP (neurona) en amarillo; astrocitos Cy3 en magenta; AlexaFluor 750 (microtúbulo). Muestra por cortesía de: Takako Kogure y Atsushi Miyawaki, Laboratorio de Dinámica de Funciones Celulares, RIKEN CBS.

Imágenes confocales de alta calidad a alta velocidad

Una combinación única de tecnologías avanzadas que ofrece imágenes de alta calidad con mucha más rapidez que los sistemas microscópicos de escaneo láser convencional.

  • Imágenes de alta resolución a alta velocidad: el escáner resonante de 1K × 1K, en FN20 y 0,033 µs por píxel, y el detector SilVIR permiten adquirir imágenes con rapidez y un nivel de ruido mínimo.
  • Imágenes macro de calidad excepcional: adquiera con rapidez imágenes macro, dotadas de una calidad excepcional para maximizar su tiempo y potencial de investigación.

Procesamiento de imágenes sencillo, preciso y con superresolución

Capture imágenes de superresolución con el microscopio FV4000 sin un hardware específico.

  • Observe con facilidad estructuras subcelulares gracias a nuestros objetivos de alta resolución A Line y nuestro software de superresolución (FV-OSR).
  • El software FV-OSR optimiza automáticamente la apertura confocal para detectar los componentes de alta frecuencia y mejorar su contraste a fin de alcanzar una resolución de 120 nm
  • Adquiera imágenes de superresolución a una rapidez ocho veces más elevada que con los sistemas anteriores gracias al detector SilVIR y el procesamiento sobre la marcha.

Modo confocal 1AU (izquierda) frente a modo de superresolución (derecha)

Imágenes 3D de alta resolución a partir de muestras gruesas

Esferoide de células HeLa marcado con DAPI (cian, núcleos celulares) y AlexaFluor790 (magenta, Ki-67). El procesamiento de imágenes del volumen completo del esferoide se efectuó con NIR de 785 nm, aunque solo fue posible la observación del área superficial de los núcleos celulares con un láser de 405 nm.

Al procesar imágenes de mayor espesor, el microscopio FV4000 permite capturar imágenes 3D de alta resolución.

  • Benefíciese de una longitud de onda más prolongada en NIR para penetrar mejor en el tejido gracias al amplio rango dinámico y sensibilidad del detector SilVIR.
  • Imagen más profunda con menos dispersión y absorción al aprovechar que los compuestos dispersores de luz—como la melanina y la hemozoína—absorben menos luz en el rango de 700 a 1500 nm.
  • Imagen considerablemente más profunda de lo que es posible con láseres visibles gracias a los láseres de diodo de 685 nm, 730 nm y 785 mm en el FV4000.
  • Objetivos en silicona de alta apertura numérica (A. N.) que reducen la aberración esférica, y cuyo aceite de silicona no se seca, lo que resulta útil para el procesamiento de imágenes en intervalos.
  • Mejore la calidad general de las imágenes y la resolución Z gracias a la deconvolución TruSight™ que otorga imágenes 3D increíbles a partir de muestras gruesas.
  • Disfrute de un flujo de trabajo transparente desde la adquisición hasta la publicación con los algoritmos especializados del software cellSens™.

Dinámica precisa de células vivas con menos daños

Por lo general, usar longitudes de onda más largas en la excitación de fluorescencia por cortos períodos es mejor para el bienestar completo de la muestra. Un menor uso de luz fototóxica permite adquirir imágenes durante períodos más prolongados, lo que conlleva a la obtención de datos más uniformes y reproducibles a partir de los experimentos de procesamiento de células vivas.

El sistema FV4000 no solo otorga un delicado procesamiento de imágenes en intervalos por medio de los láseres de 685 nm, 730 nm y 785 nm, sino que además incorpora un compensador de deriva en Z TruFocus Red para mantener la posición del enfoque. Esta unidad TruFocus Red actualizada es compatible con un rango más amplio de objetivos, como nuestras series X Line™ y A Line™ de alto rendimiento.

Fotoestimulación en intervalos: la lesión láser se llevó a cabo en células C2C12. El pseudocolor verde representa la aplicación de un colorante FM™ 1-43. La imagen fue adquirida con un escáner galvanométrico de 2 μs y un objetivo UPLSAPO60XOHR Se usó un láser de 405 nm para el fotodaño y uno de 488 para obtener las imágenes. Muestra por cortesía de: Daniel Bittel y Jyoti Jaiswal, Centro de Investigación de Medicina Genética, Children’s National Research Institute.

Imagen en intervalo de tiempo de células HeLa teñidas con Hoechst33342 (nuclear, azul), MitoTracker Green (mitocondrias, verde), LysoTracker Red (lisosoma, amarillo), SiR-Tubulin (tubulina, magenta) y POR-SA-Halo (ER, cian). Hoechst33342: Ex 405 nm/Em, MitoTracker Green: LysoTrakcer Red: SiR-Tubulin: POR-SA-Halo: Muestra por cortesía de: Dr. Masayasu Taki, Institute of Transformative Bio-Molecules (WPI-ITbM), Universidad de Nagoya (Japón), Yuichi Asada y Ryusei Aruga, Escuela Superior de Ciencias, Universidad de Nagoya (Japón).

Imagen en intervalo de tiempo de 17 horas proveniente de células HeLa teñidas con MitoTracker Red (mitocondria, magenta), POR-SA-Halo (ER, cian). MitoTracker Red: Ex 561nm/Em, POR-SA-Halo: Ex 730nm/Em. Muestra por cortesía de: Dr. Masayasu Taki, Institute of Transformative Bio-Molecules (WPI-ITbM), Universidad de Nagoya (Japón), Yuichi Asada y Ryusei Aruga, Escuela Superior de Ciencias, Universidad de Nagoya (Japón).

Claras imágenes con profundidad

Use nuestros objetivos de inmersión en aceite de silicona

con el microscopio FV4000 y capture imágenes claras de las características y estructuras profundas de su muestra. El aceite de silicona presenta un índice de refracción similar al de las células o el tejido vivos, lo que reduce considerablemente la aberración esférica en comparación con el aire, agua u otros aceites. Si la aberración es menor, es posible obtener imágenes más claras de la profundidad de su muestra. El aceite de inmersión en silicona no se seca a 37 ℃ (98,6 °F), por lo que resulta más eficaz para el procesamiento de imágenes en intervalos a largo plazo.

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