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La microscopía de escaneo/barrido láser es usada en la investigación biológica y de ciencia de los materiales para obtener imágenes de muestras con alta resolución y alto contraste. Los microscopios láser pueden escanear muestras punto por punto, y el resultado es un seccionamiento óptico que puede usarse para construir imágenes 3D precisas. Nuestros microscopios de escaneo láser están diseñados con una amplia variedad de modos para el procesamiento de imágenes a fin de enfrentar algunos de los desafíos más difíciles en las ciencias de la vida y de los materiales. Ofrecen alta sensibilidad y velocidad. Facilitan el procesamiento de imágenes de células vivas, la observación de tejidos profundos, así como la medición y el análisis de muestras con precisión. Haga su elección a través de una gama de sistemas de escaneo láser adaptados a una variedad de aplicaciones científicas, como el procesamiento de imágenes de muestras biológicas en los campos de la investigación oncológica y la biología del desarrollo, o la evaluación de la rugosidad superficial en metales y la inspección de calidad de productos electrónicos (p. ej., semiconductores y baterías de vehículos electrónicos). Evident posee la solución adecuada para satisfacer sus necesidades. |
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Los microscopios confocales de escaneo o barrido láser se usan en la investigación de las ciencias de la vida para una amplia variedad de especímenes vivos y fijos destinados a estudios anatómicos, fisiológicos y bioquímicos moleculares y celulares. Gracias a su capacidad inherente para el seccionamiento óptico, estos microscopios logran una reconstrucción precisa de estructuras 3D con alta resolución y alto contraste a partir de una serie de imágenes obtenidas en distintas profundidades.
Para obtener más información sobre los usos de la microscopía confocal, visite nuestro Centro de recursos de microscopía.
La microscopía confocal ofrece varias ventajas sobre la microscopía óptica convencional de campo amplio, por ejemplo, capacidad para controlar la profundidad de campo, supresión o reducción de la información de fondo fuera del plano focal (alta relación señal-ruido), y capacidad para recopilar en serie secciones ópticas de muestras gruesas. El elemento clave del enfoque confocal es el uso de técnicas de filtrado espacial que eliminan la luz fuera de enfoque o el deslumbramiento en muestras fuera del campo visual inmediato.
Un microscopio confocal de escaneo láser punto por punto crea secciones ópticas de una muestra mediante el escaneo de un punto láser enfocado punto por punto a través del campo visual. El objetivo del microscopio enfoca posteriormente esta luz hacia la muestra. Los fotones emitidos a partir de los fluorocromos de la muestra, que se ubica en el punto de enfoque, son recuperados por el objetivo y transmitidos al escáner a través de un estenopo, el cual se combina al plano focal del objetivo. Esto hace que sólo los fotones enfocados sean detectados por el tubo fotomultiplicador. Al procesar los fotones a partir de cada punto de la posición del láser, es posible reconstruir una imagen píxel a píxel.
Para obtener más información sobre la microscopía confocal, visite nuestro Centro de recursos de microscopía.
La microscopía multifotónica es una excelente técnica para el procesamiento de imágenes profundo de muestras gruesas, especialmente durante los experimentos in vitro. Los impulsos láser en el infrarrojo cercano, sólidamente enfocados, penetran más profundo en los tejidos biológicos que la luz visible, ya que la luz infrarroja cercana experimenta una menor absorción y dispersión. En el procesamiento de las imágenes, se escanea un láser pulsado a través de la muestra, cuya longitud de onda para la excitación es por lo general de 700 a 1300 nm. La excitación multifotónica se localiza inherentemente en el plano focal, lo que reduce la fototoxicidad. Lo más importante es que el estenopo confocal no es requerido en el seccionamiento óptico; por tanto, puede recogerse una mayor señal de luz como los fotones de fluorescencia dispersos. El resultado de todo ello son imágenes 3D más claras y detalladas a gran profundidad en muestras gruesas.
Descubra el microscopio de escaneo láser multifotónico FVMPE-RS™.
Por lo general, la resolución mejora significativamente con la microscopía confocal a diferencia de las técnicas tradicionales de microscopía de campo amplio. Dado que la resolución en la microscopía de escaneo láser depende de la apertura numérica (A. N.) del objetivo, es fundamental usar objetivos de alta A. N. con el fin de obtener una imagen de alta resolución. Olympus ofrece una gama de objetivos de alta A. N., como nuestros objetivos X Line™, que otorgan alta apertura numérica (A. N.), uniformidad de imagen y corrección cromática para mejorar la resolución de la imagen en un campo visual más amplio. En el procesamiento de imágenes de tejidos profundos, nuestros objetivos de inmersión en silicona A Line™ proporcionan un índice de refracción similar al de las células vivas. Esto permite imágenes 3D más claras y de mayor resolución con una mínima aberración esférica.
Con el fin de otorgar una mayor resolución durante el procesamiento de imágenes profundo por medio de nuestro sistema multifotónico FVMPE-RS, los objetivos TruResolution™ poseen un collar de corrección automatizado que compensa dinámicamente la aberración esférica mientras mantienen una posición de enfoque precisa. Se ajustan automáticamente a cada plano de una imagen volumétrica, lo que da como resultado imágenes 3D más nítidas y brillantes en profundidad.
Para suprimir la borrosidad de las imágenes y obtener imágenes de alta resolución más claras y nítidas durante el procesamiento de imágenes, Olympus ha desarrollado algoritmos de deconvolución TruSight™ 2D y 3D, los cuales están especializados para imágenes confocales láser y de superresolución (Olympus Super Resolution, OSR).
En el caso de los estudios que requieren una resolución más alta, como el análisis de colocalización, el módulo de procesamiento de imágenes de superresolución —Olympus Super Resolution (OSR)— dedicado al sistema FV3000 permite adquirir hasta cuatro señales fluorescentes de forma secuencial o simultánea con una resolución lateral (XY) de aproximadamente 120 nm, lo que duplica por poco la resolución de los microscopios confocales típicos.
¿Desea conocer más acerca de la tecnología de superresolución de Olympus?
El microscopio FV3000 de la serie FLUOVIEW™ puede ser usado con una variedad de objetivos de magnificación, desde un objetivo bajo de 1,25X hasta un objetivo alto de 150X, en función de la aplicación. Los objetivos de baja magnificación de 1,25X a 4X son adecuados para capturar la estructura tisular completa. Para capturar la morfología de las células que componen el tejido, se requieren objetivos de media magnificación entre 10X y 40X, y para captar la microestructura interna de las células suelen usarse objetivos de gran magnificación de 60X o superiores. El zoom óptico mejora aún más la magnificación de la imagen: hasta 50 veces más allá del nivel de ampliación del objetivo si se disminuye el ángulo del espejo de escaneo.
Los microscopios de escaneo/barrido láser pueden ser integrados en sistemas según el presupuesto y la aplicación que se destine. Si tiene un objeto de interés delimitado que desea observar, es posible circunscribir la cantidad de láseres, detectores y tipos de objetivos a un precio asequible. También es posible actualizar el sistema mediante la adición de unidades necesarias a medida que sus objetivos de investigación cambien o se desarrollen con el tiempo.
Póngase en contacto con su representante local de Olympus para hablar sobre nuestros sistemas confocales de escaneo/barrido láser y obtener una cotización.
Objetivos TruResolution
| Videos asociados |
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Microscopio FV3000 en la investigación oncológicaEn este video, el Dr. Yuji Mishima, de la Fundación Japonesa para la Investigación del Cáncer, nos explica por qué el procesamiento de imágenes fluorescente es una herramienta para la investigación. | Videos asociados |
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