¿Se le han presentado nuevas aplicaciones de investigación continua para organismos modelo o células vivas, pero no está seguro si su antiguo microscopio de investigación invertido puede tratarlas? o ¿el costo de un nuevo microscopio invertido no entra en su presupuesto actual? Puede que quede sorprendido al saber que, mediante modificaciones clave, su actual microscopio aún puede «dar cabida» al alcance de sus objetivos de investigación.
En combinación con las actualizaciones expuestas en la primera y segunda parte de nuestra serie de publicaciones relativa a las optimizaciones de microscopios, el hecho de agregar una cámara o un recinto de control ambiental podría ayudarle a lograr los objetivos investigativos de un procesamiento en vivo de imágenes que quizás no hubiera considerado factible.
La importancia del control ambiental para un procesamiento de imágenes estable de células vivas
El procesamiento de imágenes de células vivas puede tardar 20 minutos, varias horas o incluso más. Aparte de la desviación del enfoque en Z, asociada a los cambios de la temperatura ambiental en experimentos más prolongados, es posible que se deba controlar:
- La temperatura (hasta 37 °C [99 °F] o hasta 22 °C [72 °F])
- La humedad
- El CO2 (y O2 si las condiciones hipóxicas son relevantes)
El control ambiental del microscopio puede ser configurado para cubrir cualquiera o todas las capacidades mencionadas. Este da lugar a una actualización fácil requerida por varias aplicaciones de procesamiento de imágenes que involucran organismos modelo y células vivas.
Los beneficios de las unidades Stage Top
Los sistemas superiores de platina (Stage Top), como los de Tokai Hit y Okolab, ofrecen unidades de cámara convenientemente extraíbles. Esto facilita la adición y la eliminación del control ambiental según sea necesario. Y, es particularmente conveniente cuando el instrumento también es usado en aplicaciones que no requieren imágenes de células vivas.
Por otro lado, estos sistemas son muy eficaces para mantener la viabilidad durante horas e incluso días. Los puertos de perfusión permiten el reabastecimiento de agua y medios para la humedad y los nutrientes/agonistas; además, los calefactores disponibles, como soluciones en línea, minimizan el choque térmico.
También, tenga en cuenta que los objetivos de inmersión actúan como disipadores de calor cuando están en contacto con su muestra, por lo que es posible que desee agregar un calefactor de objetivos si utiliza estos dispositivos ópticos.
Recintos microscópicos para imágenes de células vivas
Otra opción es un recinto microscópico de incubación completo. A pesar de que los recintos no pueden ser retirados fácilmente del microscopio, pueden mantener el control ambiental dentro de un volumen superior al de una cámara de platina superior (Stage Top).
Estos recintos son lo suficientemente espaciosos para instalar instrumentos de dispensación de fluidos y crear ambientes con temperaturas estables. Esto es beneficioso tanto para la muestra como para el microscopio, ya que los ciclos térmicos frecuentes (entre frío y calor) pueden aumentar el desgaste de los componentes del microscopio. Muchos fabricantes ofrecen un modelo de oscurecimiento para proporcionar un ambiente oscuro dentro del recinto. Esto evita buscar una sala microscópica aparte.
Efectos de los cambios en el ambiente de una habitación al procesar imágenes en intervalos
Es importante considerar que la mayoría de los sistemas de incubación microscópicos están calibrados para una temperatura promedio de 25 °C (77 °F). Algunos sistemas controlan y corrigen con precisión y rapidez la temperatura. Aun así, evite en lo posible colocar su instrumento en áreas sujetas a cambios térmicos. Tenga presente que no puede colocar el instrumento debajo de las rejillas de ventilación del microscopio; sin embargo, de ser inevitable, use deflectores para desviar el flujo de aire proveniente del microscopio.
Finalmente, asegúrese de que el microscopio esté ubicado lejos de grandes instrumentos como centrífugas, refrigeradores, congeladores y puertas de uso frecuente. Estos pueden transmitir artefactos de vibración al procesamiento de imágenes experimental de serie periódica. Una mesa antivibración neumática podría ser útil para aislar su instrumento, pero es mejor evitar el riesgo de cualquier interrupción vibratoria en su procesamiento de imágenes experimental.
Saque más provecho de su microscopio
¿Desea obtener más consejos para optimizar su microscopio? No olvide consultar la primera y segunda parte de esta serie de publicaciones para descubrir otras interesantes actualizaciones para sistemas a fin de llevar a cabo un procesamiento de imágenes efectivo de células vivas. A continuación, se nombran algunas:
- Cinco maneras de ampliar tanto la vida útil como el rendimiento de su microscopio
- ¿Cómo obtener una duración más prolongada y un mejor funcionamiento de la fuente de luz de su microscopio?
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Cinco maneras de ampliar tanto la vida útil como el rendimiento de su microscopio
