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Microscopía con lámina/hoja de luz para una observación más profunda de la vida

Microscopía con lámina/hoja de luz para una observación más profunda de la vida

Este seminario web le enseñará los principios de la microscopía con lámina/hoja de luz. El microscopio con lámina/hoja de luz Alpha3 combina cortes ópticos muy finos con los dispositivos ópticos de Olympus de alta calidad para un procesamiento de imágenes 3D de alta resolución a partir de muestras biológicas en vivo y fijas. El sistema microscópico Alpha3 integra tecnologías de vanguardia que ofrecen una calidad de imagen sin precedentes con una resolución subcelular mejorada. A través de este seminario web, descubrirá un sistema modular y altamente versátil dotado de láminas/hojas de luz para la investigación de rutina o de alto nivel, que conlleva a un procesamiento macro a micro de imágenes a partir de órganos completos, como también de muestras muy pequeñas.

Presentador:

Irina Rakotoson, directora de productos de ciencias de la vida

Preguntas frecuentes

Preguntas frecuentes de seminarios web | Microscopía con lámina/hoja de luz para una observación más profunda de la vida

¿Cuál es la resolución máxima del sistema Alpha3 en los planos X e Y, y a lo largo del eje Z?

La resolución máxima en los planos X e Y se da por la longitud física de los píxeles de la cámara que, a su vez, se divide según la magnificación del objetivo. Por ejemplo, a 40X, la resolución máxima es de 6,5 µm/40 = 0,16 µm.

En la microscopía con lámina/hoja de luz, la resolución máxima a lo largo del eje Z se limita al ancho de la lámina/hoja de luz que ilumina: la lámina/hoja de luz más angosta que puede proporcionar el sistema Alpha3 es de 2 µm. Para magnificaciones superiores a 10X, es posible escanear cada (1) micra de la muestra. A continuación, a través del teorema de Nyquist se limita la resolución máxima en el plano Z para duplicarla, lo cual resultaría en 2 µm.

¿Qué tipos de láseres se usan en la microscopía con láminas/hojas de luz y cuál es su potencia nominal media?

Es posible integrar de cuatro a seis líneas láser en los combinadores. En su mayoría son diodos láser, a excepción de la línea 561 que es de tipo sólido bombeado (DPS, siglas en inglés) y requiere un modulador para configurar la potencia. La potencia nominal media suele estar entre 50 y 100 mW.

¿El sistema Alpha3 puede soportar una configuración de cámara dual?

La mayoría de las configuraciones son lo suficientemente adaptables a una cámara, aunque también es posible aplicar dos configuraciones de cámara.

¿El sistema Alpha3 es capaz de procesar imágenes multicolores?

Existen dos métodos para procesar imágenes multicolores con el sistema Alpha3. El primero implica escanear la misma región de la muestra varias veces, y cambiar en cada momento el láser y el filtro de emisión.

El segundo es el «modo intermitente» que emplea un filtro de rechazo después del objetivo, el cual deja pasar todo el espectro de banda ancha pero segmenta las líneas láser. De esta forma, es posible escanear la muestra una vez y marcar cada láser en función de cada capa. Este método es más rápido y proporciona una ubicación mucho mejor para las muestras vivas.

¿Es posible integrar láseres IR en el sistema Alpha3 para aplicar una microscopía de lámina/hoja de luz multifotónica?

Hasta hoy, 730 nm es la longitud de onda más larga que proporciona el espectro visible; sin embargo, Olympus está estudiando nuevas aplicaciones multifotónicas.

¿Es posible usar algoritmos de deconvolución convencionales en datos generados por el sistema Alpha3?

Sí, la deconvolución puede llevarse a cabo en los datos generados, y este estudio se ha llevado a cabo previamente por Olympus.

¿Las imágenes adquiridas con el sistema Alpha3 pueden ser exportadas a una plataforma de código abierto para la deconvolución?

El software incluido con el sistema Alpha3 genera imágenes que pueden abrirse con cualquier software de código abierto. Sin embargo, el sistema que se usa para el procesamiento de las imágenes debe ser capaz de cargar y procesar grandes conjuntos de datos de 300 a 800 GB.

¿Existen requisitos especiales asociados a la gestión de datos o el almacenamiento de imágenes adquiridas a través de la microscopía con lámina/hoja de luz?

El sistema Alpha3 es suministrado con un PC, dotado de suficiente memoria para administrar grandes conjuntos de datos; no obstante, se recomienda el uso de un servidor para un almacenamiento a largo plazo. Por otra parte, es mejor cargar los datos a un servidor lo más rápido posible después de la adquisición.

¿Cuál es la velocidad de adquisición más rápida que puede obtenerse con el escaneo óptico de enfoque?

El escaneo óptico de enfoque disminuirá en velocidad de adquisición mediante un factor 4. Por ejemplo, en un tiempo de exposición de 10 ms, es posible una velocidad de fotograma de 40 ms, que proporcionará 20 fotogramas/segundo.

¿Es fácil esterilizar los portamuestras y las pinzas?

Todas las piezas están hechas de acero inoxidable de grado quirúrgico, son inertes y resistentes a la corrosión y a los productos químicos. Es posible esterilizar estas piezas en autoclaves o sumergirlas en etanol puro.

¿Qué cámara es suministrada o viene incluida con el sistema Alpha3?

El sistema es suministrado con la cámara CMOS digital ORCA-flash 4.0. Presenta píxeles de 6,5 µm y un sensor de 2048 × 2048.

¿El sistema Alpha3 cuenta o es suministrado con una tarjeta de red rápida para la transferencia de datos?

Ofrecemos opciones de 1, 10 y 100 GHz para la transferencia de datos; pero, también es posible responder a solicitudes personalizadas.


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El microscopio de hoja de luz avanzado de fluorescencia proporciona a los investigadores una solución de hoja/lámina de luz flexible y de alto rendimiento. Gracias a un escaneo de enfoque óptico inteligente, este microscopio ejecuta un procesamiento de imágenes uniforme y sin artefactos a través de todo el campo visual. Actualice con facilidad el sistema Alpha3 para satisfacer sus necesidades específicas mediante la selección de opciones —tales como el escaneo inteligente 3D, la aplicación mosaico XY o los controles de temperatura— basada en sus objetivos.

  • Lámina/hoja de luz multidireccional con escaneo de enfoque en tiempo real para un procesamiento de imágenes 3D rápido y sin artefactos.
  • Compatible con una gran selección de dispositivos ópticos Olympus de alta calidad.
  • Accesorios compatibles para una variedad de muestras y resistentes a disolventes orgánicos o tampones acuosos.
  • Software y estación de trabajo QtSPIM que son fáciles de usar y permiten una adquisición de imágenes 3D a máxima velocidad sin problemas.

Microscopía con lámina/hoja de luz para una observación más profunda de la vida

 Este seminario web le enseñará los principios de microscopía de lámina/hoja de luz. El microscopio de lámina/hoja de luz Alpha3 combina cortes ópticos muy finos con los dispositivos ópticos de Olympus de alta calidad para un procesamiento de imágenes 3D de alta resolución a partir de muestras biológicas en vivo y fijas. El sistema microscópico Alpha3 integra tecnologías de vanguardia que ofrecen una calidad de imagen sin precedentes con una resolución subcelular mejorada. A través de este seminario web, descubrirá un sistema modular y altamente versátil dotado de láminas/hojas de luz para la investigación de rutina o de alto nivel, que conlleva a un procesamiento macro a micro de imágenes a partir de órganos completos, como también de muestras muy pequeñas.

Procedimiento de montaje de muestras grandes

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Preguntas frecuentes

Preguntas frecuentes sobre seminarios web | Microscopía con lámina/hoja de luz para una observación más profunda de la vida

¿Cuál es la resolución máxima del sistema Alpha3 en los planos X e Y, y a lo largo del eje Z?

La resolución máxima en los planos X e Y se da por la longitud física de los píxeles de la cámara que, a su vez, se divide según la magnificación del objetivo. Por ejemplo, a 40X, la resolución máxima es de 6,5 µm/40 = 0,16 µm.

En la microscopía con lámina/hoja de luz, la resolución máxima a lo largo del eje Z se limita al ancho de la lámina/hoja de luz que ilumina: la lámina/hoja de luz más angosta que puede proporcionar el sistema Alpha3 es de 2 µm. Para magnificaciones superiores a 10X, es posible escanear cada (1) micra de la muestra. A continuación, a través del teorema de Nyquist se limita la resolución máxima en el plano Z para duplicarla, lo cual resultaría en 2 µm.

¿Qué tipos de láseres se usan en la microscopía con láminas/hojas de luz y cuál es su potencia nominal media?

Es posible integrar de cuatro a seis líneas láser en los combinadores. En su mayoría son diodos láser, a excepción de la línea 561 que es de tipo sólido bombeado (DPS, siglas en inglés) y requiere un modulador para configurar la potencia. La potencia nominal media suele estar entre 50 y 100 mW.

¿El sistema Alpha3 puede soportar una configuración de cámara dual?

La mayoría de las configuraciones son lo suficientemente adaptables a una cámara, aunque también es posible aplicar dos configuraciones de cámara.

¿El sistema Alpha3 es capaz de procesar imágenes multicolores?

Existen dos métodos para procesar imágenes multicolores con el sistema Alpha3. El primero implica escanear la misma región de la muestra varias veces, y cambiar en cada momento el láser y el filtro de emisión.

El segundo es el «modo intermitente» que emplea un filtro de rechazo después del objetivo, el cual deja pasar todo el espectro de banda ancha pero segmenta las líneas láser. De esta forma, es posible escanear la muestra una vez y marcar cada láser en función de cada capa. Este método es más rápido y proporciona una ubicación mucho mejor para las muestras vivas.

¿Es posible integrar láseres IR en el sistema Alpha3 para aplicar una microscopía de lámina/hoja de luz multifotónica?

Hasta hoy, 730 nm es la longitud de onda más larga que proporciona el espectro visible; sin embargo, Olympus está estudiando nuevas aplicaciones multifotónicas.

¿Es posible usar algoritmos de deconvolución convencionales en datos generados por el sistema Alpha3?

Sí, la deconvolución puede llevarse a cabo en los datos generados, y este estudio se ha llevado a cabo previamente por Olympus.

¿Las imágenes adquiridas con el sistema Alpha3 pueden ser exportadas a una plataforma de código abierto para la deconvolución?

El software incluido con el sistema Alpha3 genera imágenes que pueden abrirse con cualquier software de código abierto. Sin embargo, el sistema que se usa para el procesamiento de las imágenes debe ser capaz de cargar y procesar grandes conjuntos de datos de 300 a 800 GB.

¿Existen requisitos especiales asociados a la gestión de datos o el almacenamiento de imágenes adquiridas a través de la microscopía con lámina/hoja de luz?

El sistema Alpha3 es suministrado con un PC, dotado de suficiente memoria para administrar grandes conjuntos de datos; no obstante, se recomienda el uso de un servidor para un almacenamiento a largo plazo. Por otra parte, es mejor cargar los datos a un servidor lo más rápido posible después de la adquisición.

¿Cuál es la velocidad de adquisición más rápida que puede obtenerse con el escaneo óptico de enfoque?

El escaneo óptico de enfoque disminuirá en velocidad de adquisición mediante un factor 4. Por ejemplo, en un tiempo de exposición de 10 ms, es posible una velocidad de fotograma de 40 ms, que proporcionará 20 fotogramas/segundo.

¿Es fácil esterilizar los portamuestras y las pinzas?

Todas las piezas están hechas de acero inoxidable de grado quirúrgico, son inertes y resistentes a la corrosión y a los productos químicos. Es posible esterilizar estas piezas en autoclaves o sumergirlas en etanol puro.

¿Qué cámara es suministrada o viene incluida con el sistema Alpha3?

El sistema viene con la cámara CMOS digital ORCA-flash 4.0. Presenta píxeles de 6,5 µm y un sensor de 2048 × 2048.

¿El sistema Alpha3 cuenta o es suministrado con una tarjeta de red rápida para la transferencia de datos?

Ofrecemos opciones de 1, 10 y 100 GHz para la transferencia de datos; pero, también es posible responder a solicitudes personalizadas.


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Alpha3

El microscopio de hoja de luz avanzado de fluorescencia proporciona a los investigadores una solución de hoja/lámina de luz flexible y de alto rendimiento. Gracias a un escaneo de enfoque óptico inteligente, este microscopio ejecuta un procesamiento de imágenes uniforme y sin artefactos a través de todo el campo visual. Actualice con facilidad el sistema Alpha3 para satisfacer sus necesidades específicas mediante la selección de opciones —tales como el escaneo inteligente 3D, la aplicación mosaico XY o los controles de temperatura— basada en sus objetivos.

  • Lámina/hoja de luz multidireccional con escaneo de enfoque en tiempo real para un procesamiento de imágenes 3D rápido y sin artefactos.
  • Compatible con una gran selección de dispositivos ópticos Olympus de alta calidad.
  • Accesorios compatibles para una variedad de muestras y resistentes a disolventes orgánicos o tampones acuosos.
  • Software y estación de trabajo QtSPIM que son fáciles de usar y permiten una adquisición de imágenes 3D a máxima velocidad sin problemas.
Expertos
Irina Rakotoson
Gerente de producto - Ciencias de la Vida

Hola, soy Irina. Me encantaría dialogar con usted sobre la microscopía de lámina/hoja de luz. Poseo una maestría en biología belular, fisiología y patología especializada en envejecimiento, otorgada por la Universidad Paris-Descartes. Antes de formar parte de la empresa PhaseView en calidad de gerente de producto, trabajé para un laboratorio de investigación de neurociencias (SPPIN) con el objetivo de optimizar los protocolos de limpieza destinados a la instalación central de microscopía.

Microscopía con lámina/hoja de luz para una observación más profunda de la vidadic 23 2024
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