Objektive spielen in einem Mikroskopsystem eine wichtige Rolle, da sie die Bildqualität entscheidend beeinflussen. Tatsache ist, dass viele konventionelle Objektive Bildverarbeitungsprobleme mit sich bringen, die die Leistung des Mikroskops beeinträchtigen können.

Glücklicherweise entwickelt sich die Optiktechnologie weiter, sodass sich eine Reihe häufiger Bildverarbeitungsfehler mittlerweile korrigieren lassen. Unser heutiger Blogartikel untersucht drei Vorteile der Verwendung von X Line^™ Hochleistungsobjektiven bei der Erfassung von hochwertigen Imaging-Daten.

1. Erweiterte Plankorrektur für einheitliche Qualität.

Bei Verwendung eines konventionellen Objektivs kann es eine Herausforderung sein, in einem großen Sehfeld (field of view, FOV) gleichmäßig verzeichnungsfreie Bilder zu erhalten. Mangelnde Planität kann zu dunklen oder verschwommenen Bildrändern führen, die die Bildqualität beeinträchtigen und die Analyse oder Vermessung von Proben erschweren.

Welche Verbesserung bringen unsere X Line-Objektive? Unsere Objektive bieten bei der Betrachtung großer FOV eine unübertroffene Planität von der Mitte bis an den Rand. Die gleichbleibend hohe Bildqualität über das gesamte Sehfeld trägt dazu bei, mittels „Stitching“ präzise Bilder von großen Proben wie zum Beispiel ganzen Gewebeschnitten zusammenzusetzen. Außerdem können Sie sich darauf verlassen, dass Sie zuverlässige Bilddaten für die Gehaltsbestimmung erhalten.

Sehen wir uns ein Beispiel an:

Diese 12 × 12-Bilder des Gehirnschnitts einer Fucci2-Tg-Maus wurden mit dem Konfokalmikroskop FV3000 unter Verwendung eines konventionellen und eines X Line 60x Immersionsölobjektivs (NA 1,42) aufgenommen. (Cyan: DAPI (405 nm).)

Es ist gut erkennbar, dass die verbesserte Planität des X Line-Objektivs über ein weites FOV zu einem kontrastreicheren gekachelten Bild führt.

(Bilder mit freundlicher Genehmigung von Takako Kogure und Atsushi Miyawaki vom Laboratory for Cell Function Dynamics, RIKEN Center for Brain Science, Japan.)

2. Erweiterte Farbkorrektur für außergewöhnliche Farbwiedergabe.

Chromatische Aberration ist eine häufig auftretende optische Herausforderung. Sie tritt auf, wenn eine Linse verschiedene Farben nicht an derselben Stelle fokussieren kann. Im Wesentlichen wirkt die Linse wie ein Prisma – Farben, die die Linse passieren, werden unter verschiedenen Winkeln gebrochen. Ohne Korrektur sehen die mikroskopischen Bilder verzerrt aus und zeigen Farbsäume an den Rändern. Trotzdem bieten viele konventionelle Linsen nur eine unzureichende Farbkorrektur.

Unsere X Line-Objektive sorgen für eine breite Korrektur der chromatischen Aberration zwischen 400 und 1000 nm. Dies führt zu einer deutlich besseren Farbwiedergabe bei der Hellfeld- und Fluoreszenzmikroskopie. Eine genaue Farbwiedergabe erhöht auch die Zuverlässigkeit des Bildes, sodass Sie sich auf Ihre Daten verlassen können.

Beachten Sie den Unterschied in den folgenden Bildern.

Diese Bilder einer mit der FISH-Technik markierten HeLa-Zelle wurden mit dem Konfokalmikroskop FV3000 unter Verwendung eines konventionellen und eines X Line 60x Immersionsölobjektivs (NA 1,42) aufgenommen. (CEP17 (Spektrum Grün), CEP18 (Spektrum Orange) und der Zellkern (DAPI)).

Mit dem breiten Farbkorrekturbereich des X Line-Objektivs von 400–1000 nm liegen grüne und rote Signale exakt innerhalb des Zellkerns. In dem mit dem konventionellen Objektiv aufgenommenen Bild erscheinen Signale, die sich an der Unterseite des Zellkerns befinden, außerhalb des Zellkerns.

3. Verbesserte numerische Apertur für ausgezeichnete Bildqualität.

Die numerische Apertur eines Objektivs definiert sein Vermögen, Licht zu fokussieren, und legt die Bildauflösung fest. Im Wesentlichen kann ein Objektiv mit einer höheren numerischen Apertur hellere Bilder mit höherer Auflösung erfassen, so dass Sie mehr von Ihrer Probe sehen können.

Im Gegensatz dazu begrenzt ein Objektiv mit starker Vergrößerung, aber kleiner numerischer Apertur, die Möglichkeit, Einzelheiten der Probe zu erkennen. Damit steigt das Risiko, wichtige Informationen zu übersehen.

Unsere X Line-Objektive bieten eine höhere numerische Apertur von bis zu 1,45 und gewährleisten eine ausgezeichnete Bildqualität für die Gehaltsbestimmung. Eine verbesserte numerische Apertur kann bei vielen Anwendungen hilfreich sein, z. B. bei der Erkennung schwacher Signale bei der Fluoreszenzmikroskopie oder bei der Minimierung von Phototoxizität und Photobleaching im Verlauf von Imaging-Experimenten mit fluoreszenzmarkierten Lebendzellen.

Im folgenden Beispiel sehen Sie, wie die höhere NA unserer X Line-Objektive die Helligkeit verbessert.

Diese Weitfeld-Fluoreszenzbilder von NG108-15-Zellen wurden mit konventionellen und X Line 20x Trockenobjektiven aufgenommen. (Blau: Zellkern, grün: Mikrotubuli, rot: Aktin-Filamente.)

Wie im Bildvergleich erkennbar ist, erfasst die verbesserte numerische Apertur des X Line-Objektivs mehr Licht und führt zu einem helleren Bild.

Hervorragende Objektive ermöglichen effiziente Experimente

Bei konventionellen Objektiven müssen Sie häufig einen Kompromiss zwischen den folgenden drei wichtigen Pluspunkten eingehen: numerische Apertur, Planität und Farbkorrektur. Wenn Sie das Objektiv wechseln, um in einem Bereich eine Verbesserung zu erzielen, kann dies zu Beeinträchtigungen in einem anderen Bereich führen.

Die Hochleistungsobjektive der Serie X Line von Olympus sind mit ultradünnen Linsen ausgestattet, damit Sie alle drei Vorteile in einem Objektiv nutzen und effizientere Experimente durchführen können. Erfahren Sie mehr über die Serie X Line und finden Sie die richtigen Objektive für Ihre Anwendung.

* Obwohl sie zu einer der wichtigsten Zelllinien in der medizinischen Forschung wurde, müssen wir unbedingt anerkennen, dass Henrietta Lacks Beitrag zur Wissenschaft ohne ihre Zustimmung erfolgte. Diese Ungerechtigkeit führte nicht nur zu wichtigen Entdeckungen in der Immunologie, bei Infektionskrankheiten und Krebs, sondern warf auch wichtige Diskussionen über Datenschutz, Ethik und Einwilligung in der Medizin auf. 
Um mehr über das Leben von Henrietta Lacks und ihren Beitrag zur modernen Medizin zu erfahren, klicken Sie hier.
http://henriettalacksfoundation.org/
 

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